脂质修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统技术方案

本发明专利技术公开了一种包含脂质修饰载体的微针阵列,用于疫苗佐剂传递系统。微针阵列包括基底和若干固定于所述基底的微针；所述基底由糖类、聚维酮类、纤维素类、或淀粉类辅助材料组成；每一微针包含脂质A修饰载体、上述辅助材料(赋型剂)和疫苗成分；所述脂质A修饰载体为脂质体、类脂体、微囊、或纳米粒等；疫苗成分主要为病原体抗原蛋白。本发明专利技术相比已有疫苗制剂具有以下优点：脂质A修饰脂质体微针阵列疫苗佐剂传递系统能够包含不同疫苗成分形成针对不同病原体的疫苗，适用范围广；选用可生物降解材料，安全性高；且微针阵列疫苗佐剂系统为固体制剂，稳定性高；接种方便，能够自行完成接种，且通过口腔粘膜接种，能够避免疫苗随唾液流失，能够诱导机体建立粘膜免疫。

【技术实现步骤摘要】
脂质修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统
本专利技术涉及预防感染性疾病的疫苗佐剂领域，尤其涉及新型疫苗佐剂传递系统， 本质为采用功能载体构建微针阵列，用作疫苗佐剂传递系统。
技术介绍
疫苗是能够产生抗体的免疫原物质，是用于预防传染病的制剂。经过多年发展，目 前疫苗从来源上分主要包括如下类型：1)灭活疫苗选用免疫原性好的细菌、病毒、立克次 体、螺次体等，经人工培养，再用物理或化学方法将其杀灭制成。2)减毒活疫苗用人工定向 诱变方法，或从自然界筛选出毒力减弱或基本无毒的活微生物制成活疫苗。如卡介苗（BCG， 结核病）、麻疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗（小儿麻痹症）等。3)RNA/DNA疫苗RNA/DNA疫苗是 将蛋白抗原的表达基因克隆在表达载体上，注入体内，使其抗原在体内表达后激发机体产 生免疫反应，其制备过程复杂，安全性较低。4)类毒素（外毒素）细胞外毒素经甲醛处理 后失去毒性，仍保留免疫原性，为类毒素。其中加适量磷酸铝和氢氧化铝即成吸附精制类毒 素。5)亚单位疫苗（组分疫苗）除去病原体中无免疫作用甚至有害的成分（尤其是遗传物 质），保留其有效的免疫原性成分制成的疫苗。 目前疫苗多通过传统注射接种，系统免疫诱导效率高；但副作用多，生产成本高， 需专业接种人员，而无法诱导机体产生黏膜免疫应答降低了疫苗预防效率。 可溶微针疫苗能高效传递Ag，无痛，作用时间较长，使用方便，最近备受瞩目；但 目前微针疫苗多为皮肤贴剂，也难以诱发粘膜免疫；缺乏免疫细胞特异性传递；佐剂功能 弱。 相比较而言，粘膜疫苗具有一些明显优势：1)腔道含有大量粘膜相关淋巴组织 (MALT)，粘膜接种既能产生系统免疫应答，也能产生广泛的（接种部位及远端）黏膜免疫 应答；由于粘膜是病原体入侵主要途径，因此粘膜免疫能够对病原体形成二道防线；2)无 机械损伤，使用方便，消除了注射等器材及其污染，节省了专业人员培训费用，易于推广；3) 生产成本较低。因此人们积极发展各种粘膜疫苗。 口服疫苗使用方便，但需要较大剂量，既增加了成本也容易引起抗原耐受，而胃肠 道苛刻环境更成为难以逾越的障碍。肺部给药存在肺囊纤维化危险，辉瑞Exubera? (吸 入胰岛素）正因此而撤出市场[29]。鼻腔粘膜富含MALT却紧邻中枢神经系统（CNS)，接种 风险较高，例如，NasalHu?致部分接种者面瘫（Bell's palsy),随后撤出市场。 口腔环境缓和，利于保持Ag活性；舌下接种能够产生等同于鼻腔接种的预防效 果，但不会产生CNS毒性。然而，口腔粘膜被覆复层鳞状上皮，且MALT距离接种表面相对较 远；而唾液及吞咽也导致Ag大量流失，接种时需麻醉动物，对人来说完全不可行。 此外，发展粘膜疫苗还存在着一些普遍障碍：1)亚单位疫苗Ag被抗原提呈细胞 (APC)摄取后，一般通过MHC II呈递，难以产生细胞毒性淋巴细胞（CTL)，无法消除侵入细胞 的病原体；且部分Ag被非APC摄取也降低效率。2)Ag易于接种部位失活。3)不断分泌的 粘液不但阻碍APC摄取Ag而且流动、更新较快，往往导致疫苗未进入机体即大量流失。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有疫苗的不足，提供一种脂质A修饰载体构建的微针阵 列疫苗佐剂传递系统。 本专利技术是通过以下技术方案实现的： 一种脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，所述微针阵列包括基底 和若干固定于所述基底的微针；每一所述的微针其成分包括脂质A修饰载体、辅助材料和 疫苗成分，形成疫苗佐剂传递系统。 微针阵列包括基底和若干固定于基底的微针；每一微针其成分包括脂质A修饰载 体（包含疫苗成分）及辅助材料（赋型剂）。 脂质A修饰载体，脂质A包括单磷脂A，脂质A及脂多糖；载体包括单层、寡层、多 层及多囊脂质体，类脂体，微囊，或纳米粒；载体体荷正电、负电或中性。 作为上述方案的进一步优化，所述微针阵列的基底横截面为方形（一般边长小于 3厘米）或圆形（一般直径小于3厘米），由糖类、聚维酮类（PVP)、淀粉类、纤维素类、或此 类可生物降解材料（赋型剂）组合构成。 作为上述方案的进一步优化，所述固定于基底的微针，数目一般大于3 ;高度为 50-500 μ m ;间距为100-400 μ m ;为椎体或顶端为椎体的柱体，底面直径范围为50-500 μ m。 作为上述方案的进一步优化，所述疫苗成分选自亚单位疫苗抗原物质、类毒素、灭 活或减毒病原体、包含抗原的疫苗载体及疫苗佐剂；所述包含抗原的疫苗载体为载抗原的 脂质体（包括单层、多层、多囊脂质体）、类脂体、纳米粒或微囊；所述疫苗佐剂为脂质A、单 磷脂A、LPS (脂多糖）、CpG-ODN、铝盐、或菌毛蛋白。 作为上述方案的进一步优化，所述疫苗成分或包封于所述脂质A修饰载体内、或 吸附于所述脂质A修饰载体表面；或所述疫苗成分部分包封于所述脂质A修饰载体内、部 分吸附于所述脂质A修饰载体、或与载体简单混合。 作为上述方案的进一步优化，所述的脂质A修饰脂质体微针阵列疫苗佐剂传递系 统通过口腔粘膜接种或皮肤接种。 脂质A修饰脂质体微针阵列疫苗佐剂传递系统的制备过程主要通过聚二甲氧硅 烷微针阵列模具完成。 (1)先制备脂质A修饰载体（或载有疫苗成分）； (2)将分散或溶解于溶剂的脂质A修饰载体、辅助成分（或包括疫苗成分）填充于 微针阵列模具的针孔内，再覆以基底成分； (3)将填充后的微针阵列模具在常温条件下置于干燥皿（含无水氯化钙、五氧化 二磷等干燥剂）干燥除去水分或通过冰冻干燥除去水分，剥落，得到所述一种脂质A修饰载 体微针阵列疫苗。 与现有技术相比，本专利技术不同于传统粘膜疫苗，也不同于已有的微针疫苗（均通 过皮肤接种），本专利技术克服二者之短又兼具二者之长；适用于不同病原体抗原的新型微针 阵列疫苗系统，具有以下优点： (1)适用范围广，本专利技术的脂质A修饰载体微针阵列疫苗佐剂传递系统能够包含 不同疫苗成分形成针对不同病原体的疫苗；疫苗成分可以是抗原，减毒或灭活病原体； (2)稳定性高，本专利技术的脂质A修饰载体微针阵列疫苗佐剂传递系统为固体制剂， 稳定性高;MAV可以保护抗原免遭（接种）环境物质破坏，增强体内外稳定性；有望能够成 为脱冷链或控温链适用疫苗。 (3)安全性高，所用材料具有良好生物相容性，包封抗原物质获得亚单位疫苗，具 有较高安全性。 (4)免疫诱导效力强，脂质A修饰载体微针阵列疫苗通过皮肤接种，方便而无痛， 能够激活皮肤朗格汉斯细胞（Langerhans cell)，诱导机体产生抗原特异性免疫应答，防御 病原体入侵；脂质A修饰载体微针阵列疫苗通过口腔粘膜接种，能够避免疫苗随唾液流失， 也能够消除口腔粘膜复层鳞状细胞及表面粘液对于疫苗摄取的阻碍作用，提高抗原提呈细 胞对于疫苗的摄取及利用效率，有效激活机体免疫系统。 (5)建立多重防御病原体，脂质A修饰载体微针阵列疫苗佐剂传递系统通过口腔 粘月旲接种能够激活机体免疫系统，既能够广生系统免疫应答，也能够广生粘I吴免疫应答，对 病原体入侵形成双重防御屏障。通过皮肤接种，方便而无痛，能够激活皮肤朗格汉斯细胞 (Langerhans c本文档来自技高网...

【技术保护点】
脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特征在于：微针阵列包括基底和若干固定于基底的微针；每一所述微针其成分包括脂质A修饰载体、辅助材料和疫苗成分，形成疫苗佐剂传递系统。

【技术特征摘要】
1. 脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特征在于：微针阵列包括基 底和若干固定于基底的微针；每一所述微针其成分包括脂质A修饰载体、辅助材料和疫苗 成分，形成疫苗佐剂传递系统。2. 根据权利要求1所述的脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特征 在于：所述的基底由糖类、聚维酮类（PVP)、淀粉类、纤维素类或这些可生物降解材料组合 构成。3. 根据权利要求1所述的脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其 特征在于：所述的若干固定于基底的微针，数目一般大于3 ;高度为50-500μπι ;间距为 100-400 μ m ;为椎体或顶端为椎体的柱体，直径范围为50-500 μ m。4. 根据权利要求1所述的脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特征 在于：所述的脂质A修饰载体，脂质A包括单磷脂A，脂质A及脂多糖；所述的载体包括单层、 寡层、多层或多囊脂质体，类脂体，微囊，或纳米粒；载体荷正电、负电或中性。5. 根据权利要求1所述的脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特 征在于：所述的脂质A修饰载体，可以进一步采用功能分子修饰，例如以甘露糖基团修饰载 体，以达到提高抗原传递目的。6. 根据权利要求1所述的脂质A修饰载体构建的微针阵列疫苗佐剂传递系统，其特征 在于：所述辅助材料为能够赋予所述微针强度、硬度、形状的的赋型剂，选用糖类（例如蔗 糖、海藻糖、乳糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：王汀，王宁，
申请(专利权)人：安徽医科大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34