弗尼斯弧菌检测用引物对、试剂盒及检测方法技术

弗尼斯弧菌检测用引物对、试剂盒及检测方法。所述引物对碱基序列为SEQ ID NO.1/2。本发明专利技术进一步公开了包含上述引物对的试剂盒及应用上述引物对进行PCR检测的弗尼斯弧菌检测方法。本发明专利技术的引物特异性强，检测试剂盒及方法简便易用，结果准确，具有很高的特异性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食源性病原菌的快速检测方法，尤其涉及利用PCR技术检测样品中弗尼斯弧菌的方法。还涉及检测所使用的特异性引物序列和检测试剂盒。
技术介绍
弧菌作为近海河口环境中微生物区系的成员，广泛分布于自然水域及渔业生物中，是引发人类细菌性疾病的主要病原菌之一。人们通过饮用不清洁水、食用未加工或未加工熟的带有致病性弧菌的食物，特别是海产品容易感染发病。弧菌属中霍乱弧菌(Vibr1.cholerae)、副溶血性弧菌(Vibr1 parahaemolyticus)、创伤弧菌(Vibr1vulcificus)、河弧菌(Vibr1 fluvialis)、拟态弧菌(Vibr1 minicus)、麦氏弧菌(Vibr1metschnikovii)、霍利斯弧菌(Vibr1 hollisae)、溶藻弧菌(Vibr1 alginolyticus)、弗尼斯弧菌(Vibr1 furnissii)、海鱼弧菌(Vibr1 damsela)、辛辛那提弧菌(Vibr1cincinatiensis)和S鱼弧菌(Vibr1 carchariae) 12个种为人潜在肠道致病菌。由弗尼斯弧菌引起的急本文档来自技高网...

【技术保护点】
弗尼斯弧菌检测用引物对，其特征在于，碱基序列为SEQ ID NO.1/2。

【技术特征摘要】
1.弗尼斯弧菌检测用引物对，其特征在于，碱基序列为SEQID N0.1/2。2.弗尼斯弧菌检测用试剂盒，包括碱基序列为SEQID N0.1/2的引物对。3.根据权利要求2所述的弗尼斯弧菌检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括浓度为10~lOOnmol/L的弗尼斯弧菌标准菌株的DNA提取物。4.一种弗尼斯弧菌的检测 方法，其特征在于，所述方法包括以SEQ ID N0.1/2为引物对进行PCR扩增的步骤。5.权利要求4所述的弗尼斯弧菌的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增以弗尼斯弧菌ToxS基因112~261位的核酸序列为靶基因。6.权利要求5所述的弗尼斯弧菌的检测方法，其特征在于，所述的ToxS基因的GenBank 登陆号 CP002377.1。7.权利要求4所述的弗尼斯弧菌检测方法，包括如下步骤: ⑴提取待测样品DNA，得到模板液； ⑵PCR扩增: 反应体系:模板液2μ 1U0XPCR缓冲液2yL、dNTP0.4yL、Taq酶1U、浓度为10 μ M的引物对SEQ ID N0.1/2各0.5 μ L、补充灭菌双蒸水至总体积为20 μ L ;以上各组分加入至.0.2mL PCR反应管中，混匀，5000r/min离心1s ； 反应条件:94°...

【专利技术属性】
技术研发人员：王殿夫，高世光，麻丽丹，黄大亮，腾艳霞，
申请(专利权)人：王殿夫，高世光，麻丽丹，黄大亮，腾艳霞，
类型：发明
国别省市：辽宁;21