水仙花中β-胡萝卜素的提取分离方法技术

本发明专利技术提供了一种水仙花中β-胡萝卜素的提取分离方法；包括如下步骤：步骤一，取水仙花的副冠组织，冻干并研磨至粉状，加入色素提取液，超声提取；步骤二，加入正己烷萃取，将萃取液合并洗涤，离心、真空浓缩、皂化、二次洗涤、二次浓缩、溶解即可。本发明专利技术方法获得的β-胡萝卜素样品液的纯度达98％以上，可直接作为高效液相色谱级标准品使用。本发明专利技术材料来源广泛、操作简便、成本低廉、纯度较高，适用于天源β-胡萝卜素标准品的制备。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物中色素的提取方法，具体地，涉及一种水仙花中β-胡萝卜素的 提取分离方法。
技术介绍
水仙是石蒜科（Amaryllidaceael)水仙属（Narcissus)多年生草本植物，是一种 重要的观赏花卉。有研究发现水仙花中最主要的色素成分为类胡萝卜素。类胡萝卜素是一 类重要的天然色素，主要包括胡萝卜素类和叶黄素类。其中β_胡萝卜素是胡萝卜素类最 重要的一种化合物，且具有广泛的抗氧化、抗肿瘤和消炎功效。 β_胡萝卜素在类胡萝卜素定性定量分析中广泛被用作标准品使用，但由于提取 工艺复杂、合成困难、成本较高、且易氧化、易光解的特性而致使其价格昂贵。目前已发现一 些从植物中获取类胡萝卜素的相关报道，如专利号201010515845. 6使用乙醚等有机溶剂 提取了野菊花中类胡萝卜素混合物，专利号201210097866通过无溶剂提取法获得了类胡 萝卜素混合物，并推荐直接用作食品添加剂，专利号201010233243. 1使用乙醇及微波辅助 提取方式获取类胡萝卜素混合物。然而，针对类胡萝卜素中高纯度的β-胡萝卜素的提取 分尚方式尚未见报道。
技术实现思路
针对现有技术中的缺陷，本专利技术的目的是提供一种水仙花中β-胡萝卜素的提取 分离方法。本专利技术采用的为大杯状副冠型水仙品种Narcissus pseudonarcissus 'Prof. Einstein'，其副冠为橙红色。本专利技术对其花色成分初步定性分析发现其副冠内含大量 β-胡萝卜素。因此，本文以N. pseudonarcissus 'Prof.Einstein'为植物材料，不仅发现 新型的天然源的类胡萝卜素，而且为制备廉价β-胡萝卜素标准品提供了可能。 本专利技术是通过以下技术方案实现的： 本专利技术涉及一种水仙花中β -胡萝卜素的提取分离方法，包括如下步骤： 步骤一，取水仙花的副冠组织，冻干并研磨至粉状，加入色素提取液，超声提取； 步骤二，加入正己烷萃取，将萃取液合并洗涤，离心、真空浓缩、皂化、二次洗涤、二 次浓缩、溶解即可。 优选地，包括如下步骤： 步骤一，取新鲜的水仙花的副冠组织，加液氮冻干并研磨至粉状，加入色素提取 液，超声提取； 步骤二，加入料液比（副冠组织g:正己烷ml)为1-2:5-20的正己烷，萃取至下层 为无色，合并各萃取液； 步骤三，向萃取液内加入料液比（副冠组织g:饱和NaCl溶液ml)为1-2:10-30 的饱和NaCl溶液洗涤，使上清至中性，弃下层； 步骤四，将萃取液置于真空干燥箱内真空浓缩，至溶剂挥净； 步骤五，加入料液比（副冠组织g:甲基叔丁基醚ml)为1-2:2-4的甲基叔丁基 醚溶液溶解，同时加入料液比（副冠组织g: 10% Κ0Η-甲醇溶液ml)为1-2:4-10的10% Κ0Η-甲醇溶液，避光皂化； 步骤六，向皂化液内加入料液比（副冠组织g:饱和NaCl溶液ml)为1-2:4-10的 饱和NaCl溶液和料液比（副冠组织g:甲基叔丁基醚ml)为1-2:2-4的甲基叔丁基醚溶液 使其分层，同时加入料液比（副冠组织g:饱和NaCl溶液ml)为1-2:10-30的饱和NaCl溶 液洗涤至中性，弃下层； 步骤七，取上层至离心管内，置于真空干燥箱内二次真空浓缩至干，即得橙红色 β_胡萝卜素粉末； 步骤八，将β-胡萝卜素粉末溶解于料液比（副冠组织g:甲基叔丁基醚ml)为 1-2:1-2的甲基叔丁基醚溶液内，即可。 优选地，所述水仙花的为 Narcissus pseudonarcissus 'Prof. Einstein'。 优选地，步骤一中，所述色素提取液组成为正己烷：丙酮：无水乙醇：水= 6-12:1-3:1-3:0. 5-1。 优选地，所述水仙花的副冠组织与所述色素提取液的质量体积比为1-3:20-50。 优选地，所述皂化的时间为2_5h，温度为18_25°C。 优选地，所述真空浓缩的压强为100_800Pa，温度45_70°C。 优选地，所述甲基叔丁基醚溶液中含有抗氧化剂BHT，其含量为0. 005-0. 1 %。 优选地，所述超声提取的时间为30_120min。 与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果： 1.本专利技术方法获得的胡萝卜素样品液的纯度达98%以上，可直接作为高效液 相色谱级标准品使用。 2.本专利技术材料来源广泛、操作简便、成本低廉、纯度较高，适用于天源β_胡萝卜 素标准品的制备。 【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术 人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术 人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术 的保护范围。 实施例1 本实施例涉及的水仙花的品种为 Narcissus pseudonarcissus 'Prof. Einstein'。 本实施例涉及一种水仙花中β -胡萝卜素的提取分离方法，包括如下步骤： 步骤一，取新鲜的水仙花的副冠组织，加液氮冻干并研磨至粉状，加入色素提取 液，超声提取； 步骤二，加入料液比（g:ml)为1:5的正己烧，萃取至下层为无色，合并各萃取液； 步骤三，向萃取液内加入料液比（g:ml)为1:10的饱和NaCl溶液洗漆，使上清至 中性，弃下层； 步骤四，将萃取液置于真空干燥箱内真空浓缩，至溶剂挥净； 步骤五，加入料液比（g:ml)为1:2的甲基叔丁基醚溶液溶解，同时加入料液比为 1:4的10% Κ0Η-甲醇溶液，避光皂化； 步骤六，向皂化液内加入料液比（g:ml)为1:4的饱和NaCl溶液和料液比（g:ml) 为1:2的甲基叔丁基醚溶液使其分层，同时加入料液比（g:ml)为1:10的饱和NaCl溶液洗 涤至中性，弃下层； 步骤七，取上层至离心管内，置于真空干燥箱内二次真空浓缩至干，即得橙红色 β_胡萝卜素粉末； 步骤八，将胡萝卜素粉末溶解于料液比为1:1的甲基叔丁基醚溶液内，即可。 实施效果：经本实施例方法获得的β -胡萝卜素样品液的纯度达98%以上，可直 接作为高效液相色谱级标准品使用。 实施例2 本实施例涉及的水仙花的品种为 Narcissus pseudonarcissus 'Prof. Einstein'。 本实施例涉及一种水仙花中β -胡萝卜素的提取分离方法，包括如下步骤： 步骤一，取新鲜的水仙花的副冠组织，加液氮冻干并研磨至粉状，加入色素提取 液，超声提取； 步骤二，加入料液比（g:ml)为1. 5:10的正己烧，萃取至下层为无色，合并各萃取 液； 步骤三，向萃取液内加入料液比（g:ml)为1. 5:20的饱和NaCl溶液洗漆，使上清 至中性，弃下层； 步骤四，将萃取液置于真空干燥箱内真空浓缩，至溶剂挥净； 步骤五，加入料液比g:ml)为1. 5:3的甲基叔丁基醚溶液溶解，同时加入料液比为 1. 5:6的10% Κ0Η-甲醇溶液，避光皂化； 步骤六，向皂化液内加入料液比（g:ml)为1.5:6的饱和NaCl溶液和料液比本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水仙花中β‑胡萝卜素的提取分离方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，取水仙花的副冠组织，冻干并研磨至粉状，加入色素提取液，超声提取；步骤二，加入正己烷萃取，将萃取液合并洗涤，离心、真空浓缩、皂化、二次洗涤、二次浓缩、溶解即可。

【技术特征摘要】
1. 一种水仙花中β-胡萝卜素的提取分离方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤一，取水仙花的副冠组织，冻干并研磨至粉状，加入色素提取液，超声提取； 步骤二，加入正己烷萃取，将萃取液合并洗涤，离心、真空浓缩、皂化、二次洗涤、二次浓 缩、溶解即可。2. 如权利要求1所述的水仙花中β-胡萝卜素的提取分离方法，其特征在于，包括如下 步骤： 步骤一，取新鲜的水仙花的副冠组织，加液氮冻干并研磨至粉状，加入色素提取液，超 声提取； 步骤二，加入料液比为1-2:5-20的正己烷，萃取至下层为无色，合并各萃取液； 步骤三，向萃取液内加入料液比为1-2:10-30的饱和NaCl溶液洗漆，使上清至中性，弃 下层； 步骤四，将萃取液置于真空干燥箱内真空浓缩，至溶剂挥净； 步骤五，加入料液比为1-2:2-4的甲基叔丁基醚溶液溶解，同时加入料液比为 1-2:4-10的10% KOH-甲醇溶液，避光皂化； 步骤六，向皂化液内加入料液比为1-2:4-10的饱和NaCl溶液和料液比为1-2:2-4的 甲基叔丁基醚溶液使其分层，同时加入料液比为1-2:10-30的饱和NaCl溶液洗涤至中性， 弃下层； 步骤七，取上层至离心管内，置于真空干燥箱内二次真空浓缩至干，即得橙红色β -胡 萝卜素粉末；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李欣，史益敏，卢敏，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31