一种分离纯化含几丁质结合结构域的融合蛋白的方法技术

技术编号:10326390 阅读:277 留言:0更新日期:2014-08-14 12:50
本发明专利技术将一种部分脱乙酰化的几丁质衍生物应用于分离纯化含几丁质结合结构域(Chitin Binding Domain,CBD)的融合蛋白。其原理是通过NaOH碱液加热处理,使几丁质发生脱乙酰作用,此后再通过乙酸处理使其乙酰化,从而得到部分脱乙酰化的几丁质衍生物,将这种部分脱乙酰化的几丁质衍生物应用于分离纯化含几丁质结合结构域的融合蛋白,可以很好地改善其对含有几丁质结合域(Chitin Binding Domain,CBD)的融合蛋白的特异性吸附效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程产品下游分离纯化领域,涉及将部分脱乙酰的几丁质衍生物应用于特异性吸附分离纯化含几丁质结合结构域(Chitin Binding Domain,CBD)的融合蛋白。
技术介绍
当采用基因工程技术表达一些外源性多肽或小分子蛋白时,表达产物往往会由于被宿主细胞内的蛋白酶降解而造成表达量大大降低。为了有效解决这一问题,目前普遍采用融合表达技术。所谓融合表达就是通过基因重组技术将外源小分子蛋白(多肽)拼接于融合伴侣(标签)下游进行表达,然后通过酶切或化学切割释放出目的小分子蛋白(多肽)的技术。在进行基因拼接融合时应保持目的小分子蛋白(多肽)编码基因与融合伴侣(标签)编码基因阅读框架一致。此外,在融合伴侣与目的蛋白(多肽)之间需要设计I个或I个以上的蛋白酶切位点(如肠激酶切割位点)或化学切割位点或可以自己切割的蛋白内含子(intein),这样就可以在融合蛋白表达出来之后通过酶切或化学切割或诱导自切割等手段释放出目的小分子蛋白(多肽)。采用融合伴侣(标签)进行融合表达的优点在于:⑴对分子量较小的外源目的小分子蛋白(多肽)进行融合表达可增强表达产物的稳定性,减少或避免本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种将部分脱乙酰化的几丁质衍生物应用于分离纯化含几丁质结合结构域(Chitin Binding Domain,CBD)的融合蛋白的方法。

【技术特征摘要】
1.一种将部分脱乙酰化的几丁质衍生物应用于分离纯化含几丁质结合结构域(...

【专利技术属性】
技术研发人员:谭树华张怡
申请(专利权)人:中国药科大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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