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一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备方法技术

技术编号:10324225 阅读:332 留言:0更新日期:2014-08-14 11:10
本发明专利技术公开了大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备方法,按照以下步骤进行:将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中,28℃培养48h;以灭菌生理盐水将菌液浓度调至1×108cfu/ml,置于70℃恒温水浴灭活3h,将灭活后的菌液置于高速离心机中,用3000r/min离心机离心35min,分离出上清液;向分离出的每10ml上清液中添加7500-8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀;使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后,用灭菌生理盐水清洗3次,调浓度至1×108cfu/ml,制成福尔马林灭活的菌苗液,即为大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗;将稀释后的灭活菌苗液分装后,置于4℃冰箱中保存备用。本发明专利技术的有益效果是疫苗对大鲵烂腿病免疫率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于烂腿病防治
,涉及。
技术介绍
大鲷(Andrias davidianus Olarchand)),也称娃娃鱼,是我国特有的珍稀有尾两栖动物,国家二级保护动物,其经济价值高,具有广泛开发利用的前景[I]。近年来随着大鲵养殖规模不断扩大,人工养殖大鲵经常暴发各种疾病,给广大养殖户造成惨重的经济损失。烂腿病即为人工饲养大鲵的常见疾病之一,其主要病原菌为嗜水气单胞菌[2]。嗜水气单胞菌是一种人兽鱼共患的病原菌,该菌的致病性与其产生的多种毒力因子如黏附素、毒素胞外蛋白酶等密切相关[3]。在大鲵中,已知嗜水气单胞菌还可导致细菌性败血症病[4]、腐皮病[5]、腹水病[6]、细菌性感染综合症[7]等疾病发生,引起大批死亡。本研究以大鲵及中华鳖为试验对象,研究大鲵烂腿病病原菌嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫保护效果,旨在为相关疾病的防治提供参考依据。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗制备及免疫效应,解决了目前大鲵烂腿病发病率高、治愈率的技术难的问题。 本专利技术所采用的技术方案是按照以下步骤进行:步骤1:将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中,28本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法,其特征在于按照以下步骤进行:步骤1:将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中,28℃培养48h;步骤2:离心法集菌,以灭菌生理盐水将菌液浓度调至1×108cfu/ml,置于70℃恒温水浴灭活3h,将灭活后的菌液置于高速离心机中,用3000r/min离心机离心35min,分离出上清液;步骤3:向分离出的每10ml上清液中添加7500‑8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀;步骤4:使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后,用灭菌生理盐水清洗3次,调浓度至1×108cfu/ml,制成福尔马林灭活的菌苗液,即为大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗;步骤5:将稀释后的灭活菌苗液分装后...

【技术特征摘要】
1.一种大鲵烂腿病病原菌灭活疫苗的制备方法,其特征在于按照以下步骤进行: 步骤1:将嗜水气单胞菌接种于LB培养基中,28°C培养48h ; 步骤2:离心法集菌,以灭菌生理盐水将菌液浓度调至IX 108cfu/ml,置于70°C恒温水浴灭活3h,将灭活后的菌液置于高速离心机中,用3000r/min离心机离心35min,分离出上清液; 步骤3:向分离出的每IOml上清液中添加7500-8500U的青霉素和福尔马林溶液摇匀;步骤4:使用平皿法证实嗜水气单胞菌已被彻底灭活后...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙翰昌张先进丁诗华徐敬明
申请(专利权)人:孙翰昌
类型:发明
国别省市:重庆;85

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