高通量测序文库的构建方法及其应用技术

技术编号:10086302 阅读:258 留言:0更新日期:2014-05-26 16:19
本发明专利技术公开了提供了高通量测序文库的构建方法及其应用。其中,构建高通量测序文库的方法包括:将基因组DNA片段化;将DNA片段进行末端修复;在经过末端修复的DNA片段的3’末端添加碱基A;将具有粘性末端A的DNA片段与甲基化接头相连;利用特异性探针对连接产物进行杂交捕获,以便获得目的片段;将该目的片段进行重亚硫酸盐处理,以便将该目的片段中非甲基化的胞嘧啶转换为尿嘧啶;将经过转换的目的片段进行PCR扩增;分离纯化扩增产物,该扩增产物构成高通量测序文库。采用本发明专利技术的构建高通量测序文库的方法及其应用,能够方便有效地构建样本的基因组特定区域的高通量测序文库。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了提供了高通量测序文库的构建方法及其应用。其中,构建高通量测序文库的方法包括:将基因组DNA片段化;将DNA片段进行末端修复;在经过末端修复的DNA片段的3’末端添加碱基A;将具有粘性末端A的DNA片段与甲基化接头相连;利用特异性探针对连接产物进行杂交捕获,以便获得目的片段;将该目的片段进行重亚硫酸盐处理,以便将该目的片段中非甲基化的胞嘧啶转换为尿嘧啶;将经过转换的目的片段进行PCR扩增;分离纯化扩增产物,该扩增产物构成高通量测序文库。采用本专利技术的构建高通量测序文库的方法及其应用,能够方便有效地构建样本的基因组特定区域的高通量测序文库。【专利说明】高通量测序文库的构建方法及其应用
本专利技术涉及生物
。具体地,涉及DNA甲基化检测技术,特别是涉及基因组特定区域的甲基化检测。更具体地,本专利技术提供了一种构建高通量测序文库的方法、一种确定样本的基因组特定区域的甲基化信息的方法、一种用于确定样本的基因组特定区域的甲基化信息的装置以及一种用于构建样本的基因组特定区域高通量测序文库的试剂盒。
技术介绍
DNA甲基化是研究最为深入的表观遗传学机制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构建高通量测序文库的方法,其特征在于,包括以下步骤:将基因组DNA片段化,以便获得DNA片段;将所述DNA片段进行末端修复,以便获得经过末端修复的DNA片段;在所述经过末端修复的DNA片段的3’末端添加碱基A,以便获得具有粘性末端A的DNA片段;将所述具有粘性末端A的DNA片段与甲基化接头相连,以便获得连接产物;利用特异性探针对所述连接产物进行杂交捕获,以便获得目的片段;将所述目的片段进行PCR扩增,以便获得扩增产物;以及分离纯化所述扩增产物,所述扩增产物构成所述高通量测序文库,其中,所述特异性探针是对已知甲基化位点特异性的,所述特异性探针是基于采用人类基因组作为参考序列,并且采用已知具有...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:高飞王童
申请(专利权)人:深圳华大基因科技有限公司深圳华大基因研究院
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1