【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种免疫组化二抗试剂盒，特别涉及一种包括三聚氯氰活化辣根过氧化物酶标记免疫球蛋白的免疫组 化二抗试剂盒。
技术介绍
19世纪40年代，Coons首先建立了免疫组织化学法，随后被广泛应用到生物学的多个领域，包括细胞功能研究、肿瘤形成过程的研究，以及感染性疾病的检测等。近几年来，随着杂交技术及单克隆抗体技术的发展，使制备的诊断抗体具有更高的特异性和敏感性。免疫组化技术借助这些新技术的发展，在临床病理学、免疫学、微生物学诊断中发挥了巨大的实用价值。酶标抗体技术是通过共价键经适当方法将酶连接在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于光镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶亲和抗体，其次要有良好的制备方法。辣根过氧化物酶是最常用的一种酶。抗体与酶连接的方法很多，目前较为常用的主要是戊二醛法和改良的过碘酸钠法。戊二醛是一种同型双功能偶联剂，其两个醛基可以与碱性氨基酸的氨基形成希夫碱或迈克尔加成复合物，也可以与胱氨酸的巯基、酪氨酸和组氨酸的苯环和咪唑环发生交联。抗体和辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶都是富含上述基团的生物分子，所以可以通戊二醛将两者连接起来。根据偶联反应中酶与抗体的反应的顺序，戊二醛法可以分为一步法和两步法。戊二醛一步法将偶联剂戊二醛、抗体和酶进行反应，该方法简单、省时、有效和重复性好等；缺点是交联反应速率不同，抗体蛋白的氨基酸数远较HRP为多，与戊二醛反应快，不易控制，易形成较大的聚合体，而与酶蛋白分子间的交联相应减少，...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种免疫组化二抗试剂盒，其特征在于包括三聚氯氰活化的辣根过氧化物酶标记免疫球蛋白，即CC-HRP-Ig; 所述CC-HRP-Ig由以下方法制得 (1)活化三聚氯氰与辣根过氧化物酶或免疫球蛋白反应，得活化的辣根过氧化物酶或活化的免疫球蛋白； (2)偶联所述活化的辣根过氧化物酶与免疫球蛋白偶联反应得CC-HRP-Ig，或所述活化的免疫球蛋白与辣根过氧化物酶偶联反应得CC-HRP-Ig ； 反应式如下2.根据权利要求I所述的一种免疫组化二抗试剂盒，其特征在于所述免疫球蛋白为免疫球蛋白G、单价免疫球蛋白片段Fab、双价免疫球蛋白片段F (ab) 2或免疫球蛋白M,所述三聚氯氰、辣根过氧化物酶与免疫球蛋白的质量比为I :(0. 1-10) (0. 1-10)。3.根据权利要求I所述的一种免疫组化二抗试剂盒，其特征在于步骤(I)中，所述反应温度为0°C -8°C，反应时间为2-8h。4.根据权利要求I所述的一种免疫组化二抗试剂盒，其特征在于步骤(2)中，所述反应温度为25°C -40°C，反应时间12h-24h。5.根据权利要求I所述的一种免疫组化二抗试剂盒，其特征在于所述CC-HRP-Ig存在于溶液中，所述溶液包括如下组分6-18mg/L CC-HRP-Ig，5-20g/L牛血清白蛋白，0.05-0. lg/L 硫柳汞和 pH 7...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯展波，周军，刘冬，
申请(专利权)人：南京巴傲得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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