一种新的多肽——辅助T细胞生长因子10和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－辅助Ｔ细胞生长因子１０，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的辅助Ｔ细胞生长因子１０的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——辅助T细胞生长因子10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。许多细胞因子由多肽组成，它们直接或间接地调控肌体的免抑系统，组织发育和细胞分化。现在普遍认为细胞因子能调控肌体对癌症和传染病的防御反应。这类细胞因子包括干扰素(IFN-α,IFN-β,IFN-γ)，肿瘤致死因子(TNF-α)，淋巴毒素(TNF-β)，白介素(IL1,2,3,4,5和6)，白细胞调节因子，自然杀伤细胞的细胞毒素因子(NKCF)，转化生长因子(TGF)，集落刺激因子(CSF)例如属于巨噬细胞类的(M-CSF)，粒细胞类的(G-CSF)，同属于巨噬细胞和粒细胞类的(G,M-CSF)和制瘤素M。每种上述细胞因子都有不同的特征和特异的抗增殖的，细胞抑制的，抗滤过性病源体的，调节生长的活性。体外实验证明，部分细胞因子由微生物，抗原或分裂素刺激白细胞自然生理反应所产生。以这些细胞因子刺激细胞株，所产生的现象将说明这种细胞因子的特性和功能。近来，人们通过这种方法已经证明调控T细胞生长的细胞因子不仅有白介素2，还有包括白介素4(Fernandez-Botran et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA83:9689-9693,1986；Lichtman et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:824-827,1987)G,M-CSF(Woods et al.,J.Immunol.138:4293-4297,1987)；Kupper et al.,J.Immunol.138:4288-4292,1987)以及在人体中发现的白介素1和白介素6(Houssiau et al.,Eur.J.Immunol.18:65 3-656,1988)。尽管白介素2是一种有效和作用广泛的T细胞生长因子，但是上述其它细胞因子也介导了非白介素2依赖的T细胞的增殖，从而使原先设想T细胞生长的调控过程变得更加复杂。T细胞家族有一个重要成员，辅助性T细胞。(T.sub.H)。目前，至少已发现两种不同功能的辅助性T细胞。其中一种T.sub.H1辅助B细胞分化为抗体分泌细胞，是直接免疫反应，它具有抗原特异性，是一种早期免疫应答反应。另一种T.sub.H2与细胞免疫及迟发型超敏性炎症形成有关，是一种延期免疫应答反应。几年前，人们从被注射抗原小鼠的淋巴节中收集辅助性T细胞，培养细胞系(Corradin et al.,J.Immunol.119:1048-1053,1977.)。在没有增加外源生长因子的情况下，从一开始就将这些细胞系放在有抗原的环境下培养，并定期加入抗原和照射，多数细胞都产生大量的白介素3，白介素4，白介素5和白介素6，但没有白介素2，由此，T.sub.H2类型被确定下来(Mosmann et al.,J.Immunol.136:2 348-2357,1986.)。改变实验方法，不加抗原而是利用上述辅助T细胞自身增殖的规律，从中提取一种非白介素2和白介素4依赖型的辅助T细胞生长因子(P40)。本专利技术提供一种新的T细胞生长因子，它同已知细胞因子P40有高度的同源性，这种新的生长因子可用于治疗药物以刺激辅助T细胞的增殖。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本专利技术的多肽的表达谱与辅助T细胞生长因子的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为辅助T细胞生长因子10。由于如上所述辅助T细胞生长因子10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的辅助T细胞生长因子10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新辅助T细胞生长因子10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——辅助T细胞生长因子10以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码辅助T细胞生长因子10的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码辅助T细胞生长因子10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产辅助T细胞生长因子10的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——辅助T细胞生长因子10的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——辅助T细胞生长因子10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与辅助T细胞生长因子10异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中1846-2124位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2786位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制辅助T细胞生长因子10蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与辅助T细胞生长因子10蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于辅助T细胞生长因子10表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－辅助Ｔ细胞生长因子１０，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]