The present invention relates to double aspirin crosslinked polyethylene glycol hemoglobin. The present invention relates in general to crosslinked polyethylene glycol hemoglobin and hemoglobin compositions for reducing nitrite to nitric oxide at a higher rate than natural hemoglobin in a microvascular system. Specifically, the present invention is directed at the use of intramolecular crosslinked polyethylene glycol hemoglobin conjugates with enhanced nitrite reductase activity and delivery of oxygen, carbon monoxide, nitric oxide or their mixtures to tissues with high oxygen affinity.
【技术实现步骤摘要】
双阿司匹林交联聚乙二醇化血红蛋白本申请是申请日为2013年3月15日、申请号为201380027621.2、专利技术名称为“双阿司匹林交联聚乙二醇化血红蛋白”的申请的分案申请。专利
本专利技术大体上涉及用于在微血管系统中与天然血红蛋白相比以提高的速率将亚硝酸盐还原为氧化氮的交联聚乙二醇化血红蛋白和血红蛋白组合物。具体地说,本专利技术是针对使用具有提高的亚硝酸盐还原酶活性并且还可以将氧、一氧化碳、氧化氮或其混合物递送到组织中的高氧亲和力分子内交联聚乙二醇化血红蛋白缀合物。专利技术背景基于血红蛋白的氧载体(“HBOC”)一直被与血管收缩相联系,所述血管收缩已被归因于血红素对氧化氮(NO)的清除作用。适合作为氧治疗剂的氧载体(有时称为“携带氧的血浆容量扩张剂”)(诸如稳定化血红蛋白(Hb))已显示具有有限的功效,因为其清除氧化氮,从而引起血管收缩和高血压。这些携带氧的解决方案引起血管收缩的倾向可在动物和人类中显现为高血压。尽管HBOC的血管收缩作用的潜在机制尚未充分了解,但已表明血红素铁可快速并且不可逆地与内源性NO(一种强大的血管扩张剂)组合,从而引起血管收缩。部分因为这些血管收缩作用,迄今为止尚无氧载体作为氧治疗剂(OTA)完全成功,不过包含修饰型无细胞Hb的产品已成为最有前景的产品。美国军队研发了用双二溴水杨基-富马酸酯的α链间交联的人Hb(ααHb)作为原型红细胞替代物,但在其展现肺及全身血管阻力剧烈增加之后被放弃(Hess,J.等,1991,Blood78:356A)。此产品的商业形式在令人失望的III期临床试验之后也被放弃(Winslow,R.M ...
【技术保护点】
1.一种β,β‑分子内交联聚氧化烯氧化物血红蛋白缀合物,其P50如在37℃和pH 7.4下所测量在约2至5mmHg范围内,其中当在25℃下完全脱氧时所述血红蛋白缀合物展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为至少10倍。
【技术特征摘要】
2012.03.29 US 61/617,6391.一种β,β-分子内交联聚氧化烯氧化物血红蛋白缀合物,其P50如在37℃和pH7.4下所测量在约2至5mmHg范围内,其中当在25℃下完全脱氧时所述血红蛋白缀合物展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为至少10倍。2.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为至少15倍。3.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为至少20倍。4.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为10倍至约25倍。5.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为约15倍至约25倍。6.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为10倍至约21倍。7.如权利要求1所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物当完全脱氧时展现最大亚硝酸盐还原酶活性,其比脱氧无基质血红蛋白在相同条件下测量时大为约15倍至约21倍。8.一种β,β-分子内交联聚氧化烯氧化物(PAO)血红蛋白缀合物,其P50如在37℃和pH7.4下所测量在约2.0至5.0mmHg范围内,当在25℃下完全脱氧时所述血红蛋白缀合物的最大亚硝酸盐还原酶活性是至少0.25μM/秒。9.如权利要求8所述的血红蛋白缀合物,其中最大亚硝酸盐还原酶活性是至少约0.30μM/秒。10.如权利要求8所述的血红蛋白缀合物,其中最大亚硝酸盐还原酶活性是至少约0.35μM/秒。11.如权利要求8所述的血红蛋白缀合物,其中最大亚硝酸盐还原酶活性是至少约0.40μM/秒。12.如权利要求8所述的血红蛋白缀合物,其中最大亚硝酸盐还原酶活性在0.25至约0.50μM/秒范围内。13.如权利要求8所述的血红蛋白缀合物,其中最大亚硝酸盐还原酶活性在0.30至约0.47μM/秒范围内。14.如权利要求1-13中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合至平均约7至约11个PAO分子/四聚体。15.如权利要求14所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合至平均约9至约10个PAO分子/四聚体。16.如权利要求1-15中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中当所述血红蛋白呈氧合状态时所述聚环氧烷经由硫醇反应性部分共价连接至血红蛋白分子上暴露的氨基酸侧链的硫醇基。17.如权利要求16所述的血红蛋白缀合物,其中所述聚环氧烷通过由亚烷基或亚苯基组成的接头键联至硫醇反应性部分。18.如权利要求1-17中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白是在所述血红蛋白分子的两个β82赖氨酸残基处双(2,5-二溴水杨基)富马酸酯交联的。19.如权利要求1-18中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中胶体渗透压是至少75mmHg。20.如权利要求1-19中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中P50是约2至约4mmHg。21.如权利要求20所述的血红蛋白缀合物,其中P50是约3mmHg。22.如权利要求1-21中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物与氧配位。23.如权利要求1-22中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物与一氧化碳配位。24.如权利要求1-23中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物与氧化氮配位。25.如权利要求1-24中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述血红蛋白缀合物是脱氧的。26.如权利要求1-25中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述PAO是聚乙二醇(PEG)。27.如权利要求26所述的血红蛋白缀合物,其中所述PEG的平均分子量是约2,000至约20,000道尔顿。28.如权利要求26所述的血红蛋白缀合物,其中所述PEG的平均分子量是约3,000至约10,000道尔顿。29.如权利要求26所述的血红蛋白缀合物,其中所述PEG的平均分子量是约4,000至约6,000道尔顿。30.如权利要求29所述的血红蛋白缀合物,其中所述PEG的平均分子量是约5,000道尔顿。31.如权利要求26-30中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述PEG是马来酰亚胺-PEG。32.如权利要求31所述的血红蛋白缀合物,其中所述马来酰亚胺经由亚烷基或亚苯基接头键联至所述PEG。33.如权利要求32所述的血红蛋白缀合物,其中所述亚烷基接头是亚乙基接头。34.如权利要求31-33中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述马来酰亚胺-PEG是缀合至所述血红蛋白的硫醇部分,所述硫醇部分选自所述血红蛋白的半胱氨酸残基的固有硫醇部分、所述血红蛋白的硫醇化赖氨酸残基的硫醇部分或其组合。35.如权利要求1-34中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中N-乙基马来酰亚胺缀合至所述血红蛋白的β93半胱氨酸残基。36.如权利要求31-34中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中所述马来酰亚胺-PEG具有以下结构其中∶Hb是血红蛋白,S是所述血红蛋白的硫醇,R3是亚烷基或亚苯基,X是末端基团,m是缀合至所述血红蛋白的马来酰亚胺基活化的PEG聚合物的平均数目,并且n是平均分子量为约2,000至约20,000道尔顿的PEG的氧化乙烯单元的平均数目。37.如权利要求36所述的血红蛋白缀合物,其中R3是亚乙基。38.如权利要求36或37所述的血红蛋白缀合物,其中X是甲氧基或羧基。39.如权利要求38所述的血红蛋白缀合物,其中X是甲氧基。40.如权利要求36-39中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中n是约3,000至约10,000道尔顿。41.如权利要求36-39中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中n是4,000至约6,000道尔顿。42.如权利要求36-39中任一项所述的血红蛋白缀合物,其中n是约5,000道尔顿。43.如权利要求36-42中任一项所述的血红...
【专利技术属性】
技术研发人员:K·D·范德格里夫,A·马拉瓦尔立,S·D·奥尔森,
申请(专利权)人:桑加特公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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