The present invention provides the application of transcription factor MyoD in regulating pig RTL1 gene expression. Taking RTL1 as the research object, we constructed the recombinant plasmid of double luciferase reporter gene of pig RTL1 gene promoter, and found the core promoter region of RTL1. Then we verified the interaction between transcription factor MyoD and RTL1 core promoter, then constructed MyoD super expression vector and synthetic small interfering RNA to detect the effect of MyoD on RTL1, and constructed a transcription factor MyoD binding site mutant fluorin. Luciferase activity was detected after transfection of PK15 and C2C12 cells with light expression vector MyoD mut. The invention for the first time confirms the effect of transcription factor MyoD on the transcription regulation of RTL1 gene, brings a deeper understanding for the expression regulation of RTL1, and has a good application prospect in improving meat quality traits of livestock and studying the molecular regulation mechanism of muscle development.
【技术实现步骤摘要】
转录因子MyoD在调控猪RTL1基因表达中的应用
本专利技术涉及基因工程
,尤其涉及转录因子MyoD在调控猪RTL1基因表达中的应用。
技术介绍
RTL1基因(反转录转座子1基因,retrotransposon-like-1),又名父本表达基因11(paternallyexpressedgene11,Peg11),在人和小鼠中为父本表达的印记基因,没有内含子序列。RTL1基因在胚胎和胎盘组织中表达量很高,对母体胎盘与胎儿的营养传递起着重要作用,敲除该基因的小鼠表现为胎儿死亡率升高、新生儿生长停滞、胎盘尺寸偏小;与人的胎儿发育和新生儿的生长也有密切关系。该基因位于DLK1-DIO3印记区域,此区域基因对肌肉发育有一定的影响,在转基因小鼠中异位表达RTL1基因,会导致肌肉肥大;此外,该基因与callipyge绵羊的肌肉肥大相关,双肌臀的绵羊中RTL1基因的表达量是正常绵羊中的12倍。基因表达调控研究是当前分子生物学研究的热点之一,而转录水平的调控是基因表达过程中最重要的第一步,转录因子是能与基因特定序列专一性结合,从而调节目的基因表达的蛋白质分子。转录因子在转录调控过程中直接或间接地识别和结合在顺式作用元件的核心序列上,参与调控靶基因的转录。因此筛选与鉴定基因的转录因子成为研究基因表达调控最为重要的一步,并为研究基因表达调控奠定基础。而有关RTL1基因的调控方面未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术之缺陷,提供了转录因子MyoD在调控猪RTL1基因表达中的应用,首次证实转录因子MyoD对RTL1基因转录调控的影响:通过双荧光素酶报告系统找 ...
【技术保护点】
1.转录因子MyoD在调控猪RTL1基因表达中的应用。
【技术特征摘要】
1.转录因子MyoD在调控猪RTL1基因表达中的应用。2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,转录因子MyoD对RTL1基因的启动子活性具有抑制作用。3.一种抑制转录因子MyoD表达的siRNA,其特征在于,其为以下三条siRNA中的至少一种:siRNA1,其正义链的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,其反义链的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;siRNA2,其正义链的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,其反义链的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;siRNA3,其正义链的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,其反义链的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。4.如权利要求3所述的抑制RTL1基因表达的siRNA,其特征在于,所述siRNA为siRNA2。5.如权利要求3所述的抑制RTL1基因表达的siRNA,...
【专利技术属性】
技术研发人员:乔木,武华玉,彭先文,吴俊静,梅书棋,刘贵生,周佳伟,孙华,宋忠旭,胡华,李良华,董斌科,赵海忠,
申请(专利权)人:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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