黄酮类化合物或其组合物在保护红细胞免受损伤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受损伤、保持血液制品质量中的应用。本发明专利技术可以有效地保护甚至是预防性地保护人血红细胞，使之可对抗偏离正常生理条件的酸、碱性、渗透压异常、缺氧和过氧化环境的损害，以及高离心力洗涤作用下造成的切应力损伤，使红细胞仍能保持其正常的结构与功能。本发明专利技术还公开了一种保护和/或预防性保护红细胞免受损伤、保持血液制品质量的方法，所述的方法步骤简单，操作安全方便；所使用的羟基红花黄色素A等黄酮类化合物是国家批准使用的医药原料和食品添加剂，复方当归注射液也是国家批准使用的标准中药成方制剂，安全有效，具有广阔的应用前景。

Application of flavonoids or their compounds in protecting red blood cells from injury

The invention discloses the application of flavonoids and / or compositions containing the flavonoids in protecting and / or preventing the protection of red blood cells from injury and maintaining the quality of blood products. The invention can effectively protect and even protect human blood red blood cells from the acid, alkalinity, abnormality of osmotic pressure, the damage of anoxia and peroxidation environment, and the stress damage caused by high centrifugal force washing, so that the red cell can still maintain its normal structure and function. . The invention also discloses a method of protecting and / or preventing the protection of red blood cells from injury and maintaining the quality of blood products. The method is simple and safe and convenient to operate. The flavonoids such as hydroxysafflower yellow A and other flavonoids used are the national approved medicinal raw materials and food additives, Compound Angelica Injection. It is also approved by the state as a standard Chinese herbal preparation. It is safe and effective, and has broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
黄酮类化合物或其组合物在保护红细胞免受损伤中的应用
本专利技术属于生物
，特别涉及黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用。
技术介绍
在各种医疗过程中，常须对病人输血，以挽救病人生命。所以血库里要常储备各种血型的血及其制品，以供不时需要。输血主要有全血输注或成分血(如红细胞)输注，临床中约80％输血是输注红细胞。全血是由静脉采集的血液与一定量抗凝保存液混合的血液，主要是红细胞(约占40％～50％)和血浆(约占50％～60％)，通常在血库里要存放在特定容器内2℃～6℃储存。新鲜采集的血液在一定期限内可以保持其所有的性质。但全血的储存时间超过24小时后，其中的Ⅷ因子、白细胞和血小板迅速凋亡。随着储存时间的增长，红细胞能量代谢产生乳酸而其pH值逐渐降低向酸性发展，其各种成分亦均会发生不同程度的变化，特别是红细胞的结构功能会发生变化，导致其氧亲和力的下降和活力逐渐丧失，甚至导致一些红细胞溶血破损。而根据国家的有关人血液采集与输血要求，血液或有关血制品从采集、处理到给病人输血都至少要三天以上，实际情况是我国大部分地区一般在两个星期以上。国外的情况也类似，美国输注的红细胞平均储存期为18.2天。所以通常都会在不同程度上发生因长时间储存导致的pH值下降造成的红细胞损伤，而因血液保存质量不好输血后很可能会产生致命的副作用。成分血主要是由全血分离的血液成分，如浓缩红细胞，红细胞悬液，血浆，浓缩血小板等。成分血特别是各种红细胞一般都是通过离心的方法从全血中分离出来。根据国家制定的血库标准操作规程，离心分离通常须在5000倍重力加速度下进行两次，每次离心10分钟才能达到洗涤分离的效果。由于在这么高的离心作用下，其产生的离心切应力会使一些红细胞发生损伤，所以，通常经过离心洗涤后，红细胞的回收率只有70％多一些。此外，红细胞在离开了血浆环境，处于没有血清白蛋白等功能蛋白支持的基质中，也会发生渗透不平衡而发生渗透性溶解。缺氧与过氧化环境亦会造成红细胞损伤。因此，如何保护储存的红细胞对抗酸碱度、渗透压异常以及缺氧与过氧化环境导致的损伤，保护红细胞对抗离心切应力的伤害，提高红细胞在分离过程的回收率，减少损耗率，是一个具有重要科学意义和应用前景并可产生极大社会与经济效益的问题。到目前为止，尽管世界上对于保护库存红细胞，延长其正常结构功能方面作过许多研究，也研发出一些血液抗凝剂(如枸橼酸盐类)、ACD(枸橼酸-枸橼酸钠-葡萄糖)和CPD(在ACD中加磷酸盐制成)保存液、复壮剂、添加剂(如抗氧化剂、细胞稳定剂、抗溶血剂、代谢减缓剂和细胞膜稳定剂)等。但这些保存液、添加剂难以保护红细胞在不同pH环境下免受损害，尤其是不能做到预防性保护红细胞对抗酸碱度异常导致的损伤。另一方面，目前未见有保护红细胞在分离过程中免受离心切应力伤害的有关技术和方法。所以，迫切需要可使红细胞免受分离制备过程中的离心切应力伤害，并可预防性地保护红细胞免受酸碱度、渗透压异常、缺氧和过氧化导致的损伤的有关技术和方法。这样的技术和方法，在目前世界普遍血源比较紧张的情况下，更显得重要。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用。本专利技术的另一目的在于提供一种保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量的方法，所述的方法可保护甚至是预防性地保护人血红细胞，使之可对抗偏离正常生理条件的酸、碱性、渗透压异常、缺氧和过氧化环境的损害，以及高离心力洗涤作用下造成的切应力损伤；同时亦可长期保持血液制品质量。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用。所述的血液制品优选为人血液制品；包括全血或成分血，或新鲜离体血液或库存血液，所述的血液制品的成分含有红细胞。所述的生化与机械性损伤包括因偏离正常生理条件的酸、碱性、渗透压异常、缺氧和过氧化环境的损害，以及高离心力洗涤作用下造成的切应力损伤。所述的保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤是指：保护和/或预防性保护所述的血液制品，使之可对抗偏离正常生理条件的酸、碱性、渗透压异常、缺氧和过氧化环境的损害，以及高离心力洗涤作用下造成的切应力损伤。所述的保持血液制品质量是指：可使血液制品的红细胞在不同环境下长期保持正常的结构功能。所述的黄酮类化合物优选为包括羟基红花黄色素A、甘草查尔酮和芸香苷中的一种或至少两种的组合物。所述的黄酮类化合物优选为所述的黄酮类化合物的标准品。所述的含有所述的黄酮类化合物的组合物优选为包含所述的黄酮类化合物的天然提取物或人工合成物。所述的黄酮类化合物天然提取物可以包括红花提取物、甘草根提取物和芸香叶提取物中的一种或至少两种的组合物；进一步优选为红花提取物，所述的红花提取物中包含羟基红花黄色素A等有效成分。所述的红花提取物优选为红花水煎液；所述红花水煎液为以50克红花以1升水煎成0.5升而得。所述的含有所述的黄酮类化合物的组合物优选为包含红花提取物、甘草根提取物和芸香叶提取物中的至少一种，与当归提取物和川芎提取物中的至少一种组成的组合物；进一步优选为红花提取物与当归提取物和/或川芎提取物组成的组合物。所述的包含红花提取物、当归提取物和川芎提取物中的至少两种组成的组合物中的红花提取物、当归提取物和川芎提取物优选按质量比1:1:1配比。所述的含有所述的黄酮类化合物的组合物优选为复方当归注射液，为国家批准静脉注射药液。所述的复方当归注射液中的有效成分包括羟基红花黄色素A等。一种保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量的方法，包括如下步骤：将血液制品与黄酮类化合物溶液和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物溶液进行共孵育处理。所述的共孵育处理优选为在37±1℃温度下共育3～5小时。所述的黄酮类化合物溶液的浓度优选为0.2mg/mL～0.6mg/mL。所述的含有所述的黄酮类化合物的组合物溶液的浓度优选为60mg/mL～150mg/mL。所述的血液制品与黄酮类化合物溶液和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物溶液优选按体积比1:(0.5～5)进行配比；进一步优选为按体积比1:1进行配比。所述的保持血液制品质量的方法在进行孵育处理后还可以包括后处理步骤；所述的后处理步骤为洗涤孵育处理后的血液制品，再悬浮于缓冲液中保存。所述的洗涤优选采用生理盐水或PBS缓冲液洗涤。所述的生理盐水优选为质量百分比浓度为0.9％的NaCl溶液。所述的洗涤的条件优选为：在转速1500～2500转/分钟下，洗涤3～6分钟。所述的洗涤的次数优选为3次。所述的保存优选在4℃下保存。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术可使红细胞预防性抵抗偏离正常生理条件的酸、碱性环境的损害，即使是在pH值低至5或高至9.7情况下，红细胞仍能保持其正常的结构与功能。(2)本专利技术可使红细胞在没有血清白蛋白等功能蛋白支持的基质中，抵抗渗透压异常的伤害，保持其正常的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用。

【技术特征摘要】
1.黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用。2.根据权利要求1所述的黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用，其特征在于：所述的血液制品包括全血或成分血，或新鲜离体血液或库存血液，所述的血液制品的成分含有红细胞；所述的生化与机械性损伤包括因偏离正常生理条件的酸、碱性、渗透压异常、缺氧和过氧化环境的损害，以及高离心力洗涤作用下造成的切应力损伤。3.根据权利要求1所述的黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用，其特征在于：所述的黄酮类化合物为包括羟基红花黄色素A、甘草查尔酮和芸香苷中的一种或至少两种的组合物。4.根据权利要求1所述的黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用，其特征在于：含有所述的黄酮类化合物的组合物为包含所述的黄酮类化合物的天然提取物或人工合成物。5.根据权利要求4所述的黄酮类化合物和/或含有所述的黄酮类化合物的组合物在保护和/或预防性保护红细胞免受各种生化与机械性损伤、保持血液制品质量中的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄耀熊，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44