一种土壤堆肥芽孢杆菌和微生物菌剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillus humi)BLG74 CGMCC No.11219。本发明专利技术提供的一种土壤堆肥芽孢杆菌，能够在37～60℃油藏条件下以原油为唯一碳源进行生长，降解原油及及重质组分，增加流动性，从而提高采油率，而且该菌株代谢产生的生物表面活性剂、生物气体、有机酸等与原油相互作用，进一步增加原油在油藏内的流动性，提高原油采收率。

【技术实现步骤摘要】
一种土壤堆肥芽孢杆菌和微生物菌剂及其应用
本专利技术涉及微生物采油
，特别涉及一种土壤堆肥芽孢杆菌和微生物菌剂及其应用。
技术介绍
微生物提高石油采收率技术(MEOR)是利用微生物在油藏中的生命活动及其代谢产物来提高原油产量和原油采收率的一种生物技术，具有实施成本低、操作简单、经济效益显著等特点，受到人们的广泛重视。利用微生物提高原油采收率就是将油藏作为一个大的发酵场，通过向油藏中添加菌液、营养剂及微生物代谢产物，促进微生物在油藏内生长繁殖，利用微生物与原油直接作用降低原油粘度增加原油流动性，利用微生物代谢产生的生物气、表面活性剂、有机酸改善原油物性，从而提高原油采收率。假单孢菌和芽孢杆菌是目前研究较多的具有乳化原油能力的菌株。在油田开采领域展示出很好的应用前景。假单孢菌和芽孢杆菌分别在申请公布号CN104371940A和CN102757994A有所记载，可乳化原油的假单胞菌和芽孢杆菌生长温度多为30～40℃，不能适应较高温度的油藏应用。在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术至少存在以下问题：现有技术中的可提高原油采收率的菌株对温度的适应范围窄，不能满足较高温度的油藏应用。
技术实现思路
本专利技术的所解决的技术问题在于，提供一种能满足较高温度的油藏应用的土壤堆肥芽孢杆菌和微生物菌剂及其应用。技术方案如下：在第一方面，本专利技术公开了一种土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74。该土壤堆肥芽孢杆菌从我国华北油田地层水中分离得到的一株土壤堆肥芽孢杆菌。已于2015年8月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其分类命名为：土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74，保藏号为CGMCCNo.11219。保藏地址是：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。本专利技术从我国华北油田地层水中分离到一株土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74，系统发育分析显示与土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)DX-3的亲缘关系最近(99.6％相似性)，代表土壤堆肥芽孢杆菌的一个新菌株。由于菌种分离于油藏内部，与油藏具有较好的配伍性，并适用于油藏温度38～60℃，适应温度范围比较广。土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74具有以下特征：土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74在不含原油的大豆酪蛋白琼脂培养基或固体发酵培养基上生长良好，如图1所示，菌落呈乳黄色圆形，大小不一，直径3～4mm，表面湿润，边缘平整。菌株BLG74的细胞为杆状，大小0.4～0.5μm×2～5μm，产芽孢，革兰氏染色为阳性，兼性厌氧生长。菌株生长温度为37～60℃，pH5～9，NaCl浓度0～7％(w/v)。最适生长条件：生长温度为45℃，pH7.5，NaCl浓度3％(w/v)。能利用果糖，不利用葡萄糖。本专利技术的土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74的16SrRNA基因序列在GenBank登录号为KT246122，其基因序列如序列表所示。该菌株BLG74的16SrRNA基因序列含有1387bp，16SrRNA基因序列在GenBank登录号为KT246122，在GenBank数据库中通过Blast方法比对，采用MEGA4软件用邻接(Neighbor-Joining)法构建HB-1与相关模式菌株的系统发育树，如图2所示的该菌株BLG74与邻近菌株的系统发育学关系，该菌株BLG74与CompostibacillushumiGIESS002和CompostibacillushumiDX-3聚类在一个系统发育分支，序列同源性为99.6％，可确定该菌株菌属为Compostibacillussp.，命名为土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74。需要说明的是，土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)是Yu等[IntJSystEvolMicrobiol.2015,65:346-352]于2015报道的一株高温芽孢杆菌新属种，模式菌为CompostibacillushumiDX-3，分离自广东污泥堆肥。本专利技术的土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74，可以在37～60℃条件下以原油作为唯一碳源进行生长繁殖。在第二方面，本专利技术公开了一种微生物菌剂，包括上述任一项所述的土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74和激活剂。具体地，该微生物菌剂中所述激活剂包括以下组分：质量份数为100份的油藏产出水；质量份数为0.08～0.12份的氯化铵；质量份数为0.16～0.22份的硝酸钠；质量份数为0.04～0.06份的磷酸二氢钾；质量份数为0.16～0.22份的硫酸钠；质量份数为0.01～0.02份的硫酸镁；质量份数为0.04～0.06份的碳酸钠；质量份数为0.01～0.02份的醋酸钠；质量份数为0.04～0.06份的酵母粉、酵母浸粉或酵母浸膏中的至少一种；以及质量份数为0.08～0.12份的玉米浆；pH值为7.5～8；或质量份数为100份的水；质量份数为0.08～0.12份的氯化铵；质量份数为0.18～0.22份的硝酸钠；质量份数为0.03～0.06份的磷酸氢二钾；质量份数为0.008～0.012份的硫酸镁；质量份数为0.8～1.2份的氯化钠；质量份数为0.20～0.30份的酵母粉、酵母浸粉或酵母浸膏中的至少一种；以及玉米浆0.3～0.6份；pH值为7.0～7.5；或质量份数为100份的水；质量份数为0.4～0.6份的氯化钠；质量份数为0.4～0.6份的大豆蛋白胨；以及质量份数为0.8～1.2份的酪蛋白胨；pH值为7.0-8.0。优选地，所述水为油藏产出水。具体地，所述土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74在所述激活剂中的浓度为105～106个/mL。在第三方面，本专利技术公开了土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74在降解原油中的应用。在第四方面，上述微生物菌剂在降解原油中的应用。作为一种优选的实施方式，所述原油的油藏温度为37～60℃。本专利技术实施例提供的技术方案的有益效果是：本专利技术提供的一种土壤堆肥芽孢杆菌，能够在37～60℃油藏条件下以原油为唯一碳源进行生长，降解原油及及重质组分，增加流动性，从而提高采油率，而且该菌株代谢产生的生物表面活性剂、生物气体、有机酸等与原油相互作用，进一步增加原油在油藏内的流动性，提高原油采收率。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术提供的土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74的菌落和菌体形态图；图2为本专利技术基于16SrRNA基因序列构建的系统发育树；图3为本专利技术提供的土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibaci本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillus humi)BLG74CGMCC No.11219。

【技术特征摘要】
1.一种土壤堆肥芽孢杆菌(Compostibacillushumi)BLG74CGMCCNo.11219。2.根据权利要求1所述的土壤堆肥芽孢杆菌，其特征在于，该土壤堆肥芽孢杆菌的16SrRNA基因序列在GenBank登录号为KT246122。3.根据权利要求1所述的土壤堆肥芽孢杆菌，其特征在于，可以在37～60℃条件下以原油作为唯一碳源进行生长繁殖。4.一种微生物菌剂，其特征在于，包括如权利要求1至3任一项所述的土壤堆肥芽孢杆菌和激活剂。5.根据权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，所述激活剂包括以下组分：质量份数为100份的水；质量份数为0.08～0.12份的氯化铵；质量份数为0.16～0.22份的硝酸钠；质量份数为0.04～0.06份的磷酸二氢钾；质量份数为0.16～0.22份的硫酸钠；质量份数为0.01～0.02份的硫酸镁；质量份数为0.04～0.06份的碳酸钠；质量份数为0.01～0.02份的醋酸钠；质量份数为0.04～0.06份的酵母粉、酵母浸粉或酵母浸膏中的至少一种；以及质量份数为0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：任付平，胡书宝，游靖，郑雅，薛燕芬，余吉良，谢刚，吴应德，郭素贞，王艾，
申请(专利权)人：中国石油天然气股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11