The invention relates to a method for rapid detection of PWS and AS, using MS PCR PWS/AS detection method, using bisulfite treatment of DNA samples can be completed in a short period of time, while also using the method of post sulfite group, which makes the whole operation process is more simple, at the same time, many details do processing and adjustment and form a complete set of testing system, set up a number of control points, through clinical verification of reliable detection method. MS PCR is a fast, efficient, and at the same time, sensitivity and specificity are good molecular diagnostic methods, detection, low cost, can cut off most of the clinical diagnosis of PWS/AS.
【技术实现步骤摘要】
一种PWS及AS的快速检测方法
本专利技术属于遗传病基因检测
,涉及一种PWS及AS的快速检测方法。
技术介绍
PWS/AS是两种与基因组印记相关的遗传性疾病,父源15q11-13区域基因缺陷导致Prader-Willi综合征(PWS),其临床表现为新生儿肌张力低,发育延迟,身材矮小,下丘脑性腺发育不良等;母源15q11-13区域基因缺陷导致Angelman综合症(AS)。15q11-13区带内各复制子之间发生非平衡易位,由于这些复制子中存在对物种生存相当重要的高度保守序列,因此,15q11-13遗传物质缺失将造成发育迟缓,语言障碍等临床表现。印记基因具有差异表达特性,这种差异常常是由父方及母方的等位基因传给子代时发生了修饰,其中较为重要的是DNA甲基化修饰。DNA甲基化修饰是一个主要的表观遗传学修饰。诊断PWS/AS疾病的方法有几种,如高分辨率染色体分析、荧光原位杂交、多重连接探针扩增技术(MLPA)。但是上述几种方法均比较复杂,需要时间较长,检测过程缓慢,成本高,检测结果存在不确定性。文献报道方法没有临床检测需要的质控,操作标准及其他环境控制指标。李璃、刘安等人发表了Prader-Willi和Angelman综合征的分子遗传学诊断研究,用全基因组单核苷酸多态性微阵列芯片(SNP-array)对疑似Prader-Willi综合征(PWS)和Angelman综合征(AS)患儿进行细胞分子遗传学诊断,并根据检测结果对其家系下一胎进行产前遗传学诊断。方法对3位疑似PWS和AS患儿进行常规G显带染色体核型分析;提取患者外周血DNA进行SNP-array扫描 ...
【技术保护点】
一种PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1).采集血液、羊水或唾液中的至少一种并进行DNA提取;(2).提取完DNA后,对其进行质量检测;(3).DNA甲基化处理,检测DNA甲基化处理后的浓度及纯度;(4).进行MS‑PCR反应;(5).电泳检测,结果分析。
【技术特征摘要】
1.一种PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1).采集血液、羊水或唾液中的至少一种并进行DNA提取;(2).提取完DNA后,对其进行质量检测;(3).DNA甲基化处理,检测DNA甲基化处理后的浓度及纯度;(4).进行MS-PCR反应;(5).电泳检测,结果分析。2.根据权利要求1所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(1)中采集血液采用EDTA抗凝管采集或采血卡采集。3.根据权利要求2所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(1)中用EDTA抗凝管采集具体操作方法为:采集孕妇外周血5mL,立即轻柔颠倒混合采血管多次,混匀后4℃放置,将EDTA抗凝管分别包装,低温运输,4小时内进行血浆分离。4.根据权利要求2所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(1)中采血卡采集的具体操作方法为:采集完血液后,滴加在采血卡上,待其晾干后进行运送。5.根据权利要求1所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(1)中羊水采集的具体方法为:医生按标准采集后,专用包装保存,低温运输。6.根据权利要求1所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(1)中唾液采集的具体方法为:待检者按唾液试子采集要求采集唾液样本,低温运输。7.根据权利要求1所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(2)中DNA提取包括血斑DNA提取、全血DNA提取、羊水DNA提取、唾液DNA提取中的至少一种。8.根据权利要求1所述的PWS及AS的快速检测方法,其特征在于:所述步骤(2)中提取DN...
【专利技术属性】
技术研发人员:俞晓敏,杨丽萍,吴欢,罗旌万,
申请(专利权)人:俞晓敏,杭州甄元健康科技有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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