一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，主要包括盒体(1)和遮光盖(2)，所述的盒体(1)内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽(8)、吸管(9)、营养供给卡槽(7)，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶(4)和培养液瓶(3)，所述的测试瓶卡槽(8)内放置有多个测试瓶，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶(6)和培养皿(5)，所述的培养液瓶(6)和培养皿(5)之间设有吸管(9)。该试剂盒是将优选的斑马鱼健康胚胎直接进行急性毒性检测，过程简单，易操作，不易受外界其他因素影响，提高定性检测效率，压缩检测数据，节省检测时间，应用范围广泛。

Kit for acute toxicity test of zebrafish embryo

The utility model discloses a kit for zebrafish acute toxicity experiment, mainly comprises a box body (1) and a shading cover (2), wherein the box body (1) is arranged in the groove, embryo culture flask test card slot (8), Straw (9), nutrition (card slot 7), the embryo culture card slot is provided with a bottle (4) and embryo culture liquid bottle (3), the test bottle slot (8) are arranged in a plurality of test bottles, bottle test includes 24 hole culture flask (6) and Petri dishes (5), the liquid culture bottle (6) and culture (5) is arranged between the Straw (9). The kit is the preferred zebrafish healthy embryos directly the acute toxicity test, simple process, easy operation, not easy to be influenced by other external factors, improve the qualitative detection efficiency, compression test data, shorten the detection time, a wide range of applications.

【技术实现步骤摘要】
一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒
本技术涉及斑马鱼胚胎急性毒性毒性检测
，具体地涉及一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒。
技术介绍
斑马鱼是一种常见的热带鱼。斑马鱼体型纤细，成体长3-4cm，对水质要求不高。孵出后约3个月达到性成熟，成熟鱼每隔几天可产卵一次。卵子体外受精，体外发育，胚胎发育同步且速度快，胚体透明。发育温度要求在25～31℃之间。斑马鱼由于个体小，养殖花费少，能大规模繁育，且具许多优点，吸引了众多研究者的注意。经过30多年的研究应用和系统发展，已有约20个斑马鱼品系，斑马鱼基因数据库里有相关的资料可供查询和下载，方便了研究。斑马鱼由于养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚胎体外受精、体外发育、胚体透明，已成为生命科学研究的新宠。全球范围内有超过1500个斑马鱼实验室。利用斑马鱼，可以研究生命科学的基础问题，揭示胚胎和组织器官发育的分子机理；可以构建人类的各种疾病和肿瘤模型，建立药物筛选和治疗的研究平台；可以建立毒理学和水产育种学模型，研究和解决环境科学和农业科学的重大问题。斑马鱼的基因与人类基因相似度达到87％，这意味着在它身上得出的水质监测结果，多数情况下都适用于人类。因此对于某些毒性物质的反应也能更好与对人体的毒性反应类似，以试验样品浓度和相应浓度下斑马鱼胚胎的死亡率或畸形率为基础建立正相关关系，并根据未添加试验样品的斑马鱼胚胎为参考，通过恒温培养来快速的测出样品的急性毒性，因此如果能结合此原理快速测定物质毒性，直观的表征方便快速的判断，进行安全性评估，建立早期、灵敏及高通量筛选的急性毒预防系统，为进一步研发提供基础数据和实验依据。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，设计科学、结果准确、使用方便，检测效率高。本技术的技术方案为：一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒，试剂盒主要包括盒体和遮光盖，所述的盒体内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽、吸管、营养供给卡槽，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶和培养液瓶，所述的胚胎瓶内盛放斑马鱼胚胎，所述的测试瓶卡槽内放置有多个测试瓶，测试瓶内装有待测溶剂及对比实验溶剂，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶和培养皿，所述的培养液瓶和培养皿之间设有吸管。进一步的，所述的试剂盒的制备方法主要包括以下步骤：a.挑选适宜的斑马鱼进行培养，收集斑马鱼胚胎，制成胚胎瓶；b.制备胚胎培养液；c.制备试剂盒盒体，并将胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽、吸管、营养供给卡槽进行生产组装，即得到所述的斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒。进一步的，所述的遮光盖通过旋转合页与盒体连接，对应的另一边设置有卡扣，打开或关闭试剂盒的遮光盖，遮光盖的外表层胶粘有玻璃遮光膜，可以根据防止阳光或者其他光线对试剂盒的使用过程产生影响。进一步的，所述的营养供给卡槽设置于培养皿的下方，内置有用于斑马鱼培养过程中的饵料，根据不同的斑马鱼月龄需要来添加不同类别的饵料。进一步的，所述的培养皿下方是双层结构，下层由水浴保温材料制成，可以根据需要加入一定的温度的水来进行水浴保温培养。进一步的，所述的吸管为巴氏吸管。一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒的使用方法为：在25-30℃的环境下，将胚胎瓶中的斑马鱼胚胎用胚胎培养液清洗两遍，移取胚胎至加有胚胎培养液的培养皿中，每孔5-10胚胎，将待测溶剂及对比实验溶剂分别装入24孔板的测试瓶中，打开吸管，将待测溶剂及对比实验溶剂分别吸入对应的胚胎培养皿中，将培养皿放入恒温培养箱内进行培养，然后在12-24小时观察记录斑马鱼胚胎发育的畸形率和死亡率，通过判断和对比来确定待测溶剂的急性毒性。与现有技术相比，本技术的试剂盒的有益效果体现在：该试剂盒是将优选的斑马鱼健康胚胎直接进行急性毒性检测，过程简单，易操作，不易受外界其他因素影响，提高定性检测效率，压缩检测数据，节省检测时间，应用范围广，待测物质不仅仅局限于水质等其他液体，固体或不同状态的物质也可以使用。附图说明图1是本专利技术的一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒的外部结构示意图；图2是本专利技术的一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒的内部结构示意图；其中，1-盒体，2-遮光盖，3-培养液瓶，4-胚胎瓶，5-培养皿，24孔培养液瓶6，7-营养供给卡槽，8-测试瓶卡槽，9-吸管。具体实施方式为便于对本技术的理解，下面将结合具体实施例为例做进一步的解释说明，实施例并不构成对本技术实施例的限定。实施例1：一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒，试剂盒主要包括盒体1和遮光盖2，盒体1内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽8、吸管9、营养供给卡槽7，胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶4和培养液瓶3，胚胎瓶4内盛放斑马鱼胚胎，测试瓶卡槽8内放置有多个测试瓶，测试瓶内装有待测溶剂及对比实验溶剂，测试瓶包括24孔培养液瓶6和培养皿5，培养液瓶6和培养皿5之间设有吸管9。试剂盒的制备方法主要包括以下步骤：a.挑选适宜的斑马鱼进行培养，收集斑马鱼胚胎，制成胚胎瓶4；b.制备胚胎培养液；c.制备试剂盒盒体1，遮光盖2通过旋转合页与盒体1连接，对应的另一边设置有卡扣，打开或关闭试剂盒的遮光盖2，遮光盖2的外表层胶粘有玻璃遮光膜，可以根据防止阳光或者其他光线对试剂盒的使用过程产生影响；营养供给卡槽7设置于培养皿5的下方，内置有用于斑马鱼培养过程中的饵料，根据不同的斑马鱼月龄需要来添加不同类别的饵料；培养皿5下方是双层结构，下层由水浴保温材料制成，可以根据需要加入一定的温度的水来进行水浴保温培养；吸管9为巴氏吸管；将胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽8、吸管9、营养供给卡槽7进行生产组装，即得到所述的斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒。一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的的试剂盒的使用方法为：在28.5℃的环境下，将胚胎瓶4中的斑马鱼胚胎用胚胎培养液清洗两遍，移取胚胎至加有胚胎培养液的培养皿5中，每孔10胚胎，将待测溶剂及对比实验溶剂分别装入24孔板的测试瓶中，打开吸管9，将待测溶剂及对比实验溶剂分别吸入对应的胚胎培养皿5中，将培养皿5放入恒温培养箱内进行培养，然后在12小时观察记录斑马鱼胚胎发育的畸形率和死亡率，通过判断和对比来确定待测溶剂的急性毒性。实验例：用实施例1的制备的试剂盒来测试苯并黄素的急性毒性。每个试剂盒分成两组：实验组和对照组，其中每组10孔胚胎。苯并黄素母液：以助溶剂DMSO溶解苯并黄素粉末至澄清，用10ml注射器、0.22μm滤器单独过滤两次后，分装至已灭菌的5ml的Eppendorf管，标记母液的名称、浓度、配制时间等信息，储存，备用。对照组使用的为所述的胚胎培养液。苯并黄素工作液：用胚胎培养液配制不同浓度的工作液，要求工作液内所含DMSO最终浓度为0.1％(V/V)。苯并黄素工作液进行试验浓度为：100μM，震荡摇匀，现配现用。在12h后进行观察，测试的数据如下：分组胚胎数量死亡胚胎数量畸形胚胎数量死亡率畸形率备注实验组100523452％34％对照组100121％2％结果发现：本技术的试剂盒灵敏度好，死亡率为52％，畸形率为34％，可快速的检测出毒性。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本技术的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，其特征在于，试剂盒主要包括盒体(1)和遮光盖(2)，所述的盒体(1)内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽(8)、吸管(9)、营养供给卡槽(7)，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶(4)和培养液瓶(3)，所述的胚胎瓶(4)内盛放斑马鱼胚胎，所述的测试瓶卡槽(8)内放置有多个测试瓶，测试瓶内装有待测溶剂及对比实验溶剂，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶(6)和培养皿(5)，所述的培养液瓶(6)和培养皿(5)之间设有吸管(9)。

【技术特征摘要】
1.一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，其特征在于，试剂盒主要包括盒体(1)和遮光盖(2)，所述的盒体(1)内设置有胚胎培养卡槽、测试瓶卡槽(8)、吸管(9)、营养供给卡槽(7)，所述的胚胎培养卡槽内置有胚胎瓶(4)和培养液瓶(3)，所述的胚胎瓶(4)内盛放斑马鱼胚胎，所述的测试瓶卡槽(8)内放置有多个测试瓶，测试瓶内装有待测溶剂及对比实验溶剂，所述的测试瓶包括24孔培养液瓶(6)和培养皿(5)，所述的培养液瓶(6)和培养皿(5)之间设有吸管(9)。2.如权利要求1所述的一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛银刚，孔德洋，于洋，王倩，宗玉婷，何健，吴文铸，许静，
申请(专利权)人：常州市环境监测中心，环境保护部南京环境科学研究所，环境保护部固体废物与化学品管理技术中心，
类型：新型
国别省市：江苏,32