头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法技术

本发明专利技术公开了头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，属于稳定同位素技术领域。头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，包括从头足类眼睛晶体中取出晶体核放在蒸馏水中充分吸水，然后解剖成不同断面的晶体样品，再次进行清洗，最后分别放在冷冻机中冷冻干燥后摩擦粉末，放置在离心管中备用。它可以实现简化了操作程序，降低环境干扰，提高了稳定同位素测定的精确度和准确度。

【技术实现步骤摘要】
头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法
本专利技术涉及稳定同位素
，更具体地说，涉及头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法。
技术介绍
稳定同位素技术是自原子核的质子和中子被发现后逐渐兴起的新型应用技术，稳定同位素原子核稳定，其化学性质也相对比较稳定，国内外诸多学者采用稳定同位素技术对海洋植物、海洋鱼类以及海洋哺乳动物进行了研究，对其在生态系统中的地位有了更深入的了解，δ13C和δ15N可用于追踪有机体中的如碳水化合物、蛋白质等有机物的含量，高级消费者相对与低级消费者有更高的15N值（平均高于2.5-3.4‰），因此δ15N值常常被用来指示该物种在生态系统中的营养位置（trophicposition），而δ13C在食物链中的含量较低，因此常被用来表示营养关系中的初始来源，在海洋生态系统中，δ13C主要可以表示浮游生物分布所处纬度的高低，同时可以指示所摄入的食物是来自远洋还是近岸，是营浮游生还是底栖生活，头足类的稳定同位素研究始于2000年，头足类作为捕食者，其体内有大量的碳（C）、氮（N）等稳定同位素，头足类眼睛晶体是稳定同位素积累的优良载体，因此对头足类眼睛晶体中稳定同位素的检测尤为重要，样品检测需要进行前处理后再进入检测仪器，前处理的使用方法对测定结果的准确度、精确度影响显著，目前国内外并没有专门针对眼睛晶体中稳定同位素测定的前处理方法。本方法提供一种头足类眼睛晶体中稳定同位素测定的前处理方法，为稳定同位素测定研究提供了一个新方法。
技术实现思路
1．要解决的技术问题针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，该方法简化了操作程序，降低环境干扰，提高了稳定同位素测定的精确度和准确度。2．技术方案为解决上述问题，本专利技术采用如下的技术方案。头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，其步骤如下：（1）用手术刀划破眼球，用镊子取出晶体，去除晶体的外膜，保留晶体核；（2）将晶体核浸泡在蒸馏水中10分钟，使其充分吸水；（3）在游标卡尺上测量所述步骤（2）中处理过的晶体核的直径；（4）在体式显微镜下，用解剖针、解剖刀、尖头镊子和宽头镊子由晶体最外层向晶体核心剥离0.5±0.05mm宽的晶体；（5）在游标卡尺上测量所述步骤（4）中剥离0.5±0.05mm宽的晶体后剩余晶体的直径，并记录；（6）重复以上所述步骤（4）和步骤（5）的过程，直至晶体核心部分直径为0.5±0.05mm或晶体核心部分直径小于0.45mm，依据晶体大小的不同可得到不同断面的晶体样品；（7）使用超声波清洗器将所述步骤（6）中获得的晶体样品清洗10分钟，去除晶体表面残留的杂质，再用超纯水冲洗；（8）将清洗后的晶体样品放入冷冻干燥机中进行冷冻干燥；（9）取出冷冻干燥后的晶体样品，分别使用混合型球磨机磨碎成粉末，放置在5ml的离心管中备用；当进行同位素测定前处理时，剥离出眼球晶体核，进行充分吸水后，解剖为不同断面的晶体样品，再清洗清除残留杂质后进行冷冻干燥，最后磨成粉末，放在离心管备用，步骤简单，简化了操作程序，降低环境干扰，提高了稳定同位素测定的精确度和准确度。优选地，所述游标卡尺的测量范围为0-200mm，测量精度为0.01mm。优选地，所述冷冻干燥机的温度设定在-55℃，-55℃低温使晶体样品中微生物失去活性，减少对同位素测定的影响。优选地，所述步骤（8）中冷冻干燥的时间为24小时-36小时，保证晶体样品能被充分干燥。3．有益效果相比于现有技术，本专利技术的优点在于：（1）本方案当进行同位素测定前处理时，剥离出眼球晶体核，进行充分吸水后，解剖为不同断面的晶体样品，再清洗清除残留杂质后进行冷冻干燥，最后磨成粉末，放在离心管备用，步骤简单，简化了操作程序，降低环境干扰，提高了稳定同位素测定的精确度和准确度。（2）冷冻干燥机的温度设定在-55℃，-55℃低温使晶体样品中微生物失去活性，减少对同位素测定的影响。（3）步骤（8）中冷冻干燥的时间为24小时-36小时，保证晶体样品能被充分干燥。附图说明图1为本专利技术不同断面晶体样品的结构示意图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图；对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然；所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例；而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例；本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例；都属于本专利技术保护的范围。实施例1：请参阅图1，头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，茎柔鱼隶属柔鱼科，是头足类中一种重要的经济物种，将茎柔鱼清洗干净，固定头部，用手术刀划破眼球，用镊子取出晶体，放入5ml离心管中保存，实验时取出晶体，去除晶体的外膜，保留晶体核；将晶体核浸泡在蒸馏水中10分钟，使其充分吸水；在游标卡尺上测量处理过的晶体核的直径；在体式显微镜下，用解剖针、解剖刀、尖头镊子、宽头镊子由晶体最外层向晶体核心剥离0.5mm左右宽的晶体；在游标卡尺上测量剥离晶体后剩余晶体的直径；一层一层剥，直至晶体核心部分直径约为0.5mm，依据晶体大小的不同可得若干个晶体不同断面的晶体样品；使用超声波清洗器剥离晶体清洗10分钟，去除晶体表面残留的杂质，再用超纯水冲洗；然后分别放入冷冻干燥机，在-55℃的环境下对样品进行冷冻干燥，至少24小时；取出冷冻干燥后的晶体，使用混合型球磨机磨碎成粉末，放置5ml离心管中备用。实施例2：请参阅图1，头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，在我国近海，头足类区系组成复杂，种类繁多，目前主要的经济种类是中国枪乌贼，将中国枪乌贼清洗干净，固定头部，用手术刀划破眼球，用镊子取出晶体，放入5ml离心管中保存，实验时取出晶体，去除晶体的外膜，保留晶体核；将晶体核浸泡在蒸馏水中10分钟，使其充分吸水；在游标卡尺上测量处理过的晶体核的直径；在体式显微镜下，用解剖针、解剖刀、尖头镊子、宽头镊子由晶体最外层向晶体核心剥离0.5mm左右宽的晶体；在游标卡尺上测量剥离晶体后剩余晶体的直径；一层一层剥，直至晶体核心部分直径约为0.5mm，依据晶体大小的不同可得若干个晶体不同断面的晶体样品；使用超声波清洗器剥离晶体清洗10分钟，去除晶体表面残留的杂质，再用超纯水冲洗；然后放入冷冻干燥机，在-55℃的环境下对样品进行冷冻干燥，至少24小时；取出冷冻干燥后的晶体，分别使用混合型球磨机磨碎成粉末，放置5ml离心管中备用。当进行同位素测定前处理时，剥离出眼球晶体核，进行充分吸水后，解剖为不同断面的晶体样品，再清洗清除残留杂质后进行冷冻干燥，最后分别磨成粉末，放在离心管备用，步骤简单，简化了操作程序，将不同断面的晶体样品冷冻干燥后分别磨成粉末，放在离心管备用，降低了环境干扰，提高了稳定同位素测定的精确度和准确度。以上所述；仅为本专利技术较佳的具体实施方式；但本专利技术的保护范围并不局限于此；任何熟悉本
的技术人员在本专利技术揭露的技术范围内；根据本专利技术的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变；都应涵盖在本专利技术的保护范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，其特征在于：其步骤如下：（1）用手术刀划破眼球，用镊子取出晶体，去除晶体的外膜，保留晶体核；（2）将晶体核浸泡在蒸馏水中10分钟，使其充分吸水；（3）在游标卡尺上测量所述步骤（2）中处理过的晶体核的直径；（4）在体式显微镜下，用解剖针、解剖刀、尖头镊子和宽头镊子由晶体最外层向晶体核心剥离0.5±0.05mm宽的晶体；（5）在游标卡尺上测量所述步骤（4）中剥离0.5±0.05mm宽的晶体后剩余晶体的直径，并记录；（6）重复以上所述步骤（4）和步骤（5）的过程，直至晶体核心部分直径为0.5±0.05mm或晶体核心部分直径小于0.45mm，依据晶体大小的不同可得不同断面的晶体样品；（7）使用超声波清洗器将所述步骤（6）中获得的晶体样品清洗10分钟，去除晶体表面残留的杂质，再用超纯水冲洗；（8）将清洗后的晶体样品放入冷冻干燥机中进行冷冻干燥；（9）取出冷冻干燥后的晶体样品，分别使用混合型球磨机磨碎成粉末，放置在5ml的离心管中备用。

【技术特征摘要】
1.头足类眼镜晶体中稳定同位素测定前处理方法，其特征在于：其步骤如下：（1）用手术刀划破眼球，用镊子取出晶体，去除晶体的外膜，保留晶体核；（2）将晶体核浸泡在蒸馏水中10分钟，使其充分吸水；（3）在游标卡尺上测量所述步骤（2）中处理过的晶体核的直径；（4）在体式显微镜下，用解剖针、解剖刀、尖头镊子和宽头镊子由晶体最外层向晶体核心剥离0.5±0.05mm宽的晶体；（5）在游标卡尺上测量所述步骤（4）中剥离0.5±0.05mm宽的晶体后剩余晶体的直径，并记录；（6）重复以上所述步骤（4）和步骤（5）的过程，直至晶体核心部分直径为0.5±0.05mm或晶体核心部分直径小于0.45mm，依据晶体大小的不同可得不同断面的晶体样品；（7）...

【专利技术属性】
技术研发人员：李建华，刘必林，陈新军，高春霞，郭家红，邢侃，靳楠，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：上海,31