一种牤提取物及其分离方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物防治领域，具体涉及动物源农药，更具体的涉及一种牤提取物及其分离方法和应用。本发明专利技术提供的牤提取物的分离方法，其步骤包括：S1，将牤粉与乙醇在索氏提取器中回流提取3-8小时得乙醇索氏提取液；S2，将步骤S1所得乙醇索氏提取液浓缩、干燥得牤提取物，能提供一种具有较大应用前景的生物防治新品种，不仅能够防治多种植物病害，而且能够促进植物生长，对提高作物产量和提升品质均具有积极作用。

A bull extract and separation method and application thereof

The present invention relates to the field of biological control, in particular to animal pesticide, and relates to a bull extract and separation method and use more specific. Method of separation of mang extract provided by the invention, the method comprises the following steps: S1, the bull powder and ethanol in a Soxhlet extractor reflux extraction 3-8 hour ethanol Soxhlet extraction; S2, step S1 the ethanol Soxhlet extraction was concentrated and dried to obtain mang extract, can provide a kind of new varieties with biological control a good application prospect, not only can control a variety of plant diseases, but also can promote the growth of plants, it has a positive effect on improving crop yield and improve the quality of.

【技术实现步骤摘要】
一种牤提取物及其分离方法和应用
本专利技术涉及生物防治领域，具体涉及动物源农药，更具体的涉及一种牤提取物及其分离方法和应用。
技术介绍
生物农药相对于化学农药来说一般具有绿色环境友好、低残留和不易产生抗药性等特性，因此近年来一直是国际国内的研究热点。生物农药主要包括植物源、动物源农药和微生物源农药。其中动物源农药的研究和应用主要集中在动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌中。昆虫是地球上数量最多的动物群体，已发现超过100万种，其中单鞘翅目中所含的总数就比其它所有动物界中的总数还多。如此数量巨大的昆虫，蕴藏着巨大的资源有待于开发利用。很多昆虫可以生存在异常恶劣环境条件中的原因是，其体内具有一定量的抗菌物质，可以高效地杀死或抑制病源微生物。在医药领域昆虫源抗菌物质具有一定研究，但是由于目前应用研究发现的昆虫源昂贵且其提纯过程较为复杂，在农药领域的应用研究极少，限制了此类抗菌物质的应用发展。
技术实现思路
本专利技术旨在克服现有技术中的昆虫源昂贵且其提纯过程复杂，应用受限的问题，提供一种应用前景好、提纯简单易实现且在农药领域效果优异的牤提取物及其分离方法和应用。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供了一种牤提取物的分离方法，该方法步骤包括：S1，将牤粉与乙醇在索氏提取器中回流提取3-8小时得乙醇索氏提取液；S2，将步骤S1所得乙醇索氏提取液浓缩、干燥得牤提取物。本专利技术同时还提供了一种牤提取物，该牤提取物为上述分离方法制得。本专利技术同时还提供了上述牤提取物在防治植物病害中的应用。本专利技术的有益效果在于：本专利技术通过长期的研究大量的尝试发现可以从牤粉中获得防治植物病害的物质。牤类在昆虫分类学上隶属于双翅目、水牤科，较常见易于获得，牤资源丰富，价格低廉，且牤的综合开发潜力巨大，牤幼虫转化有机垃圾的综合效率较高，可以在减少有机垃圾(粪便、尾菜和餐余垃圾)的同时，生产出可以作为蛋白饲料添加剂的昆虫类蛋白质，具有较广泛的应用前景。且本专利技术的方法简单易实现，仅通过乙醇索氏提取、浓缩、干燥即可实现，且纯度高，特别是获得的牤提取物具有较强的抗菌性，经过室内生物活性测定发现其对水稻纹枯、小麦赤霉等多种植物病原菌均有抑制作用，利用本专利技术的牤提取物不仅能够防治多种植物病害，而且能够促进植物生长，对提高作物产量和提升品质均具有积极作用。本专利技术的牤提取物将是一种具有较大应用前景的生物防治新品种。具体实施方式为了使本专利技术所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术提供了一种牤提取物的分离方法，其步骤包括：S1，将牤粉与乙醇在索氏提取器中回流提取3-8小时得乙醇索氏提取液；S2，将步骤S1所得乙醇索氏提取液浓缩、干燥得牤提取物，能提供一种具有较大应用前景的生物防治新品种，不仅能够防治多种植物病害，而且能够促进植物生长，对提高作物产量和提升品质均具有积极作用。优选，步骤S1中牤粉与乙醇的质量比为1:5-1:10；进一步优选，步骤S1中牤粉与乙醇的质量比为1:8，使索氏提取更充分。优选，回流的温度为70-78℃，进一步优选为74℃，进一步保证提取所得生物成分，不会因高温变质影响性能。优选，回流提取的时间为4-7小时，进一步优选为5小时。牤粉本专利技术优选可以为黑水牤粉或黑尾斑牤粉。水牤属中的牤类，资源丰富。为增加固液接触的面积，提取前一般先将固体物质研碎，本专利技术可以先将牤研碎，采用牤粉来进行乙醇索氏提取。优选，牤粉通过将牤干加入液氮急速冷却后，粉碎制得。其中，浓缩本专利技术没有限制，可以采用常用的浓缩方法，本专利技术可以优选浓缩包括对步骤S1所得乙醇索氏提取液进行减压蒸馏，浓缩至溶液呈粘稠状得浓缩物。干燥本专利技术没有限制，可以采用本领域技术人员公知的各种干燥方式，例如常温烘干。本专利技术的分离方法还可包括对所得牤提取物的保存，优选，将所得牤提取物于丙酮中保存，保存简单。优选，牤提取物与丙酮的质量比为2:1-1:3，进一步优选为2:1-1:2，只需少量丙酮即可。保存的温度为-25℃至6℃，进一步优选为4℃，保存条件要求较低，保存方便。本专利技术的步骤具体可以为：A，牤干的粉碎：将牤干转移至研钵中，加入液氮对其进行急速冷却，然后将牤干研碎得牤粉；B，使用乙醇索氏提取步骤A所得牤粉：称取牤粉，加入质量为牤粉8倍的乙醇，使用索氏提取器74℃回流提取5小时得乙醇索氏提取液；C，对步骤B所得乙醇索氏提取液进行浓缩及干燥：对乙醇索氏提取液进行减压蒸馏，浓缩至溶液呈粘稠状；后对浓缩物进行常温烘干，得到粘稠深褐色固体干燥物；D，牤提取物的保存：对干燥物用丙酮溶解，然后转入离心管中于4℃保存备用。本专利技术同时提供了上述分离方法制得的牤提取物及上述牤提取物的应用，该牤提取物用于防治植物病害，可以防治多种植物病害，例如水稻纹枯、白瓜腐霉、番茄灰霉、小麦赤霉或番茄早疫中的一种或几种。以下是本专利技术提供的具体实施例，用以说明上述方案及其各种条件的选取。本专利技术实施例中所用试剂均采用市购分析纯。实施例1牤提取物的分离1、牤干的粉碎：将50g黑水牤干转移至研钵中，加入约40ml液氮对其进行急速冷却，然后将黑水牤干研碎。2、使用乙醇索氏提取上述所得牤粉：称取35.00g上述黑水牤粉，加入300ml乙醇，使用索氏提取器74℃回流提取5小时。3、对上述所得乙醇索氏提取液进行浓缩及蒸干：a、对牤粉的乙醇索氏提取液进行减压蒸馏，浓缩至溶液呈粘稠状；b、将上述所得粘稠状浓缩物转移至已称重容器，c、对浓缩物进行常温烘干，得到粘稠深褐色固体；d、称容器与所得干燥物总重量；4、计算牤粉乙醇提取率，计算方法：5、牤提取物的保存对干燥物用1:1量的丙酮溶解，然后转入离心管中于4℃保存备用样品S1。实施例2采用与实施例1相同的方法步骤分离牤提取物S2，不同的是牤干为黑尾斑牤干。性能测试牤提取物样品S1和S2对病原真菌离体活性测试采用菌丝生长速率法，在土豆培养基(本实施例的土豆培养基的制备及灭菌：1L蒸馏水中加入200g土豆，20g蔗糖，20g琼脂,小火沸腾30分钟,过滤掉土豆渣即得到病原菌培养基，120℃灭菌20分钟。)中加入用无菌水稀释5倍的牤提取物丙酮溶液成1ml溶液，用涂布棒涂抹均匀，直至吸干。加入相同浓度丙酮(200μl丙酮和800μl无菌水)的土豆培养基作为对照。供试真菌在土豆培养基平板活化培养形成菌落，用打孔器(5mm)制取菌饼，将菌丝面朝下接菌于土豆培养基平板中央。将接种好的平板置于24℃生化培养箱中培养1-4天后调查(不同真菌生长速度不同)，采用十字交叉法测量菌落生长直径，并计算抑菌率。牤提取物对供试病原真菌的抑制作用结果如表1所示。表1从离体测试防治结果可以看出，本专利技术的牤提取物对水稻纹枯、小麦赤霉等病具有一定的防治效果，是一种具有较大应用前景的生物防治菌新品种。在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本专利技术的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牤提取物的分离方法，其特征在于，步骤包括：S1，将牤粉与乙醇在索氏提取器中回流提取3‑8小时得乙醇索氏提取液；S2，将步骤S1所得乙醇索氏提取液浓缩、干燥得牤提取物。

【技术特征摘要】
1.一种牤提取物的分离方法，其特征在于，步骤包括：S1，将牤粉与乙醇在索氏提取器中回流提取3-8小时得乙醇索氏提取液；S2，将步骤S1所得乙醇索氏提取液浓缩、干燥得牤提取物。2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤S1中牤粉与乙醇的质量比为1:5-1:10。3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述回流的温度为70-78℃。4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述回流提取的时间为4-7小时。5.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述牤...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凯，
申请(专利权)人：沈阳化工研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21