【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种非O157产志贺毒素大肠杆菌的高效检测方法,包括以下步骤:(1)样品的采集(2)样品的前增菌:将采集的样品进行前增培养;(3)二重PCR的鉴定:取培养物以煮沸法制得的DNA为模板,进行毒力基因stx1和stx2的二重PCR检测,剩余的培养物放置4℃冰箱保存;(4)非O157STEC分离:将步骤3中stx1和/或stx2阳性的样品进行非O157STEC分离;(5)多重PCR鉴定:步骤(4)中PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,stx1和/或stx2阳性的样品再进行毒力基因stx1、stx2、eaeA、ehxA的四重PCR检测;(6)O抗原的测定:步骤(5)中四重PCR检测的阳性样品于121℃,2h高压破坏荚膜,暴露O抗原;取1ml菌液离心12000r/min,5min,弃上清,加5%石炭酸生理盐水重悬;利用玻板、试管凝集试验测定O抗原。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:高崧,陈先亮,高清清,吴瑶瑶,李甜甜,姜海清,
申请(专利权)人:扬州大学,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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