正心泰片指纹图谱的建立方法和应用技术

本发明专利技术涉及正心泰片指纹图谱的建立方法和应用。包括将正心泰片样品用溶剂提取制备样品的供试液，在一定的色谱条件下测试供试液液相色谱指纹图谱，并通过丹参酮ⅡA，葛根素两个指标性成分的含量作为质控标准来控制正心泰片的质量，从而达到控制正心泰片药品质量的目的。实验证明，本发明专利技术的指纹图谱多成分控制药品质量在药品生产中能起到很好的质量控制作用，是一种评价中药复方制剂生产质量的关键技术。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及正心泰片指纹图谱的建立方法和应用。包括将正心泰片样品用溶剂提取制备样品的供试液，在一定的色谱条件下测试供试液液相色谱指纹图谱，并通过丹参酮ⅡA，葛根素两个指标性成分的含量作为质控标准来控制正心泰片的质量，从而达到控制正心泰片药品质量的目的。实验证明，本专利技术的指纹图谱多成分控制药品质量在药品生产中能起到很好的质量控制作用，是一种评价中药复方制剂生产质量的关键技术。【专利说明】正心泰片指纹图谱的建立方法和应用
本专利技术属于药物分析检测领域，涉及一种正心泰片指纹图谱的建立方法和应用。
技术介绍
随着现代药物分析技术的发展，指纹图谱技术是当今国际公认的控制中药质量的质控模式，它在原药材的栽培、引种，中成药生产工艺的规范与优化，产品质量标准的制定等方面都提供全方位的质量保证。近年来，国外对中草药产品的质量评价也在提倡指纹图谱。随着各种分析技术的创新和提高以及计算机应用技术的不断发展，世界各国对天然药物的了解和研究在不断深入，中药指纹图谱技术在国内已成为一种发展趋势，其研究的方法和技术更趋成熟完善，成为公认的控制中药和天然药质量最有效的方法和手段。日本汉方药在20世纪80年代就采用高效液相指纹图谱控制质量。欧共体也将指纹图谱监控技术应用于植物药质量控制，美国食品药品管理局(FDA)允许草药保健品申报资料时提供色谱指纹图，要求植物药在质量控制方面，必须制定指纹图谱的检测标准。世界卫生组织在1996年草药评价指导原则中规定:如果草药的活性成分不明，可以提供色谱指纹图以证明产品质量的一致性。英国、印度、加拿大等国家在植物药的研究中，也对指纹图谱十分重视。在许多国家的药典中，色谱指纹图谱已成为主要的分离分析方法。目前，国外许多研究机构对中药指纹图谱的研究主要为建立指纹图谱与药效的相关性研究，是以中药理论和新药研发研究体系为主的模式。心脑血管疾病是严重危害人类的常见疾病。近年来，由于社会的发展，工作、生活、饮食结构及环境等的变化，心脑血管疾病呈上升趋势。近年来的研究发现，单味植物中药含有许多种化学成分，由数味药组成的中药复方，其化学成分就更加复杂，中药化学成分的复杂性，决定了它们有多靶点作用。由于复方的质量控制方法不够全面，难以全面的控制复方质量及药物疗效。因此，本研究针对正心泰片的质量控制方法进行改进，为进一步更好的治疗心脑血管疾病提供保障。正心泰片是由黄芪、葛根、槲寄生、丹参、山楂、川芎制成的片剂制剂，临床上用于治疗冠心病、心绞痛各类疾病等，功能是补气活血，通脉益肾，其效果已经得到临床的验证，而是否能够保证药物的质量以及正心泰片中有效成分的含量，是决定正心泰片疗效的基础。如果单纯用丹参的活性成分来说明正心泰片的内在质量，具有一定的片面性。要控制正心泰片的功效，必须对它的物质群整体予以控制。现在，对丹参中活性成分丹参酮、丹酚酸的测定方法较多，对葛根中活性成分葛根素测定方法较多，但如何能够用一种方法同时控制复方中多种药材的有效成分含量，从更宏观的角度对正心泰片片剂制剂进行质量控制的宏观质量控制方法尚未见报道。因而获得一种有效控制正心泰片质量的方法一直是业内追求的目标。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供正心泰片指纹图谱的建立方法和应用，通过此测定方法，可控制正心泰片质量。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的，一种正心泰片指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用液相色谱法检测正心泰片中丹参酮II A、葛根素的含量；所述液相色谱的条件如下:色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶TC-C18为填充相；流动相:体积比9:91-59:41的乙腈和水溶液，进行梯度洗脱；流速:0.5-1.5mT,/min ；柱温:25-40°C ;紫外检测波长:271nm ;理论塔板数按葛根素计算，应不低于4000-6000。上述正心泰片指纹图谱的建立方法，具体包括如下步骤:S1、制备对照品溶液:取丹参酮II A、葛根素，加甲醇制成每ImL含0.16mg丹参酮IIA、0.084mg葛根素的溶液；S2、制备供试品溶液:取正心泰片，除去包衣，研细；以一克粉末，加20ml含30%甲醇的乙酸乙酯溶液；超声处理后，补足溶剂重量；0.45um微孔滤膜过滤，获得所述供试品溶液；S3、测定:吸取所述对照品与所述供试品溶液各5yL，注入液相色谱仪，进行测定，得到指纹图谱。其中，步骤S3中液相色谱的条件如下:色谱柱:Agilent250mmX4.6mm，5 u m ;流速:lmL/min;柱温:25°C。优选方式下，步骤S2中超声处理的参数为:功率250W，频率25kHz，处理20分钟。此外，所述梯度洗脱程序按如下体积比设置进行:0分钟时，流动相为9%的乙腈和91%的水溶液；10分钟时，流动相为10%的乙腈和90%的水溶液；15分钟时，流动相为11%的乙腈和89%的水溶液；40分钟时，流动相为11%的乙腈和89%的水溶液；42分钟时，流动相为17%的乙腈和83%的水溶液；105分钟时，流动相为59%的乙腈和41%的水溶液。所述建立的指纹图谱中包括20个特征峰，其中峰2为葛根素，峰20为丹参酮II A0本专利技术还提供了一种上述权利要求所述正心泰片指纹图谱建立方法的应用，建立的指纹图谱用于检测正心泰片的质量。本专利技术以正心泰片中有效成分丹参中丹参酮II A，葛根中葛根素为主建立起来的HPLC指纹图谱，代表着正心泰片大部分药理活性，能有效地表征正心泰片的质量。从而实现对正心泰片最大可能的化学成分进行检测，有利于对中药质量的全方面监控。以正心泰片中丹参葛根各有效成分指纹图形作为一个整体看待，避免了因只测定一个药材而判定正心泰片整体质量的片面性，又减少了为质量达标而认为处理的可能性。本专利技术为完整、准确评价正心泰片的质量提供了新的对照标准，将为提高正心泰片及其他以丹参、葛根为主要成分制剂的质量及疗效做出贡献。本专利技术具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好、易于掌握的特点。本专利技术正心泰片的检测方法，是通过大量实验所得到的切实可行的方法，具有重复性。可通过将上述方法测定方法建立的正心泰片指纹图谱作为标准指纹图谱，其测定方法可作为含有丹参、葛根制剂有效成分测定的标准指纹图谱，以鉴定其有效成分。本专利技术结合液相色谱指纹图谱发展潮流，找到了合适的正心泰片指纹图谱检测方法，包括将正心泰片样品用溶剂提取制备样品的供试液，在一定的色谱条件下测试供试液液相色谱指纹图谱，并通过丹参酮II A，葛根素两个指标性成分的含量作为质控标准来控制正心泰片的质量，从而达到控制正心泰片药品质量的目的。实验证明，本专利技术的指纹图谱多成分控制药品质量在药品生产中能起到很好的质量控制作用，是一种评价中药复方制剂生产质量的关键技术。【专利附图】【附图说明】图1是正心泰片HPLC指纹图谱。图2是混合对照品HPLC指纹图谱。【具体实施方式】本专利技术正心泰片指纹图谱的建立方法，其中高效液相色谱的条件如下:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充相；流动相为体积比为9:91-59:41的乙腈和水溶液进行梯度洗脱；流速:0.5-1.5mL/min ;柱温:25-40°C ;紫外检测波长:271nm ;理论塔板数按葛根素计算，应不低于4000。优选地，所述方法还包括通过以下方法制备对照品溶液:取丹参酮II A，葛根素对照品适本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种正心泰片指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用液相色谱法检测正心泰片中丹参酮ⅡA、葛根素的含量；所述液相色谱的条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶TC‑C18为填充相；流动相：体积比9:91‑59:41的乙腈和水溶液，进行梯度洗脱；流速：0.5‑1.5mL/min；柱温：25‑40℃；紫外检测波长：271nm；理论塔板数按葛根素计算，应不低于4000‑6000。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李彦冰，康晓宇，
申请(专利权)人：大连天宇制药有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21