一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法技术

本发明专利技术涉及一种杜鹃花金踯躅的组织培养快繁方法，具体地说，涉及植物生物技术中植物组织培养方法。组培快繁包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，选取金踯躅的茎段为外植体，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson+2.0mg/lZT+0.1mg/lNAA，pH5.1-5.2；继代培养基为改良Anderson+1.0mg/lZT+0.1mg/lNAA；生根培养基为1/2改良Anderson+0.5mg/lNAA。使用该方法可达到一个茎段诱导4-5或者更过的丛枝，45天生根率达77%，移栽成活率90%，极大地提高了金踯躅的快繁能力，为新品种金踯躅的保存和规模化生产提供了技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种杜鹃花金踯躅的组织培养快繁方法，具体地说，涉及植物生物技术中植物组织培养方法。
技术介绍
“金踯躅”是从羊踯躅实生苗中选育出的变异品种。羊踯躅隶属于杜鹃花科(Ericaceae)杜醇花属(Rhododendron)羊掷躅亚属,落叶灌木。“金掷躅”的花金黄色,花色鲜艳，具有较高的观赏价值，由于“金踯躅”为羊踯躅芽突变得到的变异性状的新品种，并且经过新品种专利技术人的多年试验，金踯躅的扦插几乎不生根，扦插较为困难。迄今，金踯躅没有相关生物技术方法快繁的研究与报道，为使金踯躅优良的特性能够保存和可持续利用，需要研究该种的组织培养，并形成一套专门的组织培养快繁技术体系。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服金踯躅生扦插困难、成活率低的不足，提供一种杜鹃花金踯躅的组织培养方法，使之能够繁衍。该新品种金踯躅在优良性状的保存能够得到保障条件下，同时缩短离体培养时间，提高生根率和幼苗移栽率，为新品种“金踯躅”的可持续利用奠定组培种苗繁育基础。为了实现本专利技术的目的，本专利技术提供了如下的技术方案: ? 包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson+2.0mg/1 ZT +0.lmg/1 NAA, pH5.1-5.2 ;继代培养基为改良 Anderson +1.0mg/l ZT+0.lmg/1 NAA ;生根培养基为 1/2 改良 Anderson +0.5mg/l NAA。`所述外植体的消毒先用5%洗衣粉水浸泡清洗20min,再用无菌水冲洗至无泡沫，然后采用75%的酒精灭菌30s，无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒8min，分两次进行，第一次消毒5min，不断震荡后用无菌水清洗3_5遍,再用0.1%升汞消毒3min后用无菌水清洗3-5遍。所述丛芽诱导和继代及生根培养的温度为20_23°C，湿度30-45%。所述丛芽诱导和继代及生根培养的光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光 1500-2000LUX。试管苗移栽是生根组培苗在培养瓶内培养45天以后，炼苗7天，再移栽到温室大棚。移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2。试管苗移栽在早上8-11点以前，温度为18_25°C下进行。杜鹃花金踯躅的组培快繁方法具体操作是:选取金踯躅茎段为外植体，用5%的洗衣粉水进行浸泡和冲洗，然后用75%酒精消毒30s，后用0.1%升汞溶液进行消毒8min，分两次进行，第一次5min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3分钟后用无菌水清洗3-5遍； 将金踯躅茎段置于消毒后的滤纸上，切取一叶一段，接种至诱导培养基改良Anderson+2.0mg/1 ZT +0.lmg/1 ΝΑΑ, ρΗ5.1_5.2，温度 20-23 °C，湿度 30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出丛芽后转接入改良Anderson+1.0mg/1 ZT +0.lmg/1 NAA中进行增殖、继代和生根，继代3_4次，每次30天； 将继代苗转入生根培养基，茎段未木质化，生根培养基为1/2改良Anderson +0.5mg/lNAA, 45天生根培养后进行组培苗炼苗7天后得试管苗，将试管苗移栽到基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，PH为5.1-5.2，湿度50-60%的大棚内，每天早晚各喷水一次。本专利技术技术方案提出是基于下述的研究基础:“金踯躅”为杜鹃花新品种，色彩艳丽丰富，但金踯躅的生根难度较大，扦插几乎不生根，为了解决其大量快繁、保存和可持续利用，故此专利技术金踯躅组织培养的技术。 本专利技术组培扩繁不仅可以在短时间内获得大量的再生植株，而且移栽生长良好且能保持其优良性状不变。试管苗移栽的温度控制在18-23°C，最好在早上8-11点进行移栽，组培苗虽然在生长过程中很少受病虫害的浸染，但为了预防病虫害的发生，在生长季内喷施多囷灵、氧化乐果2_3次为且。夏季要注思通风。本专利技术方法其优点在于: 1、建立了有效的“金踯躅”组培快繁方法，解决了其生根困难，快繁受阻的状况。2、通过组培快繁得到的幼苗，成苗容易，一致性强，生长健壮，叶色浓绿，很少病虫害，易于管理。3、利用组培快繁方法快繁的金踯躅不受季节限制，任何时候都可以进行组培。4、利用组培快繁的方法快繁的金踯躅可以保持物种特性，使该新品种能够延续和可持续利用。本专利技术组培快繁方法繁育的金踯躅在I个月内增殖系数为4_5，45天生根率为77%，移栽成活率为90%，极大地提高了金踯躅的快繁系数，为该物种的保存和可持续利用提供了非常有效的快繁方法。【具体实施方式】以下实施例用来进一步说明本专利技术的实质性内容。根据本专利技术技术方案和实施例的描述，也许同领域技术人员在本专利技术的基础上还可以对本专利技术技术方案进行一些修改和改进。因此，在不偏离本专利技术主要技术方案基础上所做的修改和改进，均应属于本专利技术所要求保护的范围。本专利技术杜鹃花金踯躅的组培快繁方法可具体描述为:方法包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导，继代并生根培养，试管苗移栽步骤，选取金踯躅的茎段为外植体，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson +2.0mg/1 ZT +0.lmg/1 NAA, pH5.1-5.2 ；继代培养基为改良Anderson +1.0mg/l ZT +0.lmg/1 NAA ;生根培养基为1/2改良Anderson+0.5mg/l NAA。所述外植体消毒先用5%的洗衣粉水,浸泡清洗20min,用无菌水冲洗至无泡沫,后用70%的酒精消毒30s,无菌水冲洗3-5遍后,用0.1%升萊溶液进行消毒8min,分两次进行，第一次5min，不断震荡后用无菌水清洗3_5遍，再用0.1%升汞消毒3min后用无菌水清洗3-5遍。所述丛芽诱导和继代及生根培养的温度为20_23°C，湿度30-45%。所述丛芽诱导和继代及生根培养的光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光 1500-2000LUX。移栽生根是组培苗在培养瓶内生根培养45天以后，炼苗7天，再移栽于温室大棚中。移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2。移栽在早上8-11点以前，温度为18_25°C下进行。实施例1:选取金踯躅的茎段为外植体，用5%的洗衣粉水浸泡和冲洗20min，后用70%的酒精消毒30s,无菌水冲洗3-5遍后,用0.1%升萊溶液进行消毒8 min,分两次进行，第一次5 min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3 min后用无菌水清洗3-5遍,用无菌滤纸吸干表面水分后接种至诱导培养基改良Anderson+2.0mg/1 ZT+0.lmg/1ΝΑΑ,ρΗδ.1-5.2，温度20_23°C，湿度30_45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出丛芽后转接入改良Anderson+l.0mg/1 ZT+0.lmg/1 NAA中进行增殖、继代，生根为改良l/2Anderson+0.5mg/l NAA,继代3_4次，周期30天；组培苗炼苗一周后，移栽于基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，PH为5.1-5.2，湿度5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于组培快繁包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson?+2.0mg/l?ZT?+0.1mg/l?NAA，pH5.1?5.2；继代培养基为改良Anderson?+1.0mg/l?ZT?+0.1mg/l?NAA；生根培养基为1/2改良Anderson?+0.5mg/l?NAA。

【技术特征摘要】
1.一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于组培快繁包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良 Anderson +2.0mg/1 ZT +0.lmg/1 NAA, ρΗ5.1-5.2 ;继代培养基为改良 Anderson+1.0mg/1 ZT +0.lmg/1 NAA ;生根培养基为 1/2 改良 Anderson +0.5mg/l NAA。2.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述外植体的消毒先用5%洗衣粉水浸泡清洗20min，再用无菌水冲洗至无泡沫，然后采用75%的酒精灭菌30s,无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒8min，分两次进行，第一次消毒5min,不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3min后用无菌水清洗3_5遍。3.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述丛芽诱导和继代及生根培养的温度为20-23°C，湿度30-45%。4.根据权利I所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述丛芽诱导和继代及生根培养的光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。5.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于试管苗移栽是生根组培苗在培养瓶内培养45天以后，炼苗7天，再移栽到温室大棚。6.根据权利要求1或5所述的杜鹃花金...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国强，李奋勇，田晓玲，张长芹，
申请(专利权)人：云南远益园林工程有限公司，
类型：发明
国别省市：