一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法。目前对雷公藤多甙或者直接用乙醇提取雷公藤原料后的提取物进行层析分离，工艺是采用多次层析的方法，并经过旋转薄层层析，最终得到的雷公藤氯内酯醇量很少，根本不能用于大生产。本发明专利技术首先使用亲水性溶剂低级醇/酮对雷公藤多苷前段浸膏进行提取，将大部分前段浸膏中的亲脂性杂质分离，然后用三氯甲烷萃取，将在低级醇/酮溶液中有较小溶解度的另一些非目标产物分离，接着层析分离纯化，最后用氯仿重结晶。本发明专利技术分离、纯化工艺简单易行，适合工业化大生产，所制得的雷公藤氯内酯醇可用于开发新药。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及自植物提取浸膏中制备天然化学品的方法，具体地说是一种从雷公藤前段浸膏中提取出单一成分雷公藤氯内酯醇的方法。
技术介绍
雷公藤氯内酯醇(Tripchlorolide)是从卫矛科雷公藤属植物中分离得到的环氧二萜内酯类化合物，药理试验表明，它具有较强的抗炎、免疫抑制和雄性抗生育作用，其效价是目前临床应用的“雷公藤多苷”制剂的100-200倍，是雷公藤显示抗炎、免疫抑制和雄性抗生育作用的主要活性单体之一，而且已被证实无致突变作用，但是该化合物由原植物提取得率极低。中国专利号89105433.2公开了雷藤氯内酯醇的制备方法及抗生育用途，其特点是对雷公藤多甙或者直接用乙醇提取雷公藤原料后的提取物进行层析分离，工艺是采用多次层析的方法，并经过旋转薄层层析，最终得到的雷公藤氯内酯醇量很少，根本不能用于大生产。中国专利号200810071485.8公开了雷公藤氯内酯醇T4的新用途，提供了雷公藤氯内酯醇T4在治疗小胶质细胞介导的Αβ卜42和LPS的神经毒性作用所引起的神经免疫炎性疾病的新用途，从而为雷公藤氯内酯醇T4应用于神经免疫炎性疾病，尤其是阿尔茨海默病的防治提供了直接有力的实验依据和理论基础，既有很强的科学性和创新性，又有很高的开发应用价值。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是从雷公藤多苷生产废弃料中提取出一种高效低毒的雷公藤单体有效成分，以提供高纯度的雷公藤氯内酯醇，用于开发新的雷公藤单体制剂。为此，本专利技术采用如下的技术方案:，其步骤如下:1)转化提取:将雷公藤多苷层析分离过程中所舍弃的前段浓缩浸膏称重，按重量比加入3-8倍量的溶剂低级酮或低级醇，再加入溶剂量2-5%的盐酸，所用盐酸的质量百分数为30-40%，加热回流提取2-6小时，得到的溶液中加入与溶剂等倍量的水，充分搅拌均匀，然后静置冷却，分层； 2)浓缩、萃取:将步骤I)所得的上层红色溶液进行蒸馏，回收溶剂，得到浓缩提取液，再往浓缩提取液中加入与其等体积的三氯甲烷萃取三次，将萃取液回收三氯甲烷后减压抽干，得粉末状粗提物； 3)纯化:所述的纯化是将粉末状粗提物用三氯甲烷溶解后装硅胶柱，进行层析分离纯化，收集相应的洗脱液，脱溶剂干燥后得到粉末状精提物，最后用氯仿重结晶。本专利技术利用雷公藤多苷前段废弃液中含有的雷公藤内酯醇在酸性条件下能与低级醇/酮反应，转化成高效低毒的雷公藤氯内酯醇的特点，首先使用亲水性溶剂低级醇/酮进行提取，将大部分前段浸膏中的亲脂性杂质分离，然后用三氯甲烷萃取，将在低级醇/酮溶液中有较小溶解度的另一些非目标产物分离，这时所得的粗提物中雷公藤氯内酯醇含量有大幅度提高(从十万分之几提高到千分之几)，可大大简化以后的分离纯化过程，一步层析后即可进行重结晶，更易进行大生产操作。进一步，所述的低级酮为丙酮，所述的低级醇为甲醇或者乙醇。进一步，层析用硅胶的目数为200-300目，装柱前将硅胶的水分调节到8-10%，其层析过程中所加的洗脱剂为氯仿-乙醇的混合溶剂，其体积比为99:1-95:5。选用上述层析工艺条件，富集雷公藤氯内酯醇，使其含量从2%。提高到10%以上。进一步，所得粉末状粗提物中雷公藤氯内醇的含量在2-10%。；所得精提物中雷公藤氯内醇的含量在10-40%。本专利技术充分利用了雷公藤多苷提取过程中的废弃物，有利于充分利用雷公藤的药用资源，并获得了高效低毒的雷公藤药物；本专利技术采用的方法使所得的粗提物中雷公藤氯内酯醇含量有大幅度提高，大大简化了以后的分离纯化过程，一步层析后即可进行重结晶，更易进行大生产操作。本专利技术分离、纯化工艺简单易行，适合工业化大生产，所制得的雷公藤氯内酯醇可用于开发新药。下面结合【具体实施方式】对本专利技术做进一步的说明，但不限于本实施例的范围。【具体实施方式】 实施例1 取雷公藤前段浓缩浸膏4100g，加丙酮4500ml与盐酸400ml，置10000ml圆底烧瓶中，放入水浴锅中80°C加热回流，待开始回流时反应2小时，取出，加入纯化水4500ml，以塑料棒搅拌均匀，静置过夜；第二天分出上层丙酮溶液，以滤纸过滤，滤液置水浴上先65°C回收丙酮(每2000ml回收600ml)后调至80°C回收至约浓液1000ml左右，倾出，滤液加氯仿萃取三次，萃取液经回收氯仿后减压抽干得转化物粉末241.986g。转化物1:10上硅胶柱，乙醇一氯仿梯度洗脱，收集T4，抽干，干品加氯仿重结晶得雷公藤氯内酯醇结晶160mg。实施例2 取雷公藤前段浓缩浸膏30Kg加乙醇90Kg，盐酸1800ml，于搪瓷反应锅中蒸汽加热回流6小时，放至塑料贮桶，加入水90Kg，开启搅拌机搅拌15分钟，静置过夜；第二天真空吸出上层溶液，于搪瓷反应锅中回收乙醇，浓缩至约1/3量时放出，滤液加氯仿萃取三次，萃取液经回收氯仿后减压抽干得粗提物粉末7.215Kg (收率24.05%)。将粗提物粉末装不锈钢大柱(30X500cm)进行硅胶层析分离，得精提物粉末1343.3g。将精提物粉末用氯仿重结晶两次得白色结晶161.2g，测含量为98.5%雷公藤氯内酯醇。实施例3 取雷公藤前段浓缩浸膏IOOKg加甲醇500Kg，盐酸20L，于搪瓷反应锅中蒸汽加热回流6小时，放至塑料贮桶，加入水500Kg，开启搅拌机搅拌15分钟，静置过夜；第二天真空吸出上层溶液，于搪瓷反应锅中回收甲醇，浓缩至约1/3量时放出，滤液加氯仿萃取三次，萃取液经回收氯仿后减压抽干得粗提物粉末20.14Kg (收率20.14%)。将粗提物粉末装不锈钢大柱(30X500cm)进行硅胶层析分离，得精提物粉末2348.6g。将精提物粉末用氯仿重结晶两次得白色结晶422.75g，测含量为99.01%雷公藤氯内酯醇。上述实施例中雷公藤氯内酯醇的高效液相检测方法为:高效液相色谱仪Agilent1260 ;流动相:甲醇一水(50:50);色谱柱:C18柱(4.6X250mm);检测波长选择219nm ;流速为:1.0ml/min，室温操作。层析过程中TLC方法:硅胶G薄层板IOX20cm ;展开剂:环己烷一丙酮(5:3)，乙醇一氯仿(5:95);显色剂 为:Keddes试剂。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法，其步骤如下：1)转化提取：将雷公藤多苷层析分离过程中所舍弃的前段浓缩浸膏称重，按重量比加入3?8倍量的溶剂低级酮或低级醇，再加入溶剂量2?5%的盐酸，所用盐酸的质量百分数为30?40%，加热回流提取2?6小时，得到的溶液中加入与溶剂等倍量的水，充分搅拌均匀，然后静置冷却，分层；2)浓缩、萃取：将步骤1)所得的上层红色溶液进行蒸馏，回收溶剂，得到浓缩提取液，再往浓缩提取液中加入与其等体积的三氯甲烷萃取三次，将萃取液回收三氯甲烷后减压抽干，得粉末状粗提物；3)纯化：所述的纯化是将粉末状粗提物用三氯甲烷溶解后装硅胶柱，进行层析分离纯化，收集相应的洗脱液，脱溶剂干燥后得到粉末状精提物，最后用氯仿重结晶。

【技术特征摘要】
1.一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法，其步骤如下:1)转化提取:将雷公藤多苷层析分离过程中所舍弃的前段浓缩浸膏称重，按重量比加入3-8倍量的溶剂低级酮或低级醇，再加入溶剂量2-5%的盐酸，所用盐酸的质量百分数为30-40%，加热回流提取2-6小时，得到的溶液中加入与溶剂等倍量的水，充分搅拌均匀，然后静置冷却，分层； 2)浓缩、萃取:将步骤I)所得的上层红色溶液进行蒸馏，回收溶剂，得到浓缩提取液，再往浓缩提取液中加入与其等体积的三氯甲烷萃取三次，将萃取液回收三氯甲烷后减压抽干，得粉末状粗提物； 3)纯化:所述的纯化是将粉末状粗提物用三氯甲烷溶解后装硅胶柱，进行层析分离纯化，收集相应...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘法千，金春晖，吕文辉，
申请(专利权)人：浙江得恩德制药有限公司，
类型：发明
国别省市：