抗FGFR4抗体及使用方法技术

本发明专利技术提供了抗FGFR4抗体及其使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗FGFR4抗体及使用方法对相关申请的交叉引用本申请要求2011年4月7日提交的美国专利申请N0.61/473，106的优先权，通过提及而将其内容收入本文。序列表本申请含有序列表，已经以ASCII格式经EFS-WEB提交且通过述及完整收入本文。2012年3月22日创建的所述ASCII拷贝命名为P4524R1W0.txt，并且大小为37，020个字节。专利
本专利技术涉及抗FGFR4抗体及其使用方法。专利技术背景成纤维细胞生长因子(FGF)构成22种具有不同生物学活性的结构相关多肽的一个家族；这些信号传导分子大多数通过结合并活化它们的关联受体(FGFR ;命名为FGFR1-4)(受体酪氨酸激酶的一个家族)来发挥功能(Eswarakumar et al., 2005 ；0rnitzand Itoh, 2001)。这些受体-配体相互作用导致受体二聚化和自我磷酸化、与膜结合的和胞质的辅助蛋白质形成复合物、及启动多种信号传导级联(Powers et al.，2000)。FGFR-FGF信号传导系统通过调节诸如生长、分化、迁移、形态发生、和血管发生等细胞功能/过程在发育和组织修复中发挥重要作用。FGFR中的改变(即过表达、突变、易位、和截短)与多种人癌症有关，包括骨髓瘤、乳腺癌、胃癌、结肠癌、膀胱癌、胰腺癌、和肝细胞癌(Bange et al., 2002 ；Cappellen etal.,1999 ；Chesi et al., 2001 ；Chesi et al.,1997 ；Gowardhan et al., 2005 ；Jaakkolaet al., 1993 ；Jang et al., 2001 ；Jang et al., 2000 ；Jeffers et al., 2002；Xiao etal.，1998)。肝细胞癌(HCC)是全球癌症相关死亡的主要起因之一，每年引起超过50万例死亡(Shariff et al.，2009)。虽然FGFR4在癌症中的作用仍然有待完全阐明，但是数项发现提示这种受体可能是HCC发生和/或发展中的一个重要角色。FGFR4是人肝细胞中存在的优势FGFR同等型(Kan et al.，1999);我们先前还已经报告了肝组织具有FGFR4的最高转录物水平(Lin et al.，2007)。除了在肝癌(以及数种其它类型的人肿瘤)过表达的FGFR4之外，还在HCC患者样品中观察到数种错义遗传改变；值得注意地，鉴定到FGFR4中高度频繁的G388R单核苷酸多态性(与头和颈癌降低的存活，以及结肠、软组织、前列腺、和乳腺癌更具攻击性的表型有关)(Ho et al.，2009)。而且，先前已经证明了 FGF19 (即FGFR4特异性配体)在小鼠中的异位表达促进肝细胞增殖、肝细胞发育异常、和瘤形成(Nicholes etal.，2002)。清楚的是仍然需要具有最适于开发成治疗剂的临床属性的药剂。本文所述专利技术满足了此需求并提供了其它好处。通过述及而完整收录本文中引用的所有参考文献(包括专利申请和出版物)。专利技术概述本专利技术提供抗FGFR4抗体及其使用方法。一方面，本专利技术提供了与FGFR4结合的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体以≤InM的亲和力结合人FGFR4。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体以≤InM的亲和力结合人、小鼠和猕猴FGFR4。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体以≤0.05nM的亲和力结合人FGFR4。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体对具有图12D所示氨基酸序列的小鼠C3蛋白不发生实质性结合。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体结合变性的FGFR4。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体结合还原的、变性的FGFR4。在一些实施方案中，使用Western印迹来测定抗FGFR4抗体对FGFR4的结合。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体对包含G165A突变的人FGFR4不发生实质性结合。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体结合与包含成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170、基本上由成熟人？6?1?4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成或由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的序列具有至少70%、80%、90%、95%、98%序列同一性或相似性的多肽。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体结合包含成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170、基本上由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成或由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的多肽。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体是FGFR4活性的拮抗剂。在一些实施方案中，FGFR4活性为FGF诱导的细胞增殖、FGF对FGFR4的结合、暴露于FGF19的细胞中FGF19介导的对CYP7 α 7表达的抑制、或FGF19诱导的集落形成。在一些实施方案中，FGFl和/或FGF19对FGFR4的结合受到抑制。在一些实施方案中，抑制FGFl结合FGFR4的IC5tl为约0.1OnM 而抑制 FGF19 结合 FGFR4 的 IC50 为约 0.1OnM0在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体为单克隆抗体。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体为人抗体、人源化抗体、或嵌合抗体。在一些实施方案中，该抗FGFR4抗体为结合FGFR4的抗体片段。在一些实施方案中，该抗体包含(a)HVR_H3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:3，(b)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:6，和(c)HVR-H2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:2。在一些实施方案中，该抗体包含(a) HVR-Hl，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:1，(b)HVR-H2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:2，和(c)HVR-H3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:3。在一些实施方案中，该抗体进一步包含(a) HVR-Ll，其包含氨基酸序列SEQ ID N0:4 ；(b)HVR-L2，其包含氨基酸序列SEQ ID N0:5;和(c)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID N0:6。在一些实施方案中，该抗体包含(a)HVR-Ll，其包含氨基酸序列SEQ ID N0:4 ；(b)HVR-L2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:5 -M (c)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID N0:6。在一些实施方案中，该抗体进一步包含SEQ ID N0:9、10、ll和/或12的轻链可变域框架序列。在一些实施方案中，该抗体进一步包含SEQ ID NO: 13、14、15和/或16的重链可变域框架序列。在一些实施方案中，该抗体包含(a) VH序列，其与氨基酸序列SEQ ID N0:7具有至少95%序列同一性；(b) VL序列,其与氨基酸序列SEQ ID N0:8具有至少95%序列同一性；或(c) (a)中的VH序列和(b)中的VL序列。在一些实施方案中，该抗体包含VH序列SEQID N0:7。在一些实施方案中，该抗体包含VL序列SEQ ID N0:8。在一些实施方案中，该抗体包含VH序列SEQ ID N0:7和VL序列SEQ ID N0:8。在一些实施方案中，该抗体为全长IgGl抗体。本专利技术还提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合FGFR4的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体以≤1nM的亲和力结合人FGFR4。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.04.07 US 61/473,1061.一种结合FGFR4的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体以≤InM的亲和力结合人FGFR4。2.权利要求1的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体以≤InM的亲和力结合人、小鼠和猕猴FGFR4。3.权利要求2的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体以≤0.05nM的亲和力结合人FGFR4。4.权利要求1-3任一项的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体对具有图12D所示氨基酸序列的小鼠C3蛋白不发生实质性结合。5.权利要求1-4任一项的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体对包含G165A突变的人FGFR4不发生实质性结合。6.权利要求1-5任一项的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体结合与如下序列具有至少70%、80%、90%、95%、98%序列同一性或相似性的多肽:包含成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170的序列、基本上由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的序列或由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的序列。7.权利要求6的分离的抗体，其中该抗FGFR4抗体结合如下多肽:包含成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170的多肽、基本上由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的多肽或由成熟人FGFR4氨基酸序列的氨基酸编号150至170组成的多肽。8.权利要求1-7任一项的抗体，其中该抗FGFR4抗体是FGFR4活性的拮抗剂。9.权利要求8的抗体，其中FGFR4活性为FGF诱导的细胞增殖、FGF对FGFR4的结合、暴露于FGF19的细胞中FGF19介导的对CYP7 α 7表达的抑制或FGF19诱导的集落形成。10.权利要求9的抗体，其中FGFl和/或FGF19对FGFR4的结合受到抑制。11.权利要求10的抗体，其中抑制FGFl结合FGFR4的IC50为约0.1OnM且抑制FGF19结合 FGFR4 的 IC50 为约 0.1OnM。12.权利要求1-11任一项的抗体，其为单克隆抗体。13.权利要求1-11任一项的抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。14.权利要求1-11任一项的抗体，其为结合FGFR4的抗体片段。15.权利要求1-14任一项的抗体，其中该抗体包含(a)HVR-H3，其包含氨基酸序列SEQID NO:3，(b)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:6，和(c)HVR-H2，其包含氨基酸序列SEQID NO:2。16.权利要求1-14任一项的抗体，其中该抗体包含(a)HVR-Hl，其包含氨基酸序列SEQID NO:l，(b)HVR-H2，其包含氨基酸序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：M丹尼斯，L德斯诺耶尔斯，D弗伦奇，
申请(专利权)人：基因泰克公司，
类型：
国别省市：