一种可用于抑制癌细胞的荧光纳米颗粒的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种新型荧光纳米颗粒的制备方法。本发明专利技术在水溶液中利用阳离子聚酯(PIOT)和阴离子透明质酸(HA)的相互作用合成一种新型的荧光纳米颗粒(PIOT-HA)，能够在保持共轭高分子的荧光性能的同时，消除潜在的毒性和致癌性隐患。在白光照射下，PIOT-HA纳米颗粒能够激活氧气产生活性氧自由基(ROS)，这种自由基能够使CD44蛋白质失活，有效地抑制MDA-MB-231癌细胞的转移，在癌症治疗中具备较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
—种可用于抑制癌细胞的荧光纳米颗粒的制备方法
本专利技术涉及一种荧光纳米颗粒的方法，尤其涉及一种可用于抑制癌细胞的新型荧光纳米颗粒的制备方法。
技术介绍
细胞入侵，组织内细胞的转移，在组织的修复、发展和免疫监控中起非常重要的作用。然而，在癌细胞中细胞的转移通常会变得失去控制，从而导致组织、血管和淋巴血管内的恶性细胞入侵，这将最终导致癌从它产生的地方向其它器官的扩散和转移。因此，90%的与癌相关的死亡都是归因于癌细胞的扩散和转移。很多分子靶向医疗技术能够抑制癌细胞的入侵和转移，但是，无效的药物传递和癌细胞的阻力是治疗癌细胞入侵和转移的主要障碍。发色团辅助光照失活技术由于其精确的空间和时间控制的优势已经成为一种用于特殊蛋白质失活的技术。荧光团标记的抗体能够特定地结合目标靶向蛋白质，在光照射下，荧光团产生的活性氧(ROS)能够使相邻的蛋白质失活。一般来说，有机染料和荧光蛋白质会用作荧光团来产生活性氧(ROS)，相对于传统的荧光有机染料和荧光蛋白质，共轭高分子具有更好的光稳定性、高的吸收系数和更好的活性氧产生效率，具有更大的吸引力。然而，共轭聚合物含有不能降解的芳基骨架，在活体中使用时有潜在的毒性和致癌性。
技术实现思路
本专利技术涉及一种新型荧光纳米颗粒的制备方法，具体制备方法如下:(I)阳离子聚酯 PI·OT 的合成:IOmLPIOT 聚合物(40mg，0.063mmol)的 N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液加入到2mLN-甲基咪唑中，得到的溶液40~80°C搅拌24~36h，溶液中过量的N-甲基咪唑在真空干燥下去除，得到的初始样品溶解到500~1000ii L甲醇中；溶液再慢慢注射到70~IOOmL 二氯甲烷中，沉淀用离心的方法分离出来，离心分离三次，得到的样品再用截留分子量SOOODa的膜渗析三天得到粉末状产物。(2) PIOT-HA 纳米颗粒的制备:4mLP10T 的水溶液(350X l(T6mol / L)和 400 y L 透明质酸(HA)水溶液(10 X 10_3mOl / L)混合然后避光搅拌36~48h，PIOT-HA纳米颗粒用离心收集(离心速度15000~23000rpm，离心时间20~35min)，浮在上层的液体小心地去除，得到的沉淀物再次分散到3~4mL 二次去离子水中。本专利技术中合成了一种新型的水溶性荧光聚酯(PIOT)。阳离子PIOT可以通过静电作用结合透明质酸(HA)形成纳米颗粒，PIOT-HA纳米颗粒在碱性条件或透明质酸酶的处理下会降解，展示了很好的生物安全性和在活体内外的潜在的应用性。PIOT-HA纳米颗粒表面的HA和MDA-MB-231癌细胞表达的⑶44蛋白质可以发生相互作用，从而赋予PIOT-HA纳米颗粒对癌细胞的特殊的结合性，在白光的照射下，PIOT-HA纳米颗粒能够刺激氧气产生活性氧(ROS)，ROS能够使附近的⑶44蛋白质失活，从而抑制MDA-MB-231癌细胞的入侵。本专利技术表明PIOT-HA纳米颗粒可以用作识别、成像和癌细胞转移抑制剂的多功能材料，并且能够在保持共轭高分子的荧光性能的同时，消除潜在的毒性和致癌性隐患。【具体实施方式】为了加深对本专利技术的理解，下面结合具体实例对本专利技术作进一步详述。(I)阳离子聚酯 PIOT 的合成:1OmLPIOT 聚合物(40mg，0.063mmol)的 N, N- 二甲基甲酰胺(DMF)溶液加入到2mLN-甲基咪唑中，得到的溶液60°C搅拌24h，溶液中过量的N-甲基咪唑在真空干燥下去除，得到的初始样品溶解到700 y L甲醇中；溶液再慢慢注射到60mL 二氯甲烷中，沉淀用离心的方法分离出来，离心分离三次，得到的样品再用截留分子量8000Da的膜渗析三天得到粉末状产物。(2) PIOT-HA 纳米颗粒的制备:4mLP10T 的水溶液(350Xl(T6mol / L)和 400 y L 透明质酸(HA)水溶液(10X Krtiol / L)混合然后避光搅拌40h，PIOT-HA纳米颗粒用离心收集(离心速度20000rpm，离心时间25min)，浮在上层的液体小心地去除，得到的沉淀物再次分散到3mL 二次去离子水中。`本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可用于抑制癌细胞的荧光纳米颗粒的制备方法，其步骤如下：(1)阳离子聚酯PIOT的合成：10mLPIOT聚合物(40mg，0.063mmol)的N，N?二甲基甲酰胺(DMF)溶液加入到2mLN?甲基咪唑中，得到的溶液40～80℃搅拌24～36h，溶液中过量的N?甲基咪唑在真空干燥下去除，得到的初始样品溶解到500～1000μL甲醇中，溶液再慢慢注射到70～100mL二氯甲烷中，沉淀用离心的方法分离出来，离心分离三次，得到的样品再用截留分子量8000Da的膜渗析三天得到粉末状产物；(2)PIOT?HA纳米颗粒的制备：4mLPIOT的水溶液(350×10?6mol／L)和400μL透明质酸(HA)水溶液(10×10?3mol／L)混合然后避光搅拌36～48h，PIOT?HA纳米颗粒用离心收集(离心速度15000～23000rpm，离心时间20～35min)，浮在上层的液体小心地去除，得到的沉淀物再次分散到3～4mL二次去离子水中。

【技术特征摘要】
1.一种可用于抑制癌细胞的荧光纳米颗粒的制备方法，其步骤如下: (1)阳离子聚酯PIOT的合成: IOmLPIOT聚合物(40mg，0.063mmol)的N，N_ 二甲基甲酰胺(DMF)溶液加入到2mLN_甲基咪唑中，得到的溶液40~80°C搅拌24~36h，溶液中过量的N-甲基咪唑在真空干燥下去除，得到的初始样品溶解到500~1000ii L甲醇中，溶液再慢慢注射到70~IOOmL 二氯甲烷中，沉淀用离心的方法分离出来，离心分离三次，得到的样品再用截留分子量SOOODa的膜渗析三天得到粉末状产物；(2)PIOT-HA纳米颗粒的制备: 4mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩志超，许杉杉，
申请(专利权)人：无锡中科光远生物材料有限公司，
类型：发明
国别省市：