一种发酵法生产多粘菌素B的方法技术

一种发酵法生产多粘菌素B的方法，包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤，所述培养基中包括有机碳源，无机氮源，有机氮源，磷酸氢二钾以及硫酸铵，关键是：所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%-11%。本发明专利技术的有益效果是，由于多粘菌素B发酵培养基中有机碳源淀粉替换为糊精，有利于菌体利用，使得多粘菌素B发酵单位大幅度提高。本发明专利技术方法发酵合成多粘菌素B的最高发酵单位可达到7000U/mL。

Method for producing polymyxin B by fermentation method

A method for fermentation production of polymyxin B, including polymyxin B producing bacteria inoculated in the culture medium step medium, the medium including organic carbon source, inorganic nitrogen, organic nitrogen, ammonium sulfate and potassium hydrogen phosphate two, the key is: the medium. The concentration of organic carbon source for the control in 7%-11%. The beneficial effect of the invention is that, because the organic carbon source in the polymyxin B fermentation medium is replaced by dextrin, the starch is beneficial to the utilization of bacteria, and the fermentation unit of polymyxin B is greatly improved. The fermentation process for synthesizing polymyxin B by the method of the invention can reach the maximum fermentation unit 7000U/mL.

【技术实现步骤摘要】
一种发酵法生产多粘菌素B的方法
本专利技术属于微生物发酵
，涉及到一种发酵法生产多粘菌素B的方法，特别是可以提高发酵单位的生产多粘菌素B的方法。
技术介绍
多粘菌素B是由多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)产生的，由氨基酸和脂肪组织组成的碱性锁环状多肽类抗生素。对革兰阴性杆菌，如大肠杆菌、绿脓杆菌、副大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌、嗜酸杆菌、百日咳杆菌及痢疾杆菌等有抑制或杀菌作用，作为饲料添加剂，可刺激幼畜生长，提高饲料利用率，具有高效、低毒、低残留等特点，可预防大肠杆菌和沙门氏杆菌引发的疾病，已获得许多国家批准该药作为饲料添加剂使用。目前多粘菌素B主要生产方式为生物发酵法，国内仅有几家投产，产量较低，文献硫酸多粘菌素B菌种选育与发酵工艺的研究报道中有机碳源为淀粉，发酵单位较低，文献报道最高发酵单位为6500U/mL。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了提高多粘芽孢杆菌发酵生产多粘菌素B的产量，设计了一种发酵法生产多粘菌素B的方法。本专利技术 采用的技术方案是，一种发酵法生产多粘菌素B的方法，包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤，所述培养基中包括有机碳源，无机氮源，有机氮源，磷酸氢二钾以及硫酸铵，关键是:所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%-11%。所述的有机碳源浓度控制在8%-10%。所述的有机碳源浓度控制在8.5%-9.5%。所述的有机碳源浓度控制在9%。所述的有机碳源为糊精、麦芽糖、淀粉、乳糖、甘油、葡萄糖中的一种。所述的有机氮源的浓度控制在1%_4%。所述的有机氮源的浓度控制在3%。所述的有机氮源为黄豆粉、酵母浸粉、酵母膏、牛肉粉中的一种。所述的磷酸氢二钾在培养基中浓度为0.001%-0.005%。所述的硫酸铵在培养基中的浓度为0.1%-0.5%。本专利技术的有益效果是，由于多粘菌素B发酵培养基中有机碳源淀粉替换为糊精，有利于菌体利用，使得多粘菌素B发酵单位大幅度提高。本专利技术方法发酵合成多粘菌素B的最高发酵单位可达到7000U/mL，甚至能够达到7500。【具体实施方式】一种发酵法生产多粘菌素B的方法，包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤，所述培养基中包括有机碳源，无机氮源，有机氮源，磷酸氢二钾以及硫酸铵，关键是:所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%-11%。所述的有机碳源浓度控制在8%_10%。所述的有机碳源浓度控制在8.5%-9.5%。所述的有机碳源浓度控制在9%。所述的有机碳源为糊精、麦芽糖、淀粉、乳糖、甘油、葡萄糖中的一种。所述的有机氮源的浓度控制在1%_4%。所述的有机氮源的浓度 控制在3%。所述的有机氮源为黄豆粉、酵母浸粉、酵母膏、牛肉粉中的一种。所述的磷酸氢二钾在培养基中浓度为0.001%-0.005%。优选0.002%-0.004%。所述的硫酸铵在培养基中的浓度为0.1%-0.5%。优选0.3%。本专利技术在具体实施时，培养基的配方组分按下列实施例进行配比:实施例1:按照下述配方配置培养基，其中a配方为本专利技术的培养基，配方b为对比文献的配方:配方a:糊精90g，黄豆粉30g，硫酸铵3g，磷酸氢二钾0.03g,碳酸钙4g，饮用水定容至1L。配方b:可溶性淀粉33.3g,葡萄糖15g,玉米衆31.8mL,硫酸铵8.1g,氯化钠0.6g,磷酸氢二钾0.8g,硫酸镁0.2g,碳酸|丐IOg,饮用水定容至1L。配方a和配方b均接入多粘菌素产生菌Paenibacillus polymyxa的种子培养物，接种量2%，温度30°C，培养40h放瓶，结果，配方a得到7500U/mL的多粘菌素B，后者得到2340U/mL的多粘菌素B。说明本专利技术的配方a的效果十分显著。实施例2:配方a中的糊精90g换成糊精70g，结果得到6500U/mL多粘菌素B。实施例3配方a中的糊精90g换成糊精110g，结果得到6800U/mL多粘菌素B。实施例4配方a中的糊精90g换成糊精80g，结果得到7020U/mL多粘菌素B。实施例5配方a中的糊精90g换成糊精100g，结果得到6840U/mL多粘菌素B。实施例6配方a中的糊精90g换成糊精85g，结果得到7200U/mL多粘菌素B。实施例7配方a中的糊精90g换成糊精95g，结果得到6900U/mL多粘菌素B。实施例8配方a中的糊精90g换成淀粉90g，结果得到6000U/mL多粘菌素B。实施例9配方a中的糊精90g换成甘油90g，结果得到5200U/mL多粘菌素B。实施例10配方a中的糊精90g换成麦芽糖90g，结果得到4900U/mL多粘菌素B。实施例11配方a中的黄豆粉30g换成黄豆粉10g，结果得到5320U/mL多粘菌素B。实施例12配方a中的黄豆粉30g换成黄豆粉40g，结果得到3100U/mL多粘菌素B。实施例13配方a中的黄豆粉30g换成酵母浸粉30g，结果得到2300U/mL多粘菌素B。实施例14配方a中的黄豆粉30g换成牛肉粉30g，结果得到2300U/mL多粘菌素B。以上实施例中改变了配方a中的糊精的重量比例，并用淀粉、甘油、麦芽糖分别代替了糊精，以及改变黄豆粉的重量比例、用 酵母浸粉代替黄豆粉，其效果均不如配方a中的效果最佳，因此配方a是本专利技术的最佳实施例。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种发酵法生产多粘菌素B的方法，包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤，所述培养基中包括有机碳源，无机氮源，有机氮源，磷酸氢二钾以及硫酸铵，其特征在于：所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%?11%。

【技术特征摘要】
1.一种发酵法生产多粘菌素B的方法，包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤，所述培养基中包括有机碳源，无机氮源，有机氮源，磷酸氢二钾以及硫酸铵，其特征在于:所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%-11%。2.根据权利要求1所述的一种发酵法生产多粘菌素B的方法，其特征在于:所述的有机碳源浓度控制在8%-10%。3.根据权利要求1所述的一种发酵法生产多粘菌素B的方法，其特征在于:所述的有机碳源浓度控制在8.5%-9.5%。4.根据权利要求1所述的一种发酵法生产多粘菌素B的方法，其特征在于:所述的有机碳源浓度控制在9%。5.根据权利要求1-4中任意一项所述的一种发酵法生产多粘菌素B的方法，其特征在于:所述的有机碳源为...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭耀光，郑万静，闫彩洁，
申请(专利权)人：河北圣雪大成制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：