一种富含花粉蛋白质的提取方法技术

本发明专利技术提供一种富含花粉蛋白质的提取方法，原料为经干燥、过60～100目的蜂花粉，加入花粉重量3～7倍的水及按2000～5000U/g干花粉的量加入碱性蛋白酶，于pH7.0～7.8、52～58°C下水解2～3h，90~100℃下搅拌10~30min，分离的沉淀用其重量3～7倍的水和极性有机溶剂分别提取，分离，合并上清液，即得，利用本发明专利技术所提供的花粉蛋白质的提取方法，可以得到蛋白质含量≥74%的提取物且本发明专利技术提取具有良好的抗氧化效果。

Method for extracting pollen rich protein

The invention provides a method for extraction of protein rich pollen, raw materials for drying, 60 ~ 100 to bee pollen, pollen adding weight is 3 ~ 7 times of water and by 2000 ~ 5000U/g dry pollen quantity of alkaline protease, hydrolysis in pH7.0 ~ 7.8, 52 ~ 58 ~ C and 2 ~ 3H, 90~100 C under stirring 10~30min, separation of the precipitation by weight of 3 to 7 times of water and polar organic solvents were extracted, separated with supernatant, namely, using pollen protein extraction method provided by the invention can be extract protein content more than 74% and the extract has good antioxidant effect.

【技术实现步骤摘要】
【
】本专利技术涉及一种蜂产品的制备方法，具体讲涉及一种花粉蛋白质的提取方法。【
技术介绍
】蜂花粉是蜜蜂从植物花朵上采集花粉的过程中加入一些花蜜和唾液，以使花粉黏集成团，即形成花粉团。蜂花粉是自然界抚育人类的优质营养源，它含有200余种营养成分，包含了自然界全部营养素，是最完美的营养保健食品之一。蜂花粉含有多种营养成分，一般蜂花粉中含水分30-40%、蛋白质If 35%、总糖含量20~39% (其中葡萄糖14.4%、果糖19.4%)、脂质20%，还含有多种维生素和生长因子。其中花粉蛋白质中的必需氨基酸精氨酸(4.6~6.0)、缬氨酸(5.8~11.2)、组氨酸(2.5~3.2)、异亮氨酸(5.1~7.0)、亮氨酸(7.1~9.0)、赖氨酸(6.3~7.7)、蛋氨酸(1.7~2.4)、苏氨酸(4.1~5.3)、色氨酸(1.2~1.6)、苯丙氨酸(4.1~5.9)，各氨基酸的含量分布与FDA-WHO所推荐的优质食品中氨基酸模式非常接近。蜂花粉含有特别的肽和蛋白质，具有许多功能性蛋 白，这些因子是中药的营养和保健因子。近100种酶和辅酶对人体生理机能具有特殊功能。相关研究表明，蛋白质是花粉的主要成分之一，其不仅存在于花粉的表面，还大量存在于花粉胞液内。然而，天然花粉具有坚韧的细胞壁，其结构中的孢粉素具有耐酸、耐碱、耐温、耐压以及对胃酸和其他消化系统酶非常稳定的理化特性，阻碍了人体对花粉蛋白质的吸收利用。对花粉进行破壁，是提高其蛋白质提取利用的有效手段。目前，通用的破壁花粉的方法有仿蜂粮发酵法，有机溶剂提取法，酸碱破壁法和酶法破壁法。专利号为200710097715.3，专利技术名称为一种富含花粉活性肽的抗氧化酶解物中公开了以油菜蜂花粉为原料，将蜂花粉破壁、脱脂后，加8~25倍量去离子水，调整pH值为6~10，加热到30~60°C，加入蛋白酶进行酶解反应，温度控制在20~80°C，保温搅拌30~180min，在酶解反应进行到蛋白含量较少时，迅速加热升温到80°C以上，保温搅拌10~30min，终止酶解反应，然后迅速降至室温，进行固液分离，得到清液，用截留相对分子量>10000D的超滤膜进行分离，取滤过液用截留相对分子量〈400D的超滤膜或纳滤膜进行分离，取滤余液干燥。该方法虽然使用酶进行水解破壁，但由于未对花粉蛋白的破壁和提取进行专门的研究，且只研究了固定大小范围内的多肽片段的活性，因而花粉蛋白的提取不完全，提取得率低。其他现有技术也存在同样的技术问题。因此，如何提高花粉蛋白的提取得率并控制提取成本是目前花粉高效利用的重要方面。【
技术实现思路
】为了解决蜂花粉直接服用具有难消化及相关产品蛋白质含量少、工艺复杂等的问题，本专利技术提供了一种花粉蛋白质的提取方法，使花粉蛋白质的提取得率更高，且生产成本有所降低。本专利技术利用蛋白酶水解花粉蛋白可以破壁花粉并增加花粉蛋白的溶解性，从而使胞内外的花粉蛋白都释放并溶解在适当的溶剂中。所述方法包括将花粉粉碎过筛后，加入水及蛋白酶进行酶解，分离得到上清液和沉淀，用水或极性有机溶剂进一步溶解沉淀后分离得上清液，合并上清液即得，使得花粉蛋白质提取率在74%以上。为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案:，包括:(1)原料为经干燥、过60~100目的蜂花粉，加入花粉重量3~7倍的水及按2000~5000U/g干花粉的量加入碱性蛋白酶，于pH7.0~7.8、52~58° C下水解2~3h，9(Tl00°C下搅拌 10~30min ；(2)分离的沉淀用其重量3~7倍的水和极性有机溶剂分别提取，分离，合并上清液。本专利技术的，其中，(I)中花粉过60目筛，加水量为花粉重量的7倍，pH值为7.8。本专利技术的，其中，碱性蛋白酶的添加量为3500U/g干花粉，于58°C下水解3h。本专利技术的，其中，(I)中花粉过80目筛，加水量为花粉重量的6.5倍，pH值为7.6，55°C下水解2.5h，在90°C下搅拌20min。本专利技术的，其中，沉淀用水提取I~2次，极性有机溶剂提取的次数为O~2次，总提取次数为I~4次。本专利技术的，其中，极性有机溶剂包括乙醇。本专利技术的，其中，极性有机溶剂为乙醇，加入量为沉淀重量的5倍，提取2次。本专利技术的制得的产品，其中，产品的花粉蛋白质提取率在74%以上。该产品是富含花粉蛋白质(肽段)，还含有花粉黄酮等生物活性物质。本专利技术参考GB/T5009.5-2010中华人民共和国国家标准-食品安全国家标准-食品中蛋白质的测定，采用凯氏定氮法测定的蛋白质含量。结果:本专利技术的提取花粉蛋白，蛋白质提取率在74%以上，而普通水提物(未经酶解)的蛋白质提取率仅为28%左右，酸热法破壁(蒸汽爆破法)蛋白质提取率仅为58%，本专利技术大幅度提闻了花粉蛋白质的提取得率。本专利技术采用的工艺具有:I)花粉蛋白质的提取得率高，无论酶解后用水提取及醇提取，蛋白质的提取溶出率高，提取得率> 74% ；2)酶解成小分子肽段后，是活性肽和营养成分更易溶解，且易于被人体吸收，避免了过敏反应；3)工艺简单，适应大规模生产需要；4)生产过程容易控制，不确定因素少；5)加水量少，干燥及后期制成加工品是干燥耗能少，酶解温度高，破壁时间短且乙醇可以再回收利用，生产成本降低；6)本专利技术的提取物抗氧化作用好。【【具体实施方式】】实施例花粉的酶解将干燥，水分含量为10%的茶花粉的进行酶解，见表1。表1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富含花粉蛋白质的提取方法，所述方法包括以蜂花粉为原料，加水后调整pH、酶解、分离，其特征在于：（1）所述原料为经干燥、过60～100目的蜂花粉，加入花粉重量3～7倍的水及按2000～5000U/g干花粉的量加入碱性蛋白酶，于pH7.0～7.8、52～58°C下水解2～3h，90~100℃下搅拌10~30min；（2）分离的沉淀用其重量3～7倍的水和极性有机溶剂分别提取，分离，合并上清液。

【技术特征摘要】
2012.07.13 CN 201210243383.61.一种富含花粉蛋白质的提取方法，所述方法包括以蜂花粉为原料，加水后调整pH、酶解、分离，其特征在于: (O所述原料为经干燥、过60~100目的蜂花粉，加入花粉重量3~7倍的水及按2000~5000U/g干花粉的量加入碱性蛋白酶，于pH7.0~7.8、52~58° C下水解2~3h，9(Tl00°C下搅拌 10~30min ； (2)分离的沉淀用其重量3~7倍的水和极性有机溶剂分别提取，分离，合并上清液。2.如权利要求1所述富含花粉蛋白质的提取方法，其特征在于:所述(I)中花粉过60目筛，加水量为花粉重量的7倍，pH值为7.8。3.如权利要求1所述富含花粉蛋白质的提取方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘进祖，吴忠高，刘进，吕传军，
申请(专利权)人：北京市蜂业公司，
类型：发明
国别省市：