一种构建降解组测序文库的方法技术

本发明专利技术公开了一种构建降解组测序文库的方法包括miRNA靶基因mRNA片段的分选、miRNA靶基因mRNA片段5’端的接头连接、miRNA靶基因cDNA的扩增步骤。本发明专利技术技术方案操作简单能准确找到动植物miRNA作用于靶基因的具体位点，摆脱了生物信息学预测的限制，真正从实验中找到了miRNA的作用靶基因，具有高效、快捷、直观、准确的特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种构建降解组测序文库的方法,其特征在于，包括以下步骤：1）.miRNA靶基因mRNA片段的分选：将3’接头（3’Adapter序列：5’?TGGAA?TTCTC?GGGTG?CCAAG?G?3’）与靶基因mRNA片段的3’端退火互补，其反应条件是：将上述连接混合物于65℃保温3分钟，获得含有3’接头—mRNA连接产物的连接混合物；2）.将步骤1所获的连接混合物中的3’接头—mRNA连接产物连上5’接头（5’Adapter序列：5’?GUUCA?GAGUU?CUACA?GUCCG?ACGAU?C?3’），反转录获得两端均带有接头的靶基因mRNA片段，其步骤是：a）.mRNA的5’接头连接:将上...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郎秋蕾，高晓莲，周小川，高威，林彬，金纯枝，梁洪，
申请(专利权)人：杭州联川生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：