一种可再生的生物素结合蛋白芯片及其制备方法技术

技术编号:8678315 阅读:293 留言:0更新日期:2013-05-08 22:47
本发明专利技术公开了一种可再生的生物素结合蛋白芯片及其制备方法,特征是取双链DNA,其中一条单链DNA的末端带有活性基团,另一条单链DNA为与生物素结合蛋白相连的互补链,将末端带有活性基团的单链DNA与具有纯金膜表面的固相载体或与表面带有活性基团的固相载体进行反应,形成物理吸附或共价连接,从而将单链DNA固定于固相载体表面;再通过单链DNA与互补链的碱基配对,将与互补链相连的生物素结合蛋白固定到固相载体表面,从而得到可再生的生物素结合蛋白芯片。该芯片比现有利用离子配对所固定的生物素结合蛋白的稳定性更好,且再生制备操作更简易,能够实现与现有商品化生物素结合蛋白芯片产品相同的功能;且适用于各种固相载体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白芯片及其制备方法
,具体涉及可再生的生物素结合蛋白芯片及其制备方法
技术介绍
据《现代预防医学》(2001,28.4:485-486)介绍,具有亲和分子层表面的载体介质,如亲和树脂、生物膜和生物芯片等,因其可以特异结合带特定结构的蛋白、多肽、DNA序列等,已被广泛应用于蛋白质组学、细胞生物学、微生物学等领域,成为生物学的重要分析方法和手段之一。在众多的亲和分子层中,具有生物素结合蛋白结构的亲和芯片是较为常用的一种,它能特异性地结合带有生物素标签的蛋白、多肽、DNA、RNA等。但现有商品化的生物素结合蛋白芯片产品都是一次性使用的,因为其生物素结合蛋白分子层是通过共价键结合的方式固定到载体介质上的,如要进行再生处理,必须采用强氧化剂(如浓硫酸、硝酸、高氯酸、双氧水等)将载体介质表面的所有基质和生物素结合蛋白分子层进行彻底的消解,然后再重新构建表面基质和生物素结合蛋白分子层,这样的再生方法操作复杂,费时费力,成本也高,且需用到强氧化剂和有机溶剂会造成环境污染,因此现有商品化的生物素结合蛋白芯片产品一般都是不做再生处理的。中国专利申请号200910144805.2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可再生生物素结合蛋白芯片的制备方法,通过可再生的DNA配对方式固定事先经过修饰的生物素结合蛋白分子;其特征在于:取一种双链DNA,其中的一条单链DNA的末端带有活性基团,另一条单链DNA为与生物素结合蛋白相连的互补链;首先将末端带有活性基团的单链DNA,与具有纯金膜表面的固相载体,或与表面带有活性基团的固相载体进行反应,形成物理吸附或共价连接,从而将该单链DNA固定于固相载体表面;再通过该单链DNA与互补链的碱基配对,将与互补链相连的生物素结合蛋白固定到固相载体表面,从而得到可再生的生物素结合蛋白芯片。

【技术特征摘要】
1.一种可再生生物素结合蛋白芯片的制备方法,通过可再生的DNA配对方式固定事先经过修饰的生物素结合蛋白分子;其特征在于: 取一种双链DNA,其中的一条单链DNA的末端带有活性基团,另一条单链DNA为与生物素结合蛋白相连的互补链; 首先将末端带有活性基团的单链DNA,与具有纯金膜表面的固相载体,或与表面带有活性基团的固相载体进行反应,形成物理吸附或共价连接,从而将该单链DNA固定于固相载体表面; 再通过该单链DNA与互补链的碱基配对,将与互补链相连的生物素结合蛋白固定到固相载体表面,从而得到可再生的生物素结合蛋白芯片。2.按权利要求1所述可再生生物素结合蛋白芯片的制备方法,特征在于所述生物素结合蛋白选自卵白素、链霉亲和素或中性亲和素。3.按权利要求1所述可再生生物素结合蛋白芯片的制备方法,特征在于所述活性基团选自巯基(-SH)、氨基(-NH2)、羧基(...

【专利技术属性】
技术研发人员:欧惠超罗昭锋周宏敏罗炎
申请(专利权)人:中国科学技术大学
类型:发明
国别省市:

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