一种高效液相色谱法测定丙戊酸体液浓度过程中的衍生化方法技术

本发明专利技术涉及一种高效液相色谱法测定丙戊酸体液浓度过程中的衍生化方法，该方法选用氢氧化季铵盐乙腈溶液（四甲基氢氧化铵乙腈溶液或四丁基氢氧化铵乙腈溶液或四乙基氢氧化铵乙腈溶液）代替三乙胺催化丙戊酸与衍生剂（2，4′-二溴苯乙酮乙腈溶液、α-溴苯乙酮乙腈溶液、2-溴-对硝基苯乙酮乙腈溶液或4-溴-7-甲氧基香豆素乙腈溶液）衍生化成为可紫外检测的苯酯，只需要反应物摩尔倍数3-5倍量的衍生剂，即可达到95%以上的衍生化产率。具有的优点为：衍生化反应完全，色谱图基线平稳，无内源性杂质干扰，测定结果准确，精密度好，灵敏度高，衍生化剂用量少，不易使色谱柱压力增大，有利于延长色谱柱使用寿命。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
丙戊酸是一种最常用的广谱抗癫痫药，其治疗浓度范围窄，个体差异大，治疗过程中须监测血药浓度，通过个体化用药，提高癫痫病控制率、减少不良反应。监测丙戊酸血药浓 度常常使用HPLC法(高效液相色谱法)，而用HPLC法常需把丙戊酸衍生化成具有紫外吸收或能发荧光的酯类。常用的衍生化方法是使用三乙胺作催化剂，催化丙戊酸与0-溴苯乙酮、2，4' - 二溴苯乙酮、2-溴-对硝基苯乙酮或4-溴-7-甲氧基香豆素等进行衍生化反应，为了提高衍生化效率，常常需要加入过量的衍生化剂，但长期使用过量的衍生化剂(> 400 yg)易使色谱柱压力过大，柱效下降，缩短色谱柱寿命。例如下述2篇文献均是采用三乙胺作催化剂，催化丙戊酸与衍生剂进行衍生化反应。1、冯惠平，王璟，陈宜峰等的“柱前衍生-高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠浓度”。色谱条件:AgilentHC-C18 色谱柱(5 μ m, 4.6X 250mm),流动相:甲醇-水(73:27);流速:lmL/min，柱温:40°C ;紫外检测波长:262nm ;进样量为20 μ L0样品处理方法:精密量取血清样品0.lmL，置具塞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效液相色谱法测定丙戊酸体液浓度过程中的衍生化方法，其特征在于：包括以下步骤：精密取50?100μL质控或病人血清，加入0.1?0.2μg/μL内标溶液40?80μL，再加入2?3mol/L硫酸溶液50?70μL，混匀，加入2?4mL乙醚涡旋提取1?3min，在3000?4000?r/min条件下离心分离5?10min，吸取上清液，加入10mmol/L催化剂氢氧化季铵盐乙腈溶液30?110μL，涡旋混匀，再加入反应物摩尔倍数3?7倍的衍生剂，根据需要加入适量的乙腈，使反应溶液中乙腈的总体积达到140?160μL，涡旋混匀，在50?60℃水浴反应20?40分钟，提高水浴温度至65?70℃挥干...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛桂福，
申请(专利权)人：柳州市妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：