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树状多节孢内生真菌HDFS4-26生物发酵合成紫杉醇及其前体物的分离与纯化方法技术

技术编号:8903549 阅读:213 留言:0更新日期:2013-07-11 00:39
树状多节孢内生真菌HDFS4-26生物发酵合成紫杉醇及其前体物的分离与纯化方法,它涉及分离与纯化的方法。它为了现有内生真菌生物发酵合成紫杉醇的方法存在发酵液中紫杉醇含量低,紫杉醇前体物回收率低和纯度低的问题。方法:一、菌株活化及种子培养;二、发酵培养;三、分离发酵液和菌丝体并回收,发酵液脱色,萃取,浓缩,得样品;四、一次层析;五、二次层析;六、反相色谱分离,即完成。本发明专利技术发酵液中紫杉醇含量为556.80μg/L,紫杉醇纯度为98%,前体物巴卡亭Ⅲ纯度为97%、三尖杉宁碱纯度为98%;本发明专利技术工艺具有操作流程简单、产物纯度高、溶剂使用量小的特点;同时,间接的降低了紫杉醇的生产成本。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
树状多节孢内生真菌HDFS4?26生物发酵合成紫杉醇及其前体物的分离与纯化方法,其特征在于它按以下步骤实现:一、菌株活化及种子培养:将树状多节孢HDFS4?26接种于PDA斜面培养基上,在28℃的条件下活化2~3d,然后将活化后的树状多节孢HDFS4?26接于PDA液体培养基中,在28℃、120r/min摇床培养3d,获得种子培养液;二、发酵培养:将种子培养液以体积比5%的接种量转入改良的S?7液体培养基中,在28℃、120r/min发酵培养12d,其中在发酵培养的第4d补加4g/L的蔗糖和3mL/L的维生素浓缩液,在发酵培养的第6d补加0.4g/L的蛋白胨和0.2mL/L的豆饼水解液,在发酵...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵凯
申请(专利权)人:黑龙江大学
类型:发明
国别省市:

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