本发明专利技术涉及6-氨基青霉烷酸降解细菌及其筛选方法。具体而言，本发明专利技术涉及一株6-氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella?sp.L2，其于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC?No.6691，其16S?rRNA基因序列GenBank注册号为HQ840720。其为需氧短杆菌，在pH值为8.0时，其对6-氨基青霉烷酸（6-APA）的降解率约为28%。该菌株降解6-APA能力较强，对含6-APA头孢菌素产生废水的处理具有现实意义和重要的工程应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及降解6-氨基青霉烷酸的细菌及其筛选方法。
技术介绍
抗生素废水是一类含有难降解物质和生物毒性物质的高浓度有机废水。近年来由于制药工业的飞速发展，特别是抗生素的出现给中国甚至世界的水资源带来了严重的污染。对抗生素废水进行合理有效的治理已经迫在眉睫，这是关系到社会的发展以及人类未来的问题。抗生素废水的成分十分复杂，含有多种难降解的有机物和无机物，一般处理起来很困难，例如对于抗生素一般使用细菌对其降解，但其中所含的残留物质洁霉素对革兰氏阳性菌和厌氧菌具有很强的抗性，由于诸如此类的特性，废水处理起来十分困难。目前抗生素废水处理方法主要有化学处理法、物化处理法(包括包埋法、混凝-沉淀法、光降解法、反渗透和膜分离技术、吸附法、电解法)、生物处理法以及多种组合法。其中生物处理法有处理条件温和、费用低、微生物适应性强、易培养和可强化等优点，故已广泛应用于抗生素废水的处理。 在发酵及化学合成制药废水中，氨基青霉烷酸(6-APA)和阿莫西林是最常见的特征污染物。6 -APA作为制备具有重要商业价值的氨苄西林和阿莫西林的起始材料，可以通过青霉素V或青霉素G的酶水解来获得，同时产生苯氧乙酸副产品。阿莫西林是一种广谱β -内酰胺类抗生素，属于青霉素类有机物，用作兽药，治疗细菌感染的过程中遇到的肠道和全身感染。但化学法生产6-ΑΡΑ和阿莫西林造成严重的环境污染，需要使用诸如吡啶、五氯化二磷和亚硝酰氯等危险化学品。这些6-ΑΡΑ和阿莫西林制药废水主要来自设备的清洁、洗涤废水，锅炉吹下和地板清洗废水。由于制定了严格的制药工业废水污染物排放标准(从以前COD ( 300mgL-l减少到COD ( 120mgL_l)，所以，采取适当的技术处理含6-APA和阿莫西林制药废水已成为当务之急。生物处理法有处理条件温和、费用低、微生物适应性强、易培养和可强化等优点，故已广泛应用于抗生素废水的处理。而生物法最核心的也就是能够降解特征污染物的细菌。所以，获得高效降解6-APA的细菌是处理含6-APA废水的关键之一。但目前，国内外均没有相关的报道。
技术实现思路
因此，本专利技术的技术目的在于筛选能够高效降解6-APA的细菌。因此，本专利技术的第一方面涉及一株6-氨基青霉烧酸降解细菌Bordetella sp.L2,其于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为 CGMCC N0.6691。优选地，所述6-氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella sp.L2的16S rRNA基因序列GenBank 注册号为 HQ840720。本专利技术的第二方面涉及上述的6-氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella sp.L2的筛选方法，其包括步骤:先将采取的来自抗生素工厂排污沟的样品放入到富集培养基中培养，然后再转入到分离培养基中进行选择培养，之后经多代平板稀释法进行分离、纯化，最终获得纯培养菌株，利用标准的菌种鉴定手段鉴定所述纯培养菌株，其中所述富集培养基的成分为:葡萄糖 20g、蛋白胨 4g、酵母粉 lg、牛肉膏 2g、NaC14g、K2HPO4L 5g、MgCl2.6H200.lg、FeSO4.7H200.lg、维生素液10ml、微量元素液10ml,最后定溶于IL ;所述分离培养基的成分为:葡萄糖 10g、6-APA5g、NaC14g、K2HPO4L 5g、MgCl2.6Η200.lg、FeSO4.7Η200.lg、维生素液10ml、微量元素液10ml，最后定溶于IL ;其中维生素液的成分为钴胺素0.0lg、抗坏血酸0.025g、核黄素0.025g、柠檬酸0.02g、吡多醛0.05g、叶酸0.0lg、对氨基苯甲酸0.0lg、肌酸 0.025g,微量元素液的成分为 MnSO4.7H200.0lg、ZnSO4.7Η200.05g、H3BO30.0lg、N(CH2COOH) 34.5g、CaCl2.2H200.0lg、Na2MoO40.0lg、CoCl2.6H200.2g、AlK (SO4) 20.0lg。本专利技术的第三方面涉及含有上述的6-氨基青霉烧酸降解细菌Bordetella sp.L2的组合物。优选地，所述组合物能降解青霉素类、头孢类抗生素生产废水中的6-APA。本专利技术的第四方面涉及上述的6-氨基青霉烧酸降解细菌Bordetella sp.L2在处理含6-APA头孢菌素的污染物中的用途。优选地，所述污染物为污水。本专利技术的第五方面涉及上述的组合物在处理含6-APA头孢菌素的污染物中的用途。优选地，所述污染物为污水。换言之，本专利技术利用常规的筛选方法从抗生素生产厂家的排污沟里筛选出一株6-氨基青霉烧酸降解细菌博代氏〔杆〕菌Bordetella sp.L2。本专利技术的博代氏〔杆〕菌Bordetella sp.L2已于2012年10月18日在位于北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏编号为CGMCCN0.6691，其建议的分类命名为博德特氏菌Bordetella SP.。该菌株的16S rRNA基因序列GenBank注册号为HQ840720。菌株L2为需氧短杆菌，在pH值为8.0时，6-氨基青霉烷酸(6-APA)降解率约为28%。 该菌株降解6-APA能力较强，对含6-APA头孢菌素产生废水的处理具有现实意义和重要的工程应用价值。本领域技术人员公知，在本专利技术所获得的上述6-氨基青霉烷酸降解细菌新种的基础上，本领域技术人员可以对所述细菌进行适当的诱变而继续提高其水解6-氨基青霉烷酸的能力，这样的诱变后的基于本专利技术所述菌种的突变株也落入本专利技术保护的范围。所述诱变包括辐射、化学诱变等。同时，本领域技术人员也可能将本专利技术获得的上述菌株与其他导致污染的常见微生物的降解菌株共同使用，已达到同时消除多种污染抗生素的目的。附图说明图1:菌株 Bordetella sp.L2 的 16S rDNA 序列。图2:菌株Bordetella sp.L2的系统发育树分析。图3:菌株Bordetella sp.L2与其他菌株的16s rRNA基因序列相似性分析。图4:菌株Bordetella sp.L2的透射电镜照片。图5:菌株Bordetella sp.L2菌落的高倍显微镜照片。图6:菌株Bordetella sp.L2在固体培养基上的菌落形态。具体实施例方式下面将通过下述非限制性实施例进一步说明本专利技术，本领域技术人员公知，在不背离本专利技术精神的情况下，可以对本专利技术做出许多修改，这样的修改也落入本专利技术的范围。下述实验方法如无特别说明，均为常规方法，所使用的实验材料如无特别说明，均可容易地从商业公司获取。实施例实施例1降解6-APA的功能菌的分离材料与方法1、培养基①富集培养基:葡萄糖，20g;蛋白胨，4g ;酵母粉，Ig ;牛肉膏，2g ；NaCl,4g ；K2HPO4,1.5g ；MgCl2.6Η20，0.Ig ；Fe S04.7Η20，0.Ig ;维生素液 IOml (钴胺素，0.0lg ;抗坏血酸，0.025g ；核黄素，0.025g ;柠檬酸，0.02g ;吡多醛，0.05g ;叶酸，0.0lg ;对氨基苯甲酸，0.0lg ;肌酸，0.025g);微量元素液(MnS本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株6?氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella?sp.L2，其于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC?No.6691。
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：林海龙，陈先明，关旸，陈兆波，王晓雨，王锐，范阳，
申请(专利权)人：中国长江三峡集团公司，
类型：发明
国别省市：
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