重组Tβ4-BP5融合肽、基因、工程菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了重组Tβ4-BP5融合肽、基因、工程菌及应用。该重组融合肽为胸腺素β4和法氏囊五肽BP5通过柔性Linker融合而成。本发明专利技术将重组Tβ4-BP5融合肽基因插入表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达重组Tβ4-BP5融合肽的基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的重组Tβ4-BP5融合肽，该融合肽经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白，再经亲和层析纯化，可获得单一的重组Tβ4-BP5融合肽。本发明专利技术的重组Tβ4-BP5融合肽可作为配合疫苗使用的新型多肽免疫佐剂，能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种胸腺素β 4与法氏囊五肽ΒΡ5重组融合肽，同时还涉及编码该重组融合肽的基因，表达该融合肽的工程菌及应用，属于生物工程

技术介绍
胸腺是免疫系统中重要的中枢免疫器官，负责细胞的分化和成熟，胸腺素是胸腺分泌的具有生物活性的多种多肽类物质的统称，亦称胸腺肽。胸腺素β4 (Τβ4)是20世纪80年代从胸腺中分离得到、后来发现在许多组织中都广泛存在的一种小肽类物质。胸腺素β4是一种重要的肌动蛋·白结合蛋白，含有43个氨基酸，分子量约5kD，等电点为5.1，其氨基酸序列如下:Ser-Asp-Lys-Pro-Asp-Met-Ala-Glu-1le-Glu-Lys-Phe-Asp-Lys-Ser-Lys-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln-Glu-Lys-Asn-Pro-Leu-Pro-Ser-Lys-Glu-Thr-1le-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-Gly-Glu-Ser胸腺素β 4作为一种小肽类物质，不但在胸腺依赖性淋巴细胞的调节与分化方面具有重要功能，可显著增强胸腺细胞、骨髓细胞末端核苷酰转移酶活性，抑制巨噬细胞游走活性，本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组Tβ4?BP5融合肽，其特征在于，该融合肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:5所示。

【技术特征摘要】
1.重组Tβ 4-ΒΡ5融合肽，其特征在于，该融合肽的氨基酸序列如SEQ ID NO: 5所示。2.一种编码权利要求1所述的重组Τβ 4-ΒΡ5融合肽的基因，其特征在于，该融合肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求2所述的一种编码重组Τβ4-ΒΡ5融合肽的基因，其特征在于，所述融合肽基因由胸腺素β 4基因和法氏囊五肽ΒΡ5基因通过柔性连接肽Linker基因串联而成，并在5’端加有肠激酶识别位点基因序列。4.一种表达权利要求1所述的重组Τβ 4-BP5融合肽的工程菌，其特征在于，该工程菌的构建方法包括以下步骤: 1)重组Tβ 4-ΒΡ5融合肽基因SOE-PCR扩增 根据猪大肠杆菌偏嗜密码子设计重组T β 4-ΒΡ5融合肽基因，并针对该融合肽基因设计引物Fp F2和F3,然后进行SOE-PCR扩增；将PCR扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳鉴定后，切下目的条带进行回收，回收产物中片段大小为159bp的为重组Τβ4-ΒΡ5融合肽基因； 2)携带重组Tβ 4-ΒΡ5融合肽基因的工程菌的构建 将重组Τβ4-ΒΡ5融合肽基因和质粒载体pET32a用EcoR1、XbaI双酶切...

【专利技术属性】
技术研发人员：王臣，张才，冯书营，牛明媚，李振华，郭香玲，李小康，刘一尘，张春杰，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：