重组Tα1-BP5融合肽、基因、工程菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了重组Tα1-BP5融合肽、基因、工程菌及应用。该重组融合肽为胸腺素α1和法氏囊五肽BP5通过柔性Linker融合而成。本发明专利技术将重组Tα1-BP5融合肽基因插入表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达重组Tα1-BP5融合肽的基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的重组Tα1-BP5融合肽，该融合肽经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白，再经亲和层析纯化，可获得单一的重组Tα1-BP5融合肽。本发明专利技术的重组Tα1-BP5融合肽可作为配合疫苗使用的新型多肽免疫佐剂，能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种胸腺素α I与法氏囊五肽ΒΡ5重组融合肽，同时还涉及编码该重组融合肽的基因，表达该融合肽的工程菌及应用，属于生物工程

技术介绍
胸腺是免疫系统中重要的中枢免疫器官，负责细胞的分化和成熟，胸腺组织产生多种激素或因子，其中胸腺素α1 (Ta 1)是一种高度保守的小分子活性肽，富含酸性氨基酸，由28个氨基酸组成，Tal是由胸腺上皮细胞和胸腺内分泌细胞产生，广泛存在于机体的胸腺上皮细胞、外周血、大脑、垂体、精液、滤泡液和羊水中；在某些保护细胞及激活的淋巴细胞上清中也存在着Ta 1 ;在某些肿瘤细胞中存在着相当水平的Ta 1 ;甚至在某些昆虫、蟹、原生动物、真菌和细菌中也出现了类似Ta I的活性物质。除此以外，培养的胸腺上皮细胞、含有ProT a的人外周血细胞以及微孔小室胎胸腺上皮细胞上清中也含有高水平的Ta 1。研究表明，Tal也存在于McF_7细胞的胞浆中和结肠腺细胞的核膜上。Ta I主要作用于胸腺细胞成熟的早期和晚期，诱导T细胞分化成熟，能够增加T细胞在各种抗原或致有丝分裂原激活后产生INF-a (干扰素a )、INF- Y , IL-1 (白细胞介素)、I本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组Tα1?BP5融合肽，其特征在于，该融合肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:5所示。

【技术特征摘要】
1.重组Ta1-BP5融合肽，其特征在于，该融合肽的氨基酸序列如SEQ ID N0:5所示。2.一种编码权利要求1所述的重组Ta 1-BP5融合肽的基因，其特征在于，该融合肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求2所述的一种编码重组Ta 1-BP5融合肽的基因，其特征在于，所述融合肽基因由胸腺素a I基因和法氏囊五肽BP5基因通过柔性连接肽Linker基因串联而成，并在5’端加有肠激酶识别位点基因序列。4.一种表达权利要求1所述的重组Ta 1-BP5融合肽的工程菌，其特征在于，该工程菌的构建方法包括以下步骤: 1)重组Ta 1-BP5融合肽基因SOE-PCR扩增 根据猪大肠杆菌偏嗜密码子设计重组Ta 1-BP5融合肽基因，并针对该融合肽基因设计引物Fp F2和F3,然后进行SOE-PCR扩增；将PCR扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳鉴定后，切下目的条带进行回收，回收产物中片段大小为114bp的为重组T a 1-BP5融合肽基因； 2)携带重组Ta 1-BP5融合肽基因的工程菌的构建 将重组T a 1-BP5融合肽基因和质粒载体pET32a...

【专利技术属性】
技术研发人员：王臣，冯书营，赵战勤，牛明媚，郭香玲，李振华，李小康，刘一尘，张春杰，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：