单细胞分离器的应用方法技术

本发明专利技术提供了一种单细胞分离器的应用方法。所述单细胞分离器包括探针板和细胞培养板，所述探针板上设置有探针，所述细胞培养板上设置有与所述探针相对应的收容孔。所述单细胞分离器的应用方法主要包括以下步骤：S1、对探针进行预处理；S2、准备细胞悬浮液；S3、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板的所述收容孔内；S4、将所述探针伸入对应的所述收容孔中；S5、将所述探针移出，以将单细胞从所述细胞悬浮液中分离出来。本发明专利技术单细胞分离器的应用方法不仅简单、易操作，而且对细胞本身无损伤、有利于细胞的后续培养、扩增与检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，属于生物

技术介绍
当前单细胞的研究越来越受到重视，已广泛应用于单细胞的PCR扩增、基因组测序和组织工程研究等领域。现有的单细胞分离技术主要有四种:1、口控毛细管单细胞分离方法:在火焰上轻烤拉伸后的毛细管，与无菌塑料管连接建立口控毛细管进行单细胞分离，但是这种方法对操作人员的技术要求较高；2、荧光流式细胞技术分离法:荧光激活流式细胞分离技术能够有效获得单个细胞，但是对流式细胞仪的性能要求较高，且仪器价格昂贵；3、激光显微切割技术:能够从组织中分离单个细胞，但不适用于细胞的培养与扩增，且需要操作者极其熟练地掌握切割技术；4、显微操控仪:采用显微操控技术从单细胞悬浮液中吸取单细胞，但精细的操作以及贵重的仪器使研究者望而却步；从而以上技术的缺陷使之无法得到推广应用。 有鉴于此，有必要对现有的单细胞分离技术予以改进，以解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种，该简单、易操作，而且对细胞本身无损伤、有利于细胞的后续培养、扩增与检测。为实现上述专利技术目的，本专利技术提供了一种，所述单细胞分离器包括探针板和细胞培养板，所述探针板上设置有探针，所述细胞培养板上设置有与所述探针相对应的收容孔，所述主要包括以下步骤: 51、对探针进行预处理； 52、准备细胞悬浮液； 53、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板的所述收容孔内； 54、将所述探针伸入对应的所述收容孔中； 55、将所述探针移出，以将单细胞从所述细胞悬浮液中分离出来。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S2具体为:将单细胞处理成一定浓度的细胞悬浮液。作为本专利技术的进一步改进，所述细胞悬浮液中单细胞的密度范围为IO4-1O6个/ml ο作为本专利技术的进一步改进，所述探针由镀金属材料制成。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤SI具体为:对所述探针进行预处理，以使得所述探针带正电荷。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S5具体为:5-10分钟后将所述探针移出。作为本专利技术的进一步改进，所述探针由可塑性材料制成。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤SI具体为:将配体蛋白或小分子物质包被到所述探针头部，然后用缓冲液洗涤。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S5具体为:将所述探针和所述细胞悬浮液在37 °C或室温下孵育5-30分钟后移出所述探针。本专利技术的有益效果是:本专利技术简单、易操作，只需将探针伸入装有细胞悬浮液的收容孔中，一段时间后即可将单细胞从细胞悬浮液中分离出来，对细胞本身无损伤，且有利于细胞的后续培养、扩增与检测。附图说明图1是本专利技术单细胞分离器中探针板的主视图。图2是图1所示探针板的仰视图。图3是本专利技术单细胞分离器中细胞培养板的俯视图。图4是本专利技术流程图。图5是探针板伸入细胞培养板内的状态图。图6是探针板分离出单细胞时的状态图。图7是单根探针伸入单个收容孔内的状态图。具体实施例方式为了使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细描述。如图1至图3并结合图5与图6所示，本专利技术的单细胞分离器用以从细胞悬浮液中分离出单细胞30。所述单细胞分离器包括探针板10和细胞培养板20。所述探针板10上设置有至少一根长度为5-25毫米的探针11。每根所述探针11的材质均可为镀金属材料或可塑性材料。每根所述探针11上均涂有可分离细胞的涂层40。所述涂层40包括带正电荷的涂层、配体或受体涂层、抗体或抗原涂层、小分子物质涂层。每根所述探针11均包括头部111及与所述头部111相连的身部112，本实施方式中，所述涂层40均匀涂抹在每根所述探针11的头部111，且与单细胞30的大小相近，从而便于分离出单细胞30。所述细胞培养板20上设置有与所述至少一根探针11相对应并用以收容细胞悬浮液的至少一个收容孔21，所述至少一个收容孔21呈规则排布，该规则排布呈平行四边形，而本实施方式中主要呈矩形排布。所述至少一个收容孔21的数量包括1、4、6、8、12、24、96以及384。如图4所示，本专利技术主要包括以下步骤: 51、对探针进行预处理； 52、准备细胞悬浮液； 53、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板20的所述收容孔21内； 54、将所述探针11伸入对 应的所述收容孔21中； 55、将所述探针11移出，以将单细胞30从所述细胞悬浮液中分离出来。本实施方式中，所述步骤S2具体为:将单细胞30处理成一定浓度的细胞悬浮液，而所述细胞悬浮液中单细胞30的密度范围具体为IO4-1O6个/ml。如图4与图5、图6所示，若所述探针11由镀金属材料制成，则所述步骤SI具体为:在所述探针11的头部111涂上带正电荷的涂层40,以使得所述探针11带正电荷。从而所述步骤S5具体为:5-10分钟后将所述探针11移出，以将单细胞30从所述细胞悬浮液中分离出来。若所述探针11由可塑性材料制成，则所述步骤SI为:将配体蛋白或小分子物质包被到所述探针头部111，然后用缓冲液洗涤。具体来说所述步骤Si为:在所述探针11的头部111涂上配体涂层或小分子物质涂层。从而所述步骤S5具体为:将所述探针11和所述细胞悬浮液在37°c或室温下孵育5-30分钟后移出所述探针11，以将单细胞30从所述细胞悬浮液中分离出来。如图5与图6所示，在选用收容孔21数量为384的细胞培养板20时，对应选用设有384根探针11的探针板10 (为了便于对细胞培养板20的结构进行描述，说明书附图中未将384个收容孔21全部画出)。从而在应用本专利技术的单细胞分离器时，先将细胞悬浮液倒入每个所述收容孔21中，接着将所述探针11对应伸入每个所述收容孔21内，最后每根探针头部111的涂层40便可轻松地将单细胞30分离出来。如图7所示，在选用收容孔21数量为I的细胞培养板20时，对应选用的探针11数量亦为I。从而在应用本专利技术的单细胞分离器时，只需先将细胞悬浮液倒入所述收容孔21中，接着将所述探针11伸入所述收容孔21内，最后所述探针头部111的涂层40便可轻松地将单细胞30分离出来，简单、易操作。本实施方式中的单细胞分离器在获得单个完整的细胞后，还可用于单细胞的PCR扩增。然而，在应用本专利技术的单细胞分离器时，所述涂层40亦可大面积地均匀涂抹在每根探针11的身部112或者每根探针11的头部111及身部112上，从而在将所述探针11对应伸入所述收容孔21 内时，所述探针11上的涂层40便可分离出较多的单细胞30。综上所述，本专利技术的单细胞分离器通过在所述探针板10上设置所述探针11，同时在所述细胞培养板20上设置与所述探针11相对应并用以收容细胞悬浮液的所述收容孔21，从而只需将所述探针11对应伸入所述收容孔21内，即可轻松地将单细胞30从细胞悬浮液中分离出来。本专利技术不仅简单、易操作，而且对操作人员的操作技能要求较宽，可大大减轻研发人员的时间和精力，同时对细胞本身无损伤，还有利于细胞的后续培养、扩增与检测。以上实施例仅用以说明本专利技术的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本专利技术进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种单细胞分离器的应用方法，所述单细胞分离器包括探针板和细胞培养板，所述探针板上设置有探针，所述细胞培养板上设置有与所述探针相对应的收容孔，其特征在于，所述单细胞分离器的应用方法主要包括以下步骤：S1、对探针进行预处理；S2、准备细胞悬浮液；S3、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板的所述收容孔内；S4、将所述探针伸入对应的所述收容孔中；S5、将所述探针移出，以将单细胞从所述细胞悬浮液中分离出来。

【技术特征摘要】
1.一种单细胞分离器的应用方法，所述单细胞分离器包括探针板和细胞培养板，所述探针板上设置有探针，所述细胞培养板上设置有与所述探针相对应的收容孔，其特征在于，所述单细胞分离器的应用方法主要包括以下步骤: 51、对探针进行预处理； 52、准备细胞悬浮液； 53、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板的所述收容孔内； 54、将所述探针伸入对应的所述收容孔中； 55、将所述探针移出，以将单细胞从所述细胞悬浮液中分离出来。2.根据权利要求1所述的单细胞分离器的应用方法，其特征在于:所述步骤S2具体为:将单细胞处理成一定浓度的细胞悬浮液。3.根据权利要求2所述的单细胞分离器的应用方法，其特征在于:所述细胞悬浮液中单细胞的密度范围为IO4-1O6个/ml。4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟华，杨林，张明，
申请(专利权)人：博生吉医药科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：