【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种制备固定化脂肪酶的方法，特别是涉及。
技术介绍
脂肪酶(EC.3.1.1.3)是一类特殊的酰基水解酶，为应用最广泛的酶催化剂之一，除了能够催化甘油酯类化合物的水解之外，还可以用于在非水相中催化酯交换、高聚物合成、多肽合成、立体异构拆分和手性药物的合成等。南极假丝酵母脂肪酶(CandidaAntarctic lipase B，CALB)是一种重要的脂肪酶，在水解和有机合成反应中具有高度的立体选择性，对非水溶性和水溶性物质都有很强的催化活性。近年的研究成果表明，CALB在多种类型的反应中都显示了较其它脂肪酶更为出色的催化性能。脂肪酶价格昂贵，虽然游离酶催化反应技术成熟，但酶不能重复使用，难以实现过程的连续化，工业化成本高而难以推广。固定化脂肪酶，是非水相催化中的常用形式，可以克服游离酶催化的缺点。应用于非水相中的固定化脂肪酶目前多采用吸附法制备，如诺维信公司生产的Novozyme 435 (吸附固定于大孔丙烯酸树脂的CALB),但即使在非水相中仍然存在酶从载体上脱落的问题。共价结合法具有酶与载体结合牢固，可长时间连续重复使用的优点，符合工业化应用的...
【技术保护点】
一种利用两亲性壳聚糖微球载体制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，所述方法包括：a.制备两亲性壳聚糖微球载体：该载体基质为微米级壳聚糖微球，将壳聚糖微球基质C2位苯甲醛化，引入疏水相互作用基团，再用环氧氯丙烷活化C6位羟基，偶联四乙烯五胺，制备兼具疏水作用苯基和亲水性多胺手臂分子的壳聚糖微球，具体制备过程如下：⑴壳聚糖微球基质的制备：将质量分数为5%的壳聚糖溶液与PEG2000充分混合，PEG2000在溶液中的质量百分含量分别为3%，再加入与壳聚糖溶液等体积的液体石蜡及乳化剂span?80，高速搅拌30min使体系成乳液状，然后加入0.12倍壳聚糖溶液体积的甲醛，搅拌1h后将...
【技术特征摘要】
1.一种利用两亲性壳聚糖微球载体制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于，所述方法包括: a.制备两亲性壳聚糖微球载体:该载体基质为微米级壳聚糖微球，将壳聚糖微球基质C2位苯甲醛化，引入疏水相互作用基团，再用环氧氯丙烷活化C6位羟基，偶联四乙烯五胺，制备兼具疏水作用苯基和亲水性多胺手臂分子的壳聚糖微球，具体制备过程如下: ⑴壳聚糖微球基质的制备:将质量分数为5%的壳聚糖溶液与PEG2000充分混合，PEG2000在溶液中的质量百分含量分别为3%，再加入与壳聚糖溶液等体积的液体石蜡及乳化剂span-80，高速搅拌30min使体系成乳液状，然后加入0.12倍壳聚糖溶液体积的甲醛，搅拌Ih后将乳液倒入10 % NaOH/无水乙醇(V(NaOH): V (无水乙醇)=1:1)的混合液中静置lh，用二甲苯、乙醇、去离子水充分洗涤，得到粒径lOOlOOym的壳聚糖微球作为基质； ⑵基质微球的基团修饰:称取壳聚糖微球于甲醇中，滴加苯甲醛，苯甲醛与微球质量比3飞，60°C恒温振荡反应10~l6h，再加入硼氰化钠室温反应12h，抽滤洗涤后将微球浸泡在氢氧化钠水溶液中、缓慢加入环氧氯丙烷，环氧氯丙烷与微球质量比6 12，50°C振荡反应5h，抽滤洗涤后将环 氧化微球置于乙醇中，加入氢氧化钠水溶液和...
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