【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，为猪大肠杆菌-副猪嗜血杆菌二联弱毒苗的研制提供科学依据与物质基础。
技术介绍
猪大肠杆菌是条件性致病菌，可使猪终年发病，且可致使各年龄段的猪发病，尤其对仔猪的危害异常严重，其所引发的仔猪疾病以黄痢、白痢和水肿病为主；副猪嗜血杆菌病又称为Glasser’ s病，能够引起断奶仔猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等，发病率一般在10% 15%，严重时死亡率高达到50%。这两种病给我国的养猪业带来严重危害并造成极大的经济损失，因此，如何能够快速、高效、持久的控制这两种疾病显得极其紧迫。目前主要依靠抗菌药物、灭活疫苗和亚单位疫苗免疫对这两种疾病进行防治。这些防治方法各有局限抗生素容易诱发耐药性细菌的产生，且对人和动物的健康也产生负面的影响；而灭活疫苗免疫期短，免疫途径单一，激发免疫机制单一(主要激发的是体液免疫)，需进行多次免疫接种，易导致猪只产生应激；亚单位疫苗免疫原性较差，有些甚至是半抗原，需要与蛋白质载体偶联后使用，技术要求甚高，造价昂贵，不适合大规模生产和使用，所以，现行防治方法对此两种细菌所致疫病的防控不是最佳选择。减毒活疫苗的提出和应用，为防控细...
【技术保护点】
猪大肠杆菌与副猪嗜血杆菌弱毒融合菌株的构建方法，其特征在于，包括如下具体步骤：1.培养菌株将副猪嗜血杆菌HPS按5%的接种量接种到?TSB液体培养基中，猪大肠杆菌E.coli按5%的接种量接种到普通肉汤中，37℃摇床振荡培养，副猪嗜血杆菌HPS培养12h左右，猪大肠杆菌E.coli培养5h左右，停止培养；2.制备原生质体将步骤1培养的菌株4000r/min离心20min，用0.01mol/L?Tris缓冲液离心洗涤菌体2次，再用高渗Tris缓冲液悬浮，副猪嗜血杆菌加入预热的溶菌酶，使其终浓度为0.1mg/mL，37℃水浴?20min，随后缓慢加入0.1mol/L?EDTA溶...
【技术特征摘要】
1.猪大肠杆菌与副猪嗜血杆菌弱毒融合菌株的构建方法，其特征在于，包括如下具体步骤 [ 1.培养菌株 将副猪嗜血杆菌HPS按5%的接种量接种到TSB液体培养基中，猪大肠杆菌万.COli按5%的接种量接种到普通肉汤中，37°C摇床振荡培养，副猪嗜血杆菌HPS培养12h左右，猪大肠杆菌E. coli培养5h左右，停止培养；2.制备原生质体 将步骤I培养的菌株4000r/min离心20min,用O. Olmol/L Tris缓冲液离心洗漆菌体2次，再用高渗Tris缓冲液悬浮，副猪嗜血杆菌加入预热的溶菌酶，使其终浓度为O. lmg/mL,37°C水浴20min，随后缓慢加入O. lmol/L EDTA溶液使其终浓度为O. Olmol/L，继续37°C水浴保温15min，4°C 3500r/min...
【专利技术属性】
技术研发人员：贺东生，陈瑞爱，王文豪，苏丹萍，张显浩，刘好鹏，李冰，李琳，罗满林，
申请(专利权)人：广东大华农动物保健品股份有限公司，肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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