利用木薯渣发酵生产中性蛋白酶和饲料添加剂的方法技术

本发明专利技术公开一种利用木薯渣发酵生产中性蛋白酶和饲料添加剂的方法。该方法为将斜面活化的枯草芽孢杆菌接种到种子培养基中，再接种到发酵培养基中进行摇瓶发酵或是发酵罐发酵，发酵培养基：木薯渣10～80g/L，豆粕粉10～40g/L，麸皮10～40g/L，Na2HPO44g/L，KH2PO40.3g/L，pH为7.5～8.5；将发酵液离心，上清为中性蛋白酶粗液，沉淀干燥即为含枯草芽孢干菌的饲料添加剂。所使用的木薯渣是木薯淀粉工业加工的废弃物，含有颗粒细小的淀粉和纤维素，有利于产酶微生物在不经过预处理的情况下直接水解和利用，不需外加酶水解即可用于中性蛋白酶发酵，具有负成本的特点，变废为宝，解决木薯淀粉工业中的环境污染问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物发酵生产领域，特别涉及一种。
技术介绍
中性蛋白酶是最早为人类所发现并应用于工业化生产的蛋白酶制剂之一，目前工业上主要利用枯草芽孢杆菌，以玉米粉为主要原料发酵生产。粮食的紧张和价格的波动导致中性蛋白酶价格的波动，阻碍了中性蛋白酶 产业的发展。国家政策规划要求不与人争粮，解决成本和政策上的巨大挑战最有希望的途径就是以工农业废弃物为原料进行中性蛋白酶的生产。木薯作为我国南方的主要经济作物，年产量约为600万吨，主要用于生产淀粉。每年加工淀粉产出大量的木薯渣，干木薯渣中残留了 35% 45%的淀粉。目前大量的木薯渣未得到有效利用，既造成资源浪费又污染了环境。木薯渣中有大量的残留淀粉和蛋白质，可以代替玉米粉用于中性蛋白酶发酵。目前利用木薯渣为碳源生产高附加值产品中性蛋白酶的研究还未见报道。原材料成本在中性蛋白酶发酵生产中占有较大比重，以工业废弃物——木薯渣为原料进行直接发酵，降低原料成本对于中性蛋白酶发酵生产具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种。该方法以木薯渣为原料不仅省去了原材料、预处理以及酶解糖化的费用，具有经济可行性，而本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用木薯渣发酵生产中性蛋白酶和饲料添加剂的方法，其特征在于包含以下步骤：（1）菌种的活化：将枯草芽孢杆菌接种到斜面培养基上，进行活化；斜面培养基组成为：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L，pH值为8.0；（2）种子液的制备：将活化的枯草芽孢杆菌接种到种子培养基中，25～30℃、150～200rpm培养至OD600为1.4～1.6；再以体积百分比5%的接种量转接种子培养基中，25～30℃、150～200rpm培养5～10h；将菌液离心，取沉淀，用生理盐水悬浮沉淀，即得种子液；种子培养基组成为：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，pH值为8....

【技术特征摘要】
1.一种利用木薯渣发酵生产中性蛋白酶和饲料添加剂的方法，其特征在于包含以下步骤 (1)菌种的活化将枯草芽孢杆菌接种到斜面培养基上，进行活化；斜面培养基组成为胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L, pH值为8. O ； (2)种子液的制备将活化的枯草芽孢杆菌接种到种子培养基中，25 30°C、150 200rpm培养至OD6tltl为1. 4 1. 6 ;再以体积百分比5%的接种量转接种子培养基中，25 30°C、150 200rpm培养5 IOh ;将菌液离心，取沉淀，用生理盐水悬浮沉淀，即得种子液；种子培养基组成为胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，pH值为8. O ； (3)中性蛋白酶发酵中性蛋白酶发酵通过摇瓶好氧发酵或是发酵罐发酵进行 ①摇瓶好氧发酵将步骤(2)制备的种子液以体积百分比5%的接种量接到发酵培养基中，25 30°C、150 200rpm摇瓶好氧培养至少36小时； ②发酵罐发酵将步骤(2)制备的种子液以体积百分比5%的接种量接到发酵培养基中，控制转速200 lOOOrpm，通气量O. 5 2. Ovvm,使溶氧控制在30%，当pH值下降到6. 5以下时，流加lmol/L盐酸控制pH在6. 5，使用体积百分比为25%的泡敌进行泡沫控制，培养至少36小时； 发酵培养基木薯渣10 80g/L，豆柏粉10 40g/L，麸皮10 40g/L，Na2HP044g/L,KH2PO4O. 3g/L, pH 为 7· 5 8· 5 ; (4...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱明军，陈鸿图，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：