海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成的药物中的应用。海洋小球藻多糖原料来源丰富，成本低，所提取的海洋小球藻多糖在患处体液中的有效作用浓度为12.5~200g·ml-1时，对血管内皮细胞的增殖和迁移有明显抑制作用，因此，海洋小球藻多糖具有抑制肿瘤血管生成作用，可开发成抑制肿瘤转移的药物、保健食品及食品添加剂等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海洋小球藻多糖的ー种用途，尤其是ー种海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成药物中的应用。
技术介绍
目前，恶性肿瘤一癌症已经成为人类死亡的第一位或第二位原因。肿瘤不论是良性还是恶性，本质上都表现为细胞的异常増殖，在恶性肿瘤中表现为对邻近正常组织的侵犯及经血管、淋巴管和体腔转移到身体其它部位，即肿瘤转移。浸润和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，也是肿瘤患者死亡的主要原因。现有研究认为肿瘤的血管生成能力是肿瘤侵袭性的标志，与肿瘤血管新生有关的分子很多，包括血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGFs)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(TOGF)、转化生长因子3 (TGF P )、白介素 8 (interleukin 8, IL8)等。如文献I阐述了 Folkman提出的“肿瘤的生长和转移都依赖于新生血管”的概念k又献1. Folkman J. Angiogenesis in psoriasis: tnerapeutic implications. JInvest Dermatol 1972, 59 (I) :40.),并指出可以通过抑制肿瘤血管生成抑制肿瘤的生长和转移。肿瘤的血管生成能力被认为是肿瘤侵袭性的标志，丰富的血管网不仅为肿瘤细胞提供充足的氧气、营养成分和肿瘤生长因子等，而且也是肿瘤转移的通道。文献2阐述了肿瘤血管生成的分子机制(文献1. Patrick A, Sylvie L,Fr ederic LL, Andreas B. Molecular mechanisms of tumor vascularization.Critical Reviews in Oncology/Hematology 2005; 54: 53 - 61.)。肿瘤细胞能够产生大量的生长因子，包括VEGF、FGF、TGF等，这些生长因子能够通过一系列的信号传导促进血管内皮细胞的迁移、増殖和形成管状结构，最終形成新的血管。海洋小球藻属于单细胞绿藻，其含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等，是维持和促进人体健康所不可缺少的营养素，特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达13%的核酸等物质，具有增强人体免疫、抑制血糖上升，降低血清胆固醇含量，排除毒素，迅速修复机体的损伤等功能。其中的海洋小球藻多糖是以海洋小球藻为原料，通过酸提法、碱提法、水提法及酶提法的提取物，再经除蛋白、こ醇分级沉淀、柱层析等一系列步骤处理后而得到组分均一的多糖。海洋小球藻多糖经高效阴离子液相色谱对其溶液进行分析，表明组成多糖的单糖有D-岩藻糖、D-鼠李糖、D-2-氨基葡萄糖、D-半乳糖、D-葡萄糖和几种未知的单糖。但迄今为止，还没有关于以海洋小球藻多糖制备抑制肿瘤血管生成药物的相关报道。
技术实现思路
本专利技术首次发现小球藻多糖具有抑制血管内皮细胞的増殖和迁移作用，从而专利技术了小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成的药物中的应用。本专利技术的技术解决方案是ー种海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成的药物中的应用。所述海洋小球藻多糖在制备抑制血管内皮细胞的増殖和迁移药物中的应用。本专利技术的海洋小球藻多糖原料来源丰富，成本低，所提取的海洋小球藻多糖在患处体液中的有效作用浓度为12. 5^200 W g ml—1时，对血管内皮细胞的増殖和迁移有明显抑制作用，因此，海洋小球藻多糖具有抑制肿瘤血管生成作用，可开发成抑制肿瘤转移的药物、保健食品及食品添加剂等。附图说明 图1为不同浓度的海洋小球藻多糖对抑制肿瘤细胞培养液诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的作用示意图。具体实施例方式本专利技术海洋小球藻多糖的具体制备过程为取小球藻干燥藻粉，加入10倍量水，经闪式提取器破碎5 min后，采用索氏提取器提取2次，毎次2h，再经旋转蒸发器进行浓缩至原体积的1/3，得到水提取液；在水提取液中加入1:1的盐酸调溶液pH为4-5，4500r/min离心15min,再用5mol/ml的氢氧化钠调节pH为8. 5-9,4500r/min离心15min,除去蛋白后，再经80%こ醇进行分级沉淀，得小球藻多糖，经苯酚-硫酸法测得糖的含量> 70%。实验 参照又献(Ant1-angiogenic activities of chitooligosaccharides, Haige Wu,Liang Yaoj Xuefang Baij Yuguang Duj Bmgcheng Lm, Carbonydrate Polymers, Volume73，Issue I, 4 July 2008, Pages 105-110)，人脐静脉内皮细胞(ECV304)的培养条件为在完全培养基RPMI1640培养液中添加10%小牛血清、100U/ml青霉素、100 p g/ml链霉素；37°C，通入CO2体积含量为5%的空气培养。用人结肠癌细胞、肝癌细胞、卵巣癌或乳腺癌细胞等肿瘤细胞培养液作为诱导因子；人结肠癌细胞、肝癌细胞、卵巣或乳腺癌细胞培养液的培养条件为在完全培养基RPMI1640培养液中添加10%小牛血清、100U/ml青霉素、100 |l g/ml链霉素；37°C，通入CO2体积含量为5%的空气培养。实验例1: 参照又献(Ant1-angiogenic activities of chitooligosaccharides, Haige Wu,Ziang Yaoj Xuefang Baij Yuguang Duj Bingcheng Lin, Carbohydrate Polymers, M(1),2008 :105-110),实验分为阴性对照组、阳性对照组和处理组(具体加药情况见表I)。阴性对照组人脐静脉内皮细胞(ECV304)培养液200 Ii I ； 阳性对照组在180 Iil人脐静脉内皮细胞(ECV304)培养液中加入20 Ii I上述肿瘤细胞培养液，使其浓度为10% ； 处理组1:在人脐静脉内皮细胞(ECV304)培养液中加入所提取的海洋小球藻多糖，使其终浓度分别达到12.5きg ml—1、50 Ug ml'lOO pg 11^1 200 Ug ml—1，最终总体积为200 Ii I ； 处理组2 :在人脐静脉内皮细胞(ECV304)培养液中加入20 p I上述肿瘤细胞培养液后，再分别加入海洋小球藻多糖溶液，使其终浓度分别为12. 5pg mr\50pg ml'lOOpg mr1及200 Pg mr1，最终总体积为200 p I。阴性对照组、阳性对照组、处理组I及处理组2均在5 % CO2的37で培养箱中继续培养24 h后，加入5mg Hir1MTT试剂20 和200 u I DMS0，用酶标仪检测各组的细胞增殖状况，结果如表2。表I本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种海洋小球藻多糖在制备抑制肿瘤血管生成的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的海洋小球藻多糖在制备抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭成玉，李伟，孔亮，赵小霞，孟繁桐，
申请(专利权)人：大连海洋大学，谭成玉，
类型：发明
国别省市：