本发明专利技术提供了一种治疗II型糖尿病的黄连多糖及其制备方法，黄连为常用中药材，药用其干燥根茎，本发明专利技术实验证实黄连多糖具有降低胰岛素抵抗及显著的降血糖作用，对II型糖尿病的糖耐量有明显的改善作用，黄连多糖作为II型糖尿病的药物，具有疗效显著、无毒副作用，患者易于接受、适合对疾病长期控制等特点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及治疗II型糖尿病的药物。
技术介绍
糖尿病(diabetes mellitus, DM)是与遗传因素有关,又与多种环境因素相关的慢 性全身性多发病，是因胰岛素分泌不足或利用不足而引起糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱的综合症，中医中属于“消渴病”的范畴。我国糖尿病患病率正逐年上升，尤以II型糖尿病急剧上升为主，但目前国内外还没有理想的治疗药物。而中医药具有易于接受、毒副作用小、适合对糖尿病长期控制等特点，在有效预防和缓解糖尿病及其并发症、提高胰岛素敏感性方面具有较大的优势，引起医学界的越来越多的关注。II型糖尿病是一种终身性疾病，目前国内外的药物疗效不佳。西药治疗不彻底、毒副作用大、易产生耐受性不适合长期服用；传统中药效果不理想。黄连是应用最为广泛的中药之一，它具有包括抗糖尿病，抗炎，抗癌等多样的药理作用，早期的研究表明生物碱为其抗糖尿病的活性成分。Fu等的报道证实黄连水煎剂能够比生物碱产生更为明显的降血糖活性，Li等也证实非生物碱类提取物能显著的促进培养的脂肪细胞3T3-L1对葡萄糖的摄取能力。这些结果表明，有其他的成分对糖尿病和其并发症有作用。近年来，多糖的抗糖尿病作用被广泛报道。本领域呈现出糖尿病药物和功能食品研发的巨大潜力。国内外学者对人参、绿茶、枸杞、南瓜、黄芪、麦冬、红景天、桑叶、木耳、虫草、香菇、灵芝等近20种中药或天然药物中多糖进行了研究，表明这些植物多糖具有不同程度的降血糖活性。
技术实现思路
本专利技术的任务是提供一种治疗II型糖尿病的药物，使其具有疗效显著，无毒副作用、患者易于接受、适合对疾病长期控制等特点。本专利技术的技术方案是本专利技术提供的这种治疗II型糖尿病的药物是黄连多糖。本专利技术的黄连多糖的制备方法包括以下步骤(I)取黄连多糖干燥根茎，粉碎成粗粉；(2)取步骤⑴中制得的粗粉I份，加10倍量药材重量的水，煎煮3次，第一次加4倍量水,第二次加4倍量水，第三次加2倍量水，每次煮沸I小时,合并水煎液；(3)磷酸盐缓冲液调节步骤(2)制得的水煎液的pH值至6，加入O. 01倍药材重量的活性为12U/mg的木瓜蛋白酶，在45°C条件下水解I小时，然后立即煮沸5分钟，4°C静置12小时以上，抽滤去沉淀，将滤液装入分子量为1000的透析袋，用自来水透析I天，蒸馏水再透析I天，袋内多糖液浓缩成1.5g/mL，加无水乙醇至乙醇体积分数为80%，4°C静置12小时以上，倾去上清液，沉淀减压干燥得黄连多糖，得率约为7. 8%。本专利技术就黄连多糖对II型糖尿病的治疗作用做了研究，结果表明黄连多糖具有显著的降血糖、降低胰岛素抵抗、降血脂作用，黄连多糖能作为治疗II型糖尿病的有效药物。实验资料1.实验材料1.1仪器与试药DZX-3型真空干燥箱,透析袋(美国Spectrum), JPs_5型手持式快速全血糖测试仪(北京怡成生物电子技术有限公司)，紫外可见分光光度计(岛津国际贸易有限公司)，酶标仪(TECAN)，组织匀浆机(上海天呈科技有限公司)，GC-2100型、放射免疫仪(中国科大中佳公司)。黄连购买于本地药材市场，经本院韩东教授鉴定为真品。木瓜蛋白酶(12U/mg，广州杰沃利生物公司)，血糖试剂盒(北京康化试剂公司)，葡萄糖(北京化学试剂厂)，链脲 佐菌素(STZ) (Sigma公司)，胰岛素试剂盒(天津九鼎生物技术有限公司)，TG检测试剂盒(长春汇力生物技术有限公司)，总胆固醇试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司)。1. 2 动物ICR小鼠，雄性，体重18 22g，购自吉林大学基础医学院实验动物中心。小鼠分笼饲养，保持正常昼夜循环。小鼠饲料购自吉林大学基础医学院实验动物中心。正常饲料含有53 %碳水化合物，5 %脂肪，23 %蛋白，总热量在25kJ/kg ;高脂饲料含有48 %碳水化合物，22 %脂肪，20 %蛋白，总热量在44. 3kJ/kg。2.实验方法与结果2.1黄连多糖的制备取黄连多糖根茎，粉碎成粗粉；加10倍量药材重量的水，煎煮3次，第一次加4倍量水，第二次加4倍量水，第三次加2倍量水，每次煮沸I小时，合并水煎液；用磷酸盐缓冲液调节PH值至6，加入O. 01倍药材重量的活性为12U/mg的木瓜蛋白酶，在45°C条件下水解I小时，然后立即煮沸5分钟，4°C静置12小时以上，抽滤去沉淀，将滤液装入分子量为1000的透析袋，用自来水透析I天，蒸馏水再透析I天，袋内多糖液浓缩成1. 5g/mL，加无水乙醇至乙醇体积分数为80%，4°C静置12小时以上，倾去上清液，沉淀减压干燥得黄连多糖，得率约为7. 8%。本专利技术采用木瓜蛋白酶酶解粗多糖，除去蛋白质类杂质，所得多糖的水溶液在260nm和280nm处无吸收峰，证实其除去蛋白彻底，且不含核酸。本专利技术制得的黄连多糖经苯酚-硫酸比色法测得其多糖含量达92%以上。2. 2黄连多糖对血糖的影响取40只II型糖尿病小鼠，按空腹血糖水平随机分成5组，每组8只，阳性对照组灌胃给予格列本脲5mg/kg体重(glibenclamide, DG组)；黄连多糖按200,100, 50mg/kg 3个剂量组(H组，M组，L组)给药；模型对照组(Diabetic control, DC组)，灌胃给予同体积O. 9%氯化钠溶液；另将8只正常小鼠设为空白组(Normal control，NC组)，灌胃给予同体积0. 9%氯化钠溶液。灌胃体积0. 2ml/10g，2次每天，即每天上午9:00和下午4:00各I次，连续给药28天后的小鼠禁食过夜,第二天上午9:00测定尾静脉血糖值(fasting bloodglucose, FBG)。采用t检验评价差异是否有显著性。实验证明，黄连多糖高、中、低剂量组糖尿病小鼠在给药28天后均有显著的降血糖作用，且具有剂量依赖性。结果见图1。2. 3黄连多糖对胰岛素敏感指数的影响将2. 2项下给药28天后的II型糖尿病小鼠禁食过夜,尾静脉取血,离心取血清保存。血清胰岛素含量(fasting serum insulin, FINS)用商品化的放射免疫试剂盒进行测定，每次试验按照说明书上描述的方法进行。胰岛素敏感指数(insulin sensitivityindex, ISI)根据FBG和FINS的含量进行计算，计算公式如下ISI = Ln (FBG X FINS)实验证明，黄连多糖高、中、低剂量组糖尿病小鼠在给药28天后均有显著的提高胰岛素敏感指数，降低胰岛素抵抗 的作用，且具有剂量依赖性。结果见图2。2. 4黄连多糖对糖尿病小鼠糖耐量的影响口服葡萄糖耐受实验(oral glucose tolerance test, OGTT)在最后一周进行。12小时禁食后，实验动物口服2g/kg体重的葡萄糖溶液，按照试剂盒说明书用葡萄糖氧化酶法测量0，30，60，90和120分钟的血液葡萄糖水平。实验证明，黄连多糖高、中、低剂量组糖尿病小鼠在给药28天后均能显著提高糖耐量水平，且具有剂量依赖性。结果见表I。表I黄连多糖对II型糖尿病小鼠糖耐量的影响 GroupsGlucose (mmol/L)O min30 min60 min90 min120 min ~NC5.15 土 0.62” 13.92 土 1·05” 8·52±0.49” 7.92 士 0.54” 7.5本文档来自技高网...
【技术保护点】
黄连多糖在制备用于治疗II型糖尿病药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.黄连多糖在制备用于治疗II型糖尿病药物中的应用。2.一种黄连多糖的制备方法是，包括以下步骤 (1)取黄连多糖干燥根茎，粉碎成粗粉； (2)取步骤(I)中制得的粗粉I份，加10倍量药材重量的水，煎煮3次，第一次加4倍量水,第二次加4倍量水，第三次加2倍量水，每次煮沸I小时,合并水煎液； (3)用磷酸盐缓冲液调节步骤(2)制得的水煎液的pH...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜爽，杜培革，苑广信，李洪宇，安丽萍，韩笑，赵南晰，
申请(专利权)人：北华大学，
类型：发明
国别省市：
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