本发明专利技术涉及聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林-替莫唑胺缓释微球及制备方法；称取聚乳酸羟基乙酸、阿司匹林、替莫唑胺，溶于乙酸乙酯中制成混合溶液，并通过喷雾干燥机进行喷雾干燥制备微球，其中进风温度为43-45°C，出风温度为38-40°C，待进风口温度显示与设置温度显示相同时即可进行微球的制备。微球大小均一，表面圆滑，粒径(μm)为2.36±0.65，载药率(%)为26±0.45，包封率(%)为86.69±1.51，且毒副作用小，缓释效果好,持续释放时间为500h。一定剂量的阿司匹林联合应用可提高替莫唑胺的治疗效果，避免了可能发生的替莫唑胺剂量限制性毒性。为胶质母细胞瘤的化学药物治疗提供了一种手段。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域，特别是涉及。
技术介绍
目前，通过利用生物可降解载体在局部进行双药投递是组织学工程中的一项重要技术。多种可降解的高分子聚合物可作为投递载体，其中聚乳酸羟基乙酸(PLGA);由于具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能，被广泛应用于制药、医用工程 材料和现代化工业领域。在美国PLGA已通过食品药物管理局认证，被正式作为药用辅料收录进美国药典。阿司匹林是一种传统的非留体抗炎药物，它可以通过抑制环氧化物酶l，2(C0X-l，C0X-2)活性进而阻断前列腺素类，血栓烷类等炎症介质的生成。近年来有研究证实阿司匹林具有显著的抗肿瘤效果，在乳腺癌及结肠癌中具有辅助性治疗作用，并且我们的前期研究表明，阿司匹林具有抑制胶质瘤细胞增殖，及促进细胞凋亡的效果。因而，通过应用生物可降解材料实现阿司匹林与替莫唑胺同载，从而使阿司匹林增敏替莫唑胺治疗效果具有一定的可行性。我们利用喷雾干燥法，制备了阿司匹林-替莫唑胺缓释微球。胶质母细胞瘤是最常见的颅内原发性恶性肿瘤，具有高度的侵袭性，目前其治疗方式包括手术切除，及辅助性术后放射及替莫唑胺化学治疗，但生存期通常不足15个月。替莫唑胺是一类新型烷化剂，由于其可以通透血脑屏障并诱发肿瘤细胞DNA结构断裂诱导凋亡，因而是目前治疗胶质瘤的常用化疗药物。替莫唑胺口服后迅速吸收，血药浓度峰值出现在lh，消除速度快，平均半衰期只有1. 7-1. 9h，且在有限的治疗剂量范围内呈现线性动力学。此外，由于DNA修复酶O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)高表达，P53基因的突变，及抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-XL过度表达都限制了替莫唑胺的疗效。因此，为了提高其治疗效果及避免高剂量造成的毒性反应，我们采取了阿司匹林与替莫唑胺的联合应用并通过缓释作用降低了替莫唑胺的治疗剂量。
技术实现思路
本专利技术立足于解决当前胶质瘤化疗药物替莫唑胺血药半衰期短，消除迅速，具有剂量限制性毒性，及耐药造成的治疗敏感性低的局限性，通过喷雾干燥法制备了具有缓释效应的阿司匹林-替莫唑胺微球，实现了二者的同时投递，并利用阿司匹林具有的一定抗肿瘤作用提高了替莫唑胺治疗胶质母细胞瘤的治疗效果。喷雾干燥法是一种传统的微球制备方法。基本原理是首先将囊心物质分散在预先液化的包裹材料的溶液中，然后此混合液通过热气流进行雾化，使得溶解包裹材料的溶剂迅速液化，最终使囊膜固化，囊心物质微胶囊化。利用喷雾干燥法制备微球成本较低，操作简单，易于实现大规模工业化生产，因而具有重要的现实意义而在制药业中广泛应用。本专利技术的技术方案如下本专利技术的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)包载的阿司匹林-替莫唑胺缓释微球，大小均一，表面圆滑，粒径(Pm)为2. 36±0. 65，载药率(%)为26±0. 45，包封率(%)为86. 69±1. 51，且毒副作用小，缓释效果好，持续释放时间为500h。聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林-替莫唑胺共载微球(PLGA-A-T)的制备方法是称取一定质量的聚乳酸羟基乙酸，阿司匹林，替莫唑胺，各组分摩尔质量比为，聚乳酸羟基乙酸阿司匹林替莫唑胺=3:1:2，将上述微球的各组分溶于乙酸乙酯中制成混合溶液(浓度范围为30-60M/L)，并通过喷雾干燥机进行喷雾干燥制备微球，其中进风温度为43-45° C，出风温度为38-40° C，待进风口温度显示与设置温度显示相同时即可进行微球的制备。 本专利技术的优点和积极效果可降解生物材料聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林-替莫唑胺微球，具有一定的缓释效应(持续释放时间为500h)，极大改善了替莫唑胺血浆消除率低的缺陷(半衰期1.7-1. 9h);并实现了阿司匹林与替莫唑胺的同时投递。一定剂量的阿司匹林联合应用可提高替莫唑胺的治疗效果，从而避免了可能发生的替莫唑胺剂量限制性毒性。为胶质母细胞瘤的化学药物治疗提供了一种可行的手段。附图说明图1 :阿司匹林微球(A)，替莫唑胺微球⑶及阿司匹林-替莫唑胺共载微球(C)表面形态扫描电镜图。图2 :阿司匹林微球，替莫唑胺微球及共载微球释放曲线。可见各微球在前20h释放迅速，随后释放变缓，在500h时，释放率达到100%，且3种微球释放趋势一致。图3 :未处理组，空载微球,阿司匹林微球，替莫唑胺微球及共载微球对LN229和U87胶质瘤细胞克隆形成能力的检测。图4 :未处理组，空载微球，阿司匹林微球，替莫唑胺微球及共载微球对LN229和U87胶质瘤细胞凋亡能力的检测。图5 :空载微球,阿司匹林微球,替莫唑胺微球及共载微球对LN229胶质瘤皮下荷瘤模型治疗效果评价。具体实施例方式以下通过实施例对本专利技术做进一步的阐述。实施例1 :阿司匹林-替莫唑胺共载微球的制备及表征聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林-替莫唑胺共载微球(PLGA-A-T):按照摩尔质量比为，聚乳酸羟基乙酸阿司匹林替莫唑胺=3:1:2称取，各组分分别溶于乙酸乙酯中，制成混合溶液(浓度范围为30-60M/L)并通过喷雾干燥机进行喷雾干燥制备微球，其中进风温度为43-45° C，出风温度为38-40° C，待进风口温度显示与设置温度显示相同时即可进行微球的制备。I)将载有样品的烧杯置于喷雾干燥机载物台上，开启搅拌；打开空气压缩机，并调整出气压力在5Kg-10Kg之间；打开高压气体流量计，使出气量在10-12L/min左右；将上样蠕动泵的输液管插入液体中，开启上样蠕动泵，开始进样；观察干燥塔上端喷嘴处的雾化状态及干燥塔内的干燥情况，同使观察出风口的温度显示情况(维持在38-40° C)；2)液料喷干完毕关断加热开关、溶液泵、高压气体流量开关和空气压缩机开关，将主收料瓶从旋风分离器下口处旋下，进行物料收集；所得产物即为制备的阿司匹林-替莫唑胺共载微球，如附图1、图2，阿司匹林微球(A)，替莫唑胺微球(B)及阿司匹林-替莫唑胺共载微球(C)表面形态扫描电镜图，可见各微球表面圆滑，粒径均一，粒径(ym)为2.36±0. 65，载药率(%)为26±0. 45，包封率(%)为86. 69±1. 51，且毒副作用小，缓释效果好，持续释放时间为500h。实施例2 :阿司匹林替莫唑胺共载微球抑制胶质瘤细胞的增殖 称取一定质量的空载微球,阿司匹林微球，替莫唑胺微球及共载微球溶于2ml无血清的培养基中配置成一定浓度的药物母液。用含10%胎牛血清的培养基培养LN229和U87胶质瘤细胞到融合度为60%时，更换为1%胎牛血清培养基，并加入空载微球，阿司匹林微球，替莫唑胺微球及共载微球母液使各组终浓度分别为O. 02 μ M，5 μ Μ, 10 μ Μ, 10 μ Μ,继续培养12h后，用胰酶消化各组细胞，并以2X IO3每皿接种到直径为IOcm的大皿中，含10%胎牛血清的培养基培养2周后，弃培养基，PBS清洗3次，加入结晶紫染液使克隆着色，以此计数各皿的克隆形成数，并以未处理组的平均克隆数(重复3次取平均值，下同)为参照，其它各处理组平均克隆数分别除以未处理组克隆数，所得比值即为各组的相对克隆形成率，如图3所示。与对照组相比，空载组克隆形成率无改变，阿司匹林微球组与替莫唑胺微球组略微降低，而共载组克隆形成率显著降低。实施例3 :阿司匹林替莫唑胺共载微球促进胶质瘤细胞的凋亡用含10%胎牛血清的培养基培养LN229和U8本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林?替莫唑胺缓释微球，其特征是表面圆滑，粒径2.36±0.65μm，载药率为26±0.45%，包封率为86.69±1.51%，缓释时间为500h。
【技术特征摘要】
1.一种聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林-替莫唑胺缓释微球，其特征是表面圆滑，粒径2. 36 ±O. 65 μ m，载药率为26 ±O. 45%，包封率为86. 69 ±1. 51%，缓释时间为500h。2.权利要求1微球的制备方法，其特征是步骤如下聚乳酸羟基乙酸包载的阿司匹林和替莫唑胺共载微球称取聚乳酸羟基乙...
【专利技术属性】
技术研发人员：康春生，原续波，史振东，钱小敏，韩磊，浦佩玉，
申请(专利权)人：天津医科大学总医院，
类型：发明
国别省市：
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