稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法技术

本发明专利技术公开一种稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，以乙腈-0.2％甲酸溶液（20:80）为流动相，检测波长260nm，以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为对照品，用甲醇回流、过滤、蒸干、溶解处理样品，采用高效液相色谱法-紫外检测器检测扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。此方法线性关系良好、精密度、重现性良好，可作为扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法，简单、快速、易操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种高效液相色谱方法，特别涉及一种中药成分的含量测定技术。
技术介绍
扶正解毒散是根据《中华人民共和国兽药典》2010版二部扶正解毒散项下规定，由黄芪、板蓝根和淫羊藿三味中药按一定比例组合超微粉碎而成的成方制剂，具有扶正祛邪、清热解毒的功效。主治鸡法氏囊病。但是其项下质量标准并未规定各有效成分的鉴别方法和含量测定方法。为了完善扶正解毒散质量标准，为其质量标准的制定提供依据，本专利技术对扶正解毒散中黄芪的成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行含量测定方法的探索，并确定一种稳定的扶正 解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法。。
技术实现思路
本专利技术旨在解决扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定问题，以解决兽药典中未规定毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法。具体方法技术方案如下 一种高效液相色谱法测定扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，其色谱条件为 a.填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶； b.流动相为混合比例为20:80的乙腈和O.2%甲酸溶液； c.紫外检测器的检测波长为260nm。d.所用流动相流速为lml/min ； e.进样体积为10 μ I。1.毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准曲线的绘制 a.标准品溶液的制备精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品O. 01042g,置于200ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容至200ml。b.用甲醇稀释不同浓度的标准品溶液精密量取原浓度标准品溶液5ml，加甲醇定容至10ml，混匀后，再精密量取5ml至另一容量瓶中，加甲醇定容至10ml，按照此方法倍比稀释，制成浓度分别为 52.1 μ g/ml、26. 05 μ g/ml、13. 03 μ g/ml、6. 51 μ g/ml、3. 26 μ g/ml的毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品溶液。C.以不同浓度的毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品溶液响应的峰面积对浓度作图，得到毛蕊异黄酮葡萄糖苷的标准曲线。见附图。2.供试品的制备 取扶正解毒散约lg，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流4小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.精密度试验 取供试品溶液，精密吸取10 μ I进样，重复5次，记录峰面积，计算该方法精密度。试验结果见表。权利要求1.一种稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于步骤如下(1)采用高效液相色谱法测定；(2)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-O.2% 甲酸溶液(20:80)为流动相；检测波长为260nm，理论板数按毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰计算应不低于3000;(3)对照品溶液的制备取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 Iml含50 μ g的溶液，即得；(4)供试品溶液的制备取本品粉末约lg，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇 50ml，称定重量，加热回流4小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过， 精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇匀，即得；(5)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。2.如权利要求1所述，稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于采用高效液相色谱法。3.如权利要求1所述，扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于以乙腈-O. 2 %甲酸溶液(20:80 )为流动相。4.如权利要求1所述，稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为对照品。5.如权利要求1所述，稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于所用检测器为紫外检测器。6.稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于检测波长为 260nm。7.稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于所用溶剂为甲醇。全文摘要本专利技术公开一种稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，以乙腈-0.2％甲酸溶液(20:80)为流动相，检测波长260nm，以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为对照品，用甲醇回流、过滤、蒸干、溶解处理样品，采用高效液相色谱法-紫外检测器检测扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。此方法线性关系良好、精密度、重现性良好，可作为扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法，简单、快速、易操作。文档编号G01N30/02GK102998393SQ20121052872公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月11日 优先权日2012年12月11日专利技术者于瑞, 刘瑞丽, 刘海新, 刘琴, 王林 申请人:河南省康星药业股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稳定的扶正解毒散中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法，其特征在于步骤如下：（1）采用高效液相色谱法测定;（2）色谱条件与系统适用性试验??以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈?0.2％甲酸溶液（20:80）为流动相；检测波长为260nm,理论板数按毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰计算应不低于3000;（3）对照品溶液的制备??取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得;（4）供试品溶液的制备??取本品粉末约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流4小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得;（5）测定法??分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：于瑞，刘瑞丽，刘海新，刘琴，王林，
申请(专利权)人：河南省康星药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：