甘精胰岛素前体的酶切转化方法技术

技术编号:8484914 阅读:572 留言:0更新日期:2013-03-28 04:18
本发明专利技术公开了一种甘精胰岛素前体的酶切转化方法,包括如下步骤:将甘精胰岛素前体溶解于pH8~11的缓冲液中,控制反应体系的温度为0~37℃,按胰蛋白酶与甘精胰岛素前体的质量比为1:1000~10000加入胰蛋白酶,反应2~40小时。本发明专利技术涉及的酶切转化方法能使产生的甘精胰岛素量显著增加,同时显著减少副产物,酶切收率高,所得的酶切液后续纯化容易,适合于工业生产上的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种,特别涉及一种利用胰蛋白酶将甘精胰岛素前体酶切使转化成甘精胰岛素的方法。
技术介绍
甘精胰岛素(glycine-arginine insulin)是一种通过基因重组技术获得并用于治疗1、II型糖尿病的长效胰岛素类生物制品,其持续控制血糖的原理为皮下注射后甘精胰岛素分子立即聚合,因而溶解度降低,形成甘精胰岛素沉淀物,机体吸收延迟,其降糖作用的时间也被延长。重组甘精胰岛素是当前治疗1、II型糖尿病十分方便和有效的药物。国外由Aventis公司生产的重组甘精胰岛素商品名为来得时(Lantus),国内由甘李药业有限公司生产的重组甘精胰岛素注射液商品名为长秀霖。 甘精胰岛素(glycine-arginineinsulin,简称 Glargine)的设计结构为21A-Gly-30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg-人胰岛素,即将人胰岛素A链的21位Asn替换成Gly,在B链的30位氨基酸后加入2个Arg而成。完整的重组甘精胰岛素由A链和B链共53个氨基酸组成,其中A链含有21个氨基酸,B链含有32个氨基酸。甘精胰岛素在大肠杆菌中以包涵体形式表达,表达本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘精胰岛素前体的酶切转化方法,包括如下步骤:将甘精胰岛素前体溶解于pH8~11的缓冲液中,控制反应体系的温度为0~37℃,按胰蛋白酶与甘精胰岛素前体的质量比为1:1000~10000加入胰蛋白酶,反应2~40小时;所述缓冲液选自碳酸氢铵、Tris、甘氨酸或磷酸盐的缓冲液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵志全熊继元于锋臣
申请(专利权)人:鲁南新时代生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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