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一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法技术

技术编号:8484915 阅读:201 留言:0更新日期:2013-03-28 04:18
本发明专利技术涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法,包括如下步骤:(1)将海洋胶原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl缓冲液中,配成酶浓度为0.3~0.5mg/mL的酶液;(2)将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中,在水浴锅中反应,在4℃条件下,离心后超滤,制得胶原蛋白小肽。本发明专利技术根据海洋细菌胶原蛋白酶MCP-01催化结构域的特点,设计最佳降解条件,使海洋胶原蛋白酶MCP-01高效降解胶原蛋白,产生的胶原蛋白小肽分子量小于1000Da的肽段占85%以上,从而使其降解产物在医药、食品、化妆品等高附加值领域中具有巨大的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-Ol制备胶原蛋白小肽的方法,属于生物技术

技术介绍
胶原蛋白(collagen)是由动物细胞合成的一种生物性高分子,广泛存在于动物的骨、腱、软骨和皮肤中,是结缔组织中极其重要的一种水不溶性蛋白质。由于其具有特殊的结构,很难被生物学降解,所以只有少数的蛋白酶能够在特定的条件下水解胶原纤维,这类酶被称为胶原蛋白酶。胶原蛋白酶在医学、食品学和材料学上有着广泛应用,常被应用于细胞培养、富含胶原的肉食品(如牛肉)加工、胶原沉积性疾病如烧伤、手术后过度增殖性瘢痕的降解、腰椎间盘突出症等病症的治疗。胶原蛋白肽是天然胶原蛋白经降解处理后制成的,具有较高的消化吸收性,相对分子质量为2000 30000道尔顿的肽段。胶原蛋白多肽产物由于其独特的生理功能及特点,可用于开发多种功能性健康食品;同时,胶原多肽以其独特的分子结构和较小的分子量、良好的渗透性、与皮肤良好的相容性等优势,已成功地应用于保湿型化妆品。这些预示着胶原蛋白肽将有非常广阔的市场前景。目前胶原蛋白活性肽的获得方法包括从天然生物体中提取、通过化学方法和重组 DNA技术合成、体外水解蛋白质等。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用海洋胶原蛋白酶MCP?01制备胶原蛋白小肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将海洋胶原蛋白酶MCP?01溶于Tris?HCl缓冲液中,配成酶浓度为0.3~0.5mg/mL的酶液;(2)按照重量体积比为18~22:1的比例将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中,单位mg/ml,在45~50℃的水浴锅中反应24~26小时,在4℃条件下,13000转/分钟离心10~15min,制得胶原蛋白肽;(3)上述胶原蛋白肽经过截留量为3000Da的超滤管超滤离心,收集下层滤过物,即制得胶原蛋白小肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张玉忠冉丽媛王磊刘德华陈秀兰宋晓妍秦启龙苏海楠周百成
申请(专利权)人:山东大学
类型:发明
国别省市:

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