【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析，具体涉及一种西罗莫司杂质g的分析检测方法。
技术介绍
1、西罗莫司，又名雷帕霉素，是1975年科学家首次从智利复活节岛的土壤中发现的一种由土壤链霉菌分泌的次生代谢物，其化学结构属于三烯大环内酯类化合物。由于西罗莫司发酵收得率较低、提取工艺较复杂等因素，该药品直到1999年9月15日才由辉瑞开发上市，并随后在欧美十几个国家陆续上市。西罗莫司在临床试验中显示出强大的免疫抑制作用，可代替已有30多年临床史的环孢素，且与环孢素相比，西罗莫司口服的剂量更小、抗排异作用更强、副作用更少，故西罗莫司自上市以后，迅速成为世界各地器官移植者的常用口服免疫抑制剂。
2、西罗莫司的化学结构复杂，在发酵过程中可能会产生多个同系物和异构体，例如12-去甲基雷帕霉素和29-o-去甲基西罗莫司等。鉴于西罗莫司杂质谱的复杂性，亟需建立全面、系统的质量控制和杂质分析方法，以更好地保障临床用药的安全性和有效性。
3、除了美国药典外，各国药典均未收载西罗莫司的相关质量标准。而美国药典公开的西罗莫司的含量分析方法中，仅控制了西罗莫司三酮异构体和氧杂环丙烷异构体2个异构体，使其含量分别低于0.5％和5.0％，其它非特定单杂含量和总杂含量的含量低于0.15％和
4、1.0％，该质量标准未对其他特定杂质进行严格限定。
5、而我国国家食品药品监督管理总局发布的《化学药物杂质研究技术指导原则》明确指出：杂质的研究是药品研发的一项重要内容，包括选择合适的分析方法，准确地分辨与测定杂质含量。该原则强调，杂质研究
6、本专利技术通过系统研究西罗莫司的有关杂质，重点研究了在原料药稳定性考察中呈现含量显著增高的特定杂质g，并对其分析检测方法进行了系统深入地研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种西罗莫司杂质g的分析检测方法，能够准确地将杂质g分离检测出来。该分析检测方法具有检测速度快、专属性强、灵敏度高、重复性好的优势。
2、本专利技术的技术方案为：一种西罗莫司杂质g的分析检测方法，采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，以枸橼酸水溶液与四氢呋喃的混合溶液为a流动相，以乙腈与甲醇的混合溶液为b流动相，进行梯度洗脱。
3、本专利技术所述的杂质g的结构如下式所示，其分子式为c50h77no13，分子量为900.16：
4、
5、优选地，所述检测方法中，色谱柱选自zorbax sb-c18、ymc triart c18、watersxbridge c18或welch xb c18中的一种。
6、优选地，所述检测方法中，色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。
7、优选地，所述检测方法中，色谱柱的柱温为35～50℃。
8、优选地，所述流动相的流速为1.0～2.0ml/min。
9、优选地，所述检测方法中，待测溶液中西罗莫司的浓度为0.8～2.0mg/ml。
10、优选地，所述高效液相色谱的检测波长为270～280nm。
11、优选地，所述高效液相色谱的进样量为10～30μl。
12、进一步优选地，所述高效液相色谱的进样量为20μl。
13、优选地，所述a流动相中，质量浓度2％的枸橼酸水溶液与四氢呋喃的体积比为35:65。
14、进一步优选地，所述a流动相中的质量浓度2％的枸橼酸水溶液，用三乙胺将其调节至ph4.5。
15、优选地，所述b流动相中，乙腈与甲醇的体积比为24:76。
16、优选地，所述检测方法中，梯度洗脱步骤为：
17、
18、
19、进一步优选地，所述检测方法中，梯度洗脱步骤为：
20、
21、在一个优选的实施例中，所述分析检测方法包含如下步骤：
22、a.西罗莫司对照品溶液：精密称定西罗莫司对照品适量，加稀释液10％的乙醇水溶液(体积比)适量溶解，至每lml中含1.0μg的溶液，摇匀，作为西罗莫司对照品溶液；
23、b.杂质对照品储备液：称定西罗莫司杂质g10mg，分别置于10ml量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
24、c.选择性测试溶液：精密称定西罗莫司对照品10mg，置于10ml量瓶中，加入杂质g、对照品储备液各500μl，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
25、d.待测溶液：精密称取西罗莫司待测样品10mg，加稀释液10％的乙醇水溶液(体积比)适量溶解，并定量稀释至1.0mg/ml，作为待测溶液；
26、e.精密量取各溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。
27、本专利技术与现有技术相比具有如下突出优点：
28、1、本专利技术提供了一种检测速度快、专属性强、灵敏度高、重复性好的西罗莫司及其杂质的分析检测方法，实现了西罗莫司与其它杂质的分离，各峰之间的分离度高，有利于准确快速地控制西罗莫司原料药的质量；
29、2、本专利技术提供了一种西罗莫司杂质g的分析检测方法，能准确快速地定位、检测，确保西罗莫司的产品质量，确保药品的安全有效。
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1.一种西罗莫司杂质G的分析检测方法，其特征在于，所述检测方法采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，以枸橼酸水溶液与四氢呋喃的混合溶液为A流动相，以乙腈与甲醇的混合溶液为B流动相，进行梯度洗脱。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述A流动相中，质量浓度2％枸橼酸水溶液与四氢呋喃的体积比为35:65。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述B流动相中，乙腈与甲醇的体积比为24:76。
4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述A流动相中的质量浓度2％的枸橼酸水溶液，用三乙胺将其调节至pH4.5。
5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，流动相的流速为1.0～2.0mL/min。
6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，色谱柱选自ZORBAXSB-C18、YMC Triart C18、Waters Xbridge C18或Welch XB C18中的一种。
7.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，色谱柱的柱温为35～50℃。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，检测波长为270～280nm。
9.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，梯度洗脱步骤为：
...【技术特征摘要】
1.一种西罗莫司杂质g的分析检测方法，其特征在于，所述检测方法采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，以枸橼酸水溶液与四氢呋喃的混合溶液为a流动相，以乙腈与甲醇的混合溶液为b流动相，进行梯度洗脱。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述a流动相中，质量浓度2％枸橼酸水溶液与四氢呋喃的体积比为35:65。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述b流动相中，乙腈与甲醇的体积比为24:76。
4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述a流动相中的质量浓度2％的枸橼酸水溶液，用三乙胺将其调节至ph4.5。
5.如权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：张波，刘志钰，
申请(专利权)人：鲁南新时代生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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