耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原FnbA1的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原FnbA1的纯化方法。FnbA1为采用生物信息学方法，从MRSA的纤连蛋白结合蛋白A中预测出的活性片段，经大肠杆菌基因工程菌表达获得。其纯化步骤为：对高密度发酵的FnbA1重组表达菌按照高压破菌、离心，硫酸铵分步沉淀，GST亲和层析、PP酶酶切，离子交换层析、疏水层析和脱盐的顺序组合进行纯化。本发明专利技术提供的纯化方法简捷、容易放大、重复性好，所获目标蛋白纯度高，动物试验证明纯化的抗原可有效刺激机体产生较高的体液免疫应答和良好的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术制药领域，涉及一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原FnbAl的纯化方法。
技术介绍
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA)局部感染经久不愈，全身感染死亡率高达20%。自1961年被首次发现，目前已成为全球ICU病房、烧伤、战创伤等感染率最高的病原菌之一。MRSA因其传播途径广泛，易暴发流行，又由于其致病性强，呈多重耐药而成为临床上治疗的难点及重要的生物战剂，被称为“超级细菌”，当前MRSA已与乙型肝炎、AIDS被列为世界三大最难解决的感染性疾病，并位居首位。万古霉素被认为是治疗MRSA的最后一道防线，但2002年以来耐万古霉素的MRSA相继被分离出来，使MRSA即将面临无抗生素可治的严峻挑战。目前，在我国各大医院，由于抗生素的滥用，MRSA的分离检出率逐年上升，已由1978年的5%发展到2009年的79%，且菌群的毒力基因改变明显，并且耐万古霉素的金葡菌也呈蔓延趋势。基于这种严峻形势，我国已将MRSA列为21世纪可能对国人卫生健康有重大影响的12种病原微生物之本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原FnbA1的纯化方法，其特征在于，包含步骤：收集制备的所述抗原；按照高压破菌、离心，硫酸铵分步沉淀，GST亲和层析、PP酶酶切，离子交换层析、疏水层析和脱盐的顺序组合对制备的抗原进行纯化。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：章金勇，邹全明，郭鹰，冯强，樊绍文，卢陆，董衍东，敬海明，顾江，
申请(专利权)人：重庆原伦生物科技有限公司，中国人民解放军第三军医大学，
类型：发明
国别省市：