本发明专利技术提供一种生物活性物质弗霉素B，通过从海洋沉积物中分离培养能产生弗霉素B的弗氏链霉菌StreptomycesfradiaePTZ0025，再经制备发酵菌液、高速离心、提取分离纯化和结构鉴定，得到活性单体化合物弗霉素B。本发明专利技术的弗霉素B对金黄色葡萄球菌具有显著的抗菌活性，可在制备治疗金黄色葡萄球菌所引起的感染性疾病药物中的应用；弗霉素B还可显著抑制人肠癌HCT-15和SW620细胞以及胶质瘤C6细胞的生长，诱导癌细胞的凋亡和坏死，可在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用。弗霉素B化学结构为：。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药领域,涉及具有生物活性的新物质弗霉素B(Fradimycin B)及其制备方法，以及在制备抗菌和抗肿瘤药物中的用途。
技术介绍
感染性疾病依然严重危害人类的健康和生命，全球每年有超过1700万人死于感染性疾病。金黄色葡萄球菌{Staphyloccocus aureus)是人类的一种重要病原菌,可引起许多严重感染。而且，随着抗生素的广泛应用，不断出现的耐药病源菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素肠球菌(VRE)等超级耐药菌的感染，已成为医院和社区感染更为棘手的重要问题。我国是世界上抗生素使用最多的国家之一，耐药菌感染性疾病的危害更为突出，是我国10种重大疾病之一。而恶性肿瘤(癌症)对人类危害就更加严重，为当今世界死亡率最高的疾病，也是我国城乡居民的第一死因。化疗是目前世界上肿瘤手术切除后药物治疗的主要方法，但毒性大疗效有限。虽然分子靶向药物为癌症的治疗开辟了新途径，但其临床效果未达到预期效果，而且癌细胞对抗癌药耐药性的不断增加也严重影响现有药物的疗效。综上所述，临床上需要研究开发治疗感染性疾病和恶性肿瘤的新型药物。本专利技术发现了一种新的生物活性物质弗霉素B (Fradimycin B)。由于弗霉素B不仅对金黄色葡萄球菌{Staphyloccocus aureus)具有显著的抗菌活性,而且可显著抑制肠癌HCT-15和SW620细胞以及胶质瘤C6细胞的生长，所以，弗霉素B在制备抗感染和抗肿瘤药物等方面具有良好的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生物活性物质弗霉素B (Fradimycin B)，所述的弗霉素B为一新化合物，它的化学结构式为权利要求1.一种生物活性物质弗霉素B，所述的弗霉素B由海洋弗氏链霉菌/rai/iaePTZ0025产生，具有以下化学结构式2.根据权利要求1所述的一种生物活性物质弗霉素B的制备方法，通过以下步骤实现 (1)弗霉素B产生菌Streptomycesfradiae PTZ0025的培养分离 取空气干燥的海洋沉积物用液体菌种培养液稀释，稀释后的浓度为O. Γ0. 0001 g/ml,取稀释液均匀分散到含有固体培养基的培养皿中，在常温的2(T30° C条件下培养疒15天，将不同的菌落分别转移到另一含有固体培养基的培养皿中，在常温的2(T30° C条件下继续培养，最后将生长良好的单一菌落转移到斜面培养基并置于4° C冰箱保存备用； 所述的液体菌种培养液每IOOml的组成为5. O克葡萄糖、1. 5克丙三醇、1. 5克麦芽提取物、2. 5克酵母提取物、O. 5克酪蛋白氨基酸和O.1克碳酸钙，或是适宜菌株PTZ0025生长的其它组成的液体培养基； (2)弗霉素B产生菌Streptomycesfradiae PTZ0025的菌种鉴定 步骤(I)所获得的菌株用目前实验室普遍使用的16S rDNA序列分析方法鉴定种类，确定为菌株弗氏链霉菌,分类命名为Sirepio焊《 5· fradiae PTZ0025,已被武汉中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号CCTCC NO M 2012374 ； (3)弗霉素B产生菌5 /·<9/7 ο _7 (95·fradiae PTZ0025发酵菌液的制备 取步骤(I)的单一菌落与灭菌水在微量离心管混合后匀浆，将细菌匀浆液转移到含有液体菌种培养液的小锥形瓶中，旋转振摇培养7 15天，培养温度为25 28° C，再转入含有液体培养基的大三角培养瓶，在常温条件下25 28° C旋转振摇发酵培养疒15天，得到具有抗菌活性的PTZ0025发酵菌液； 其中大三角培养瓶所用的液体培养基每500 ml的配方为3.0 g葡萄糖，2.5 g丙三醇，7. 5 g可溶性淀粉,2. O g豆粉，1. 5 g鱼粉，1.5 g氯化钙和50 ml灭菌海水，或是适宜菌株PTZ0025生长的其它配方的液体培养基； (4)弗霉素B的提取分离纯化和结构鉴定 PTZ0025的发酵菌液经高速离心，弃去上清液后的残留物用有机溶剂提取，提取液经减压浓缩得到的提取物用Diaion HP-20大孔吸附树脂和十八烷基硅烷键合硅胶柱层析相结合的方法分离得到含有弗霉素B的活性组分，活性组分用高效液相分离纯化得到活性单体化合物弗霉素B。3.根据权利要求2所述的一种生物活性物质弗霉素B的制备方法，其特征在于，步骤(I)样品稀释液的取样量为5(T300 ml，培养皿所含的固体培养基为细菌琼脂培养基或其它固体培养基，斜面培养基为高氏合成斜面培养基或其它固体斜面培养基。4.根据权利要求2所述的一种生物活性物质弗霉素B的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的灭菌水为海水、蒸馏水或实验室其它用水，使用量为10(T500ml，液体菌种培养液同步骤(I)所述，使用量为2(T50 ml。5.根据权利要求2所述的一种生物活性物质弗霉素B的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的有机溶剂为乙醇、甲醇或丙酮；所述柱层析的大孔吸附树脂用量与上量的提取物比例是10 20 ml 1.0 g，十八烷基硅烷键合硅胶用量与上量的样品量比例是4(T60 g1.0g ;所述的高效液相条件是:Agilent 1100高效液相色谱仪，Cosmosil C18色谱柱250 r10. O mm, 5 mm,乙腈/水为流动相，检测波长295 nm,流速为3.0 ml/min。6.根据权利要求1所述的一种生物活性物质弗霉素B在制备治疗金黄色葡萄球菌所引起的感染性疾病药物中的应用。7.根据权利要求1所述的一种生物活性物质弗霉素B在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的恶性肿瘤为消化系统肿瘤和脑肿瘤，涉及肠癌和脑胶质瘤。9.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述药物由弗霉素B单独或与其他抗感染药物或抗肿瘤药物或与其它活性化合物一起，与制剂允许的赋形剂或载体制成。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物的制剂形式为液体制剂、固体制剂、胶囊制剂、缓释制剂。全文摘要本专利技术提供一种生物活性物质弗霉素B，通过从海洋沉积物中分离培养能产生弗霉素B的弗氏链霉菌StreptomycesfradiaePTZ0025，再经制备发酵菌液、高速离心、提取分离纯化和结构鉴定，得到活性单体化合物弗霉素B。本专利技术的弗霉素B对金黄色葡萄球菌具有显著的抗菌活性，可在制备治疗金黄色葡萄球菌所引起的感染性疾病药物中的应用；弗霉素B还可显著抑制人肠癌HCT-15和SW620细胞以及胶质瘤C6细胞的生长，诱导癌细胞的凋亡和坏死，可在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用。弗霉素B化学结构为。文档编号A61P31/04GK102993188SQ20121043520公开日2013年3月27日 申请日期2012年11月3日 优先权日2012年11月3日专利技术者张治针, 连晓媛, 辛文秀, 叶雪威, 虞斯然 申请人:浙江大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种生物活性物质弗霉素B，所述的弗霉素B由海洋弗氏链霉菌Streptomyces?fradiaePTZ0025产生，具有以下化学结构式：。2012104352053100001dest_path_image001.jpg
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张治针，连晓媛，辛文秀，叶雪威，虞斯然，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：
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