基于量子点共振能量转移的MGMT活性检测试剂盒及方法技术

本发明专利技术提供了一种基于量子点共振能量转移的MGMT活性检测试剂盒及方法。所述试剂盒主要包括：（1）链霉亲和素修饰的磁性量子点；（2）四甲基罗丹明标记的抗MGMT抗体耦合物；（3）生物素标记的O6-苄基鸟嘌呤；（4）缓冲液A；（5）O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶标准品。本发明专利技术利用量子点与罗丹明之间的共振能量转移原理进行MGMT的活性检测，以最大限度地避免对TMR的直接激发，降低假阳性的发生率；使用Biotin-BG和anti-MGMT两种特异探针，通过酶催化和抗原-抗体的双重特异反应，保证了反应结果具有高度的特异性；本发明专利技术使用磁分离技术，简化了分离步骤，达到快速检测的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于量子点共振能量转移的MGMT活性检测试剂盒及方法。
技术介绍
烷化剂是最大一类抗肿瘤药物，临床上常用的例子有环磷酰胺、尼莫司汀、卡巴嗪、硝卡芥、氮芥和替莫唑胺等，广泛用于治疗脑、头颈、肝、食管、肺、泌尿、生殖、血液等恶性肿瘤。烷化剂药物对肿瘤细胞的杀伤主要是通过对DNA分子的鸟嘌呤O6位上的烷基化而实现的，而 O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶(O6-Methylguanine DNA-Methyltransferase, MGMT)的存在能够去除这种烷基加合物，使肿瘤细胞和正常细胞得以生存而产生所谓的耐药性，是哺乳动物细胞修复烷化剂所造成DNA损伤的一个重要环节。如果肿瘤细胞中的 MGMT水平过高可能会导致耐药，而对于正常细胞却可能减少其化疗的毒副作用。如何控制 MGMT水平以达到最佳的化疗效果是如今MGMT研究的热点。而且，MGMT在预测肿瘤化疗的效果以及制订个体化治疗方案的潜在价值也已被大量实例研究所证实并被医学界广泛认可。因此，如何灵敏、准确地检测MGMT在细胞中的活性，对提高化疗效果以及减少药物毒副作用有着重要的意义。不幸的是，目前还没有一种简易可本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于量子点共振能量转移的MGMT活性检测试剂盒，主要包括：（1）链霉亲和素修饰的磁性量子点；（2）四甲基罗丹明标记的抗MGMT抗体耦合物；（3）生物素标记的O6?苄基鸟嘌呤；（4）缓冲液A，其终浓度组成如下：20mM?DTT，2mM?EDTA，20%丙三醇，溶剂为100mM?Tris?HCl，pH?7.6；（5）O6?甲基鸟嘌呤?DNA甲基转移酶标准品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁媛媛，陈灿玉，焦艳华，张现侠，郭卫强，章鹏飞，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：