一种通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法及应用技术

本发明专利技术公开一种通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法及应用，涉及植物分子生物学和基因工程领域。本发明专利技术通过CRISPR‑Cas9技术对BneIF2Bβ基因外显子区域进行基因编辑，利用生物自身DBS内源修复机制的不完全保守性，造成其DNA序列移码突变，导致蛋白翻译提前终止，获得功能缺失型材料。该材料对TuMV的抗性显著增强，而其他重要园艺性状无明显改变。该新种质在植物抗TuMV分子机制的基础研究和群体改良、新种质创制的育种工作中均有极大应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和基因工程领域，具体为利用基因编辑技术创制新种质和加速农作物育种进程，尤其是一种通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法及应用。

技术介绍

0、技术背景

1、芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,tumv)由美国病毒学家schultz于1921年首次在芸薹属作物中发现，是目前发现唯一能够侵染芸薹属植物的马铃薯y病毒属病毒。植物受tumv侵害后叶片出现花叶、卷缩、褪绿等表型，严重时甚至导致全株枯萎，若防治不当在田间生产中易造成毁灭性损失。由于tumv侵染范围广，危害程度大，防治难度高，探索抗病基因、选育抗病品种是目前解决这一问题的主要手段。

2、甘蓝型油菜(brassica napus)是一种重要的世界范围广泛种植的油料作物，前期研究多集中在通过遗传定位鉴定tumv显性抗病位点，但均未精细定位到具体抗病基因，研究基础较薄弱，抗病种质稀缺。eif2bβ是在芥菜型油菜(brassicajuncea)中鉴定到的tumv隐性抗病基因，编码一个翻译起始因子，可用于抗病种质的创制。但在育种本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在于：通过对甘蓝型油菜BneIF2Bβ基因CDS区域进行基因编辑，造成其DNA序列移码突变，导致蛋白翻译提前终止，进而获得功能缺失型突变体材料，表现出芜菁花叶病毒抗性增强。

2.根据权利要求1所述的通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在于：通过CRISPR-Cas9技术，利用生物自身DBS内源修复机制，引入BneIF2Bβ基因的DNA序列，引起该基因内片段的插入或缺失。

3.根据权利要求2所述的通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在...

【技术特征摘要】

1.一种通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在于：通过对甘蓝型油菜bneif2bβ基因cds区域进行基因编辑，造成其dna序列移码突变，导致蛋白翻译提前终止，进而获得功能缺失型突变体材料，表现出芜菁花叶病毒抗性增强。

2.根据权利要求1所述的通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在于：通过crispr-cas9技术，利用生物自身dbs内源修复机制，引入bneif2bβ基因的dna序列，引起该基因内片段的插入或缺失。

3.根据权利要求2所述的通过基因编辑技术创制抗芜菁花叶病毒病甘蓝型油菜新种质的方法，其特征在于，包括以下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘训言，沙彤芸，滕一波，黎小飞，乔文广，翟煜，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：