光灭活的病毒和系统及其使用方法技术方案

本发明专利技术基本上涉及了灭活微生物的系统和方法。特别地，本发明专利技术直接使用至少一种呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光灭活微生物，如病毒。例如，本发明专利技术的一方面包括使用补骨脂素和广谱脉冲光灭活疱疹病毒，如疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术公开的各种实施方式大体上涉及光灭活微生物的系统和方法。更具体地，本专利技术的各种实施方式直接涉及使用至少一个呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光的光灭活微生物诸如病毒。
技术介绍
疱疫 B 病毒(Herpesvirus simiae 或 Cercopithecine herpesvirus I)是Alphaherpesvirinae亚科和Simplexvirus群的成员，已知自然发生在恒河猴(MacacaSPP)上。猕猴感染可能无症状，或可能引起轻微的疾病。其他物种如人类的感染，是罕见的但后果严重，如果不及时治疗则是致死性疾病。通过用血清学方法检测抗B病毒的抗体来鉴定既往感染。然而，由于相对较高发生率的与单纯性疱疹病毒感染(如HSV-I和/或HSV-2)的免疫交叉反应使人类B病毒感染的血清学诊断变得复杂化。在猕猴中可以证实既往感染，而没有这些复杂情况，因为已知的感染猕猴的单纯病毒仅有B病毒。识别被B病毒感染的猕猴，对于管理圈养的猕猴，发展特定的无病原的群体，以及管理猕猴的人的潜在暴露和感染的预防来讲，是重要的。因此，所需要的是用于鉴别感染了微生物的个体的组合物、系统和方法。本专利技术针对新的这样的组合物、系统和方法，用来鉴别感染了微生物，诸如B病毒的个体。
技术实现思路
本专利技术的各种实施方式公开了大体关于光灭活微生物，更特别地是，关于使用至少一种呋喃香豆素类化合物(furanocoumarin)和广谱的脉冲光灭活病毒的系统和方法。例如，本专利技术的一个方面，包括微生物的灭活方法，包括对微生物提供至少一种呋喃香豆素类化合物，并且将微生物暴露于广谱脉冲光的至少一个脉冲，从而灭活微生物。微生物选自病毒、细菌和真菌组成的组，最好包括病毒。示例性的病毒包括疱疹病毒，如疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2。呋喃香豆素类化合物可以包括补骨脂素(psoralen)，所述补骨脂素可以以大约O. I μ g/ml至大约60 μ g/ml的浓度使用。在示例性的实施方式中，补骨脂素以至少约5g/ml的浓度存在。将微生物暴露于广谱脉冲的光的至少一个脉冲可以包括将微生物暴露于大约O. 45焦耳/厘米2至大约13. 5焦耳/厘米2广谱光。在另一实施方式中，将微生物暴露于广谱脉冲的光的至少一个脉冲，可以包括将微生物暴露于至少大约4. 05焦耳/厘米2的广谱光到至少约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。本专利技术的另一方面，包括含有光化学灭活的核酸的灭活的微生物，其中光化学灭活的核酸是通过至少一个呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光的至少一个脉冲进行的光化学灭活。所述的微生物选自可以选自由病毒、细菌和真菌组成的组，最好是病毒。示例性的病毒包括疱疹病毒，如疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2。呋喃香豆素类化合物可以包括补骨脂素，所述补骨脂素可以以大约O. I μ g/ml至约60 μ g/ml范围内的浓度使用。在示例性的实施方式中，补骨脂素以至少约5g/ml的浓度使用。光化学灭活病毒可以包括将微生物暴露于广谱脉冲光的至少一个脉冲，其利用大约O. 45焦耳/厘米2的广谱光到大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。在示例性的实施方式中，光化学灭活病毒可以包括将微生物暴露于至少大约4. 05焦耳/厘米2的广谱光到大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。例如，被灭活的微生物可以通过暴露于浓度至少约5 μ g/ml的补骨脂素以及广谱脉冲的光的至少一个脉冲，其包括至少约4. 05焦耳/厘米2的广谱脉冲光，将其灭活。本专利技术的另一个方面，包括检测受试者中抗体的系统，包括抗原成分，其中，抗原暴露于呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲的光的至少一个脉冲；以及报告成分，其能够检测到受试者的抗体结合到至少一部分抗原。所述的抗原可以选自由病毒、细菌和真菌组成的组，最好包括病毒。在示例性的实施方式中，病毒抗原是疱疹病毒抗原，其可以包括，但不仅限于来自疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2的抗原。呋喃香豆素类化合物是补骨脂素，并且广 谱脉冲光可以包括约O. 45焦耳/厘米2至约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。在一个实施方式中，抗原成分可以进一步包括放置在基质上的抗原。报告成分可以包括，例如，能够结合至少一部分抗体的报告抗体，所述的抗体能够结合至少一部分抗原。本专利技术的另一个方面包括免疫受试者的方法，包括灭活免疫原性微生物，包括将免疫原性微生物暴露于呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲的光的至少一个脉冲；并且向受试者施用有效量的免疫原性微生物，以产生免疫反应。这种方法设想利用灭活的免疫原性微生物免疫受试者。所述免疫原性微生物可以包括病毒、细菌、真菌或其组合。在示例性的实施方式中，免疫原性微生物包括病毒，最好是疱疹病毒，更优选疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2。呋喃香豆素类化合物可以包括补骨脂素，其可以是约O. I μ g/ml至约60 μ g/ml的浓度。在示例性的实施方式中，补骨脂素是至少约5μ g/ml的浓度。将免疫原暴露于呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲的光的至少一个脉冲可以包括将免疫原暴露于约O. 45焦耳/厘米2至约13. 5焦耳/厘米2的广谱光，更具体地是将免疫原暴露于至少约4. 05焦耳/厘米2的广谱光。本专利技术的另一个方面，包括至少对抗原的一部分具有特异亲和力的抗体，其中抗原衍生自经暴露于至少一种呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光的至少一个脉冲的微生物。所述抗原可以衍生自微生物，如病毒、细菌或真菌。在示例性的实施方式中，微生物是病毒，更具体的是疱疹病毒，更加具体的疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2。呋喃香豆素类化合物可以是以约O. I g/ml至约20g/ml的浓度存在的补骨脂素。在示例性的实施方式中，将补骨脂素是以至少约5_μ g/ml的浓度存在。广谱脉冲的光的至少一个脉冲可以包括约4. 05焦耳/厘米2至大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。在示例性的实施方式中，广谱脉冲的光的至少一个脉冲包括大约至少约4. 05焦耳/厘米2的广谱光。抗体可以是多克隆抗体或其片段，或者单克隆抗体或其片段。本专利技术的另一方面，包括含有灭活的核酸的灭活的微生物，其中灭活的微生物保留其抗原性。微生物可以包括病毒、细菌或真菌。在示例性的实施方式中，灭活的微生物是病毒，如疱疹病毒。在示例性的实施方式中，灭活的微生物包括疱疹B病毒或狒狒疱疹病毒2。灭活的核酸包括交联的核酸。灭活的微生物能够在受试者中产生免疫反应，其基本上类似于非灭活的微生物产生的免疫反应。附图说明图I显示了在补骨脂素存在(+补骨脂素)、不存在(无补骨脂素)的条件下，暴露于广谱脉冲光(BSPL)的狒狒疱疹病毒2 (HVP2)的不同样品的PCR结果。图2用图形描绘了用BSPL处理的HVP2样品相比于活的HVP2制备物(HVP-2Pr印)的抗原性。图中字母“P”代表BSPL脉冲并且数字代表了脉冲的数目。图3用图形描述了用BSPL加补骨脂素处理的HVP2样品相比于加入了补骨脂素但没有暴露于BSPL (HVP-2+Psor)的活的HVP2制备物(HVP_2Pr印)的抗原性。图中字母“P”代表BSPL脉冲并且数字代表了脉冲的数目。图4说明暴露于BSPL的存在(+补骨脂素)和不存在(无补骨脂素)补骨脂素的不 同HVP2样品的PCR抑制的结果。图5提供了根据表3中数据的补骨脂素相对于HVP2斑点数目的剂量反应曲线。图6显示了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.12.21 US 61/288,7561.一种灭活微生物的方法，包括 向微生物提供至少一种呋喃香豆素类化合物，以及 将所述微生物暴露于广谱脉冲光的至少一个脉冲，从而灭活微生物。2.根据权利要求I所述的方法，其中所述微生物选自由病毒、细菌和真菌组成的组。3.根据权利要求I所述的方法，其中所述微生物是病毒。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述病毒是疱疹病毒。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述疱疹病毒选自由疱疹病毒B和狒狒疱疹病毒2组成的组。6.根据权利要求I所述的方法，其中所述至少一种呋喃香豆素类化合物包括补骨脂素·7.根据权利要求6所述的方法，其中补骨脂素以大约O.I μ g/ml至大约60μ g/ml的浓度存在。8.根据权利要求7所述的方法，其中补骨脂素以大约至少0.5yg/ml的浓度存在。9.根据权利要求6所述的方法，其中将所述微生物暴露于广谱脉冲光的至少一个脉冲，包括将所述微生物暴露于大约O. 45焦耳/厘米2至大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。10.根据权利要求8所述的方法，其中将所述微生物暴露于广谱脉冲光的至少一个脉冲，包括将所述微生物暴露于至少大约4. 05焦耳/厘米2的广谱光至大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。11.一种灭活的微生物，含有经光化学灭活的核酸，其中所述的光化学灭活的核酸是通过至少一种呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光的至少一个脉冲灭活的。12.根据权利要求11所述的灭活微生物，其中所述的微生物选自病毒、细菌和真菌组成的组。13.根据权利要求12所述的灭活微生物，其中所述的微生物是病毒。14.根据权利要求13所述的灭活微生物，其中所述病毒是疱疹病毒。15.根据权利要求14所述的灭活微生物，其中所述疱疹病毒选自由疱疹病毒B和狒狒疱疹病毒2组成的组。16.根据权利要求11所述的灭活微生物，其中所述至少一种呋喃香豆素类化合物包含补骨脂素。17.根据权利要求16所述的灭活微生物，其中补骨脂素以大约O.I μ g/ml至大约60 μ g/ml的浓度存在。18.根据权利要求11所述的灭活微生物，其中所述广谱脉冲光的至少一个脉冲包括大约O. 45焦耳/厘米2至大约13. 5焦耳/厘米2的广谱光。19.根据权利要求15所述的灭活微生物，其中所述至少一种呋喃香豆素类化合物包含浓度至少大约5 μ g/ml的补骨脂素，并且所述广谱脉冲光的至少一个脉冲，包括至少大约4. 05焦耳/厘米2的广谱光。20.一个用于检测受试者中的抗体的系统，包括 抗原成分，其中所述抗原暴露于呋喃香豆素类化合物和广谱脉冲光的至少一个脉冲；以及 报告成分，其能够检测受试者中的抗体结合至少一部分的抗原。21.根据权利要求20所述的系统，其中所述的抗原选自由病毒、细菌和真菌组成的组。22.根据权利要求21所述的系统，其中所述的抗原是病毒。23.根据权利要求22所述的系统，其中所述的病毒抗原是疱疹病毒。24.根据权利要求23所述的系统，其中所述的病毒抗原选自由疱疹病毒B和狒狒疱疹病毒2组成的组。25.根据权利要求20所述的系统，其中所述的呋喃香豆素类化合物是补骨脂素。26.根据权利要求20所述的系统，其中所述的抗原成分进一步包括暴露于基质上的抗原。27.根据权利要求26所述的系统，其中所述的报告成分包括报告抗体，其能够结合至少一部分抗体，所述抗体能够结合至少一部分抗原。...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱莉亚·赫利尔德，大卫·卡兹，
申请(专利权)人：佐治亚州立大学研究基金会，
类型：
国别省市：