一种鸡胚活性成分的制备方法技术

本发明专利技术涉及了一种鸡胚活性成分的制备方法，首先是精选鸡受精卵，将其表面进行消毒，消毒后常规孵化7～9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化1～3天，此时将孵化的鸡胚进行如下处理：去除蛋壳、弃去卵黄和胚体，将剩余物质即鸡胚成分冰冻粉碎，然后加入预冷的生理盐水制浆，经20目绢布和3μm过滤器过滤，最终得到的滤液即为鸡胚胎素溶液。此胚胎素含有氨基酸、小分子多肽、生长调节因子、核酸衍生物等多种生物活性物质，具有较高的营养价值、美容价值与药用价值。该方法能够大量地提取具有较高生物活性胚胎素。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，尤其是涉及一种具有高生产量的鸡胚胎素的制备方法。二.
技术介绍
鸡胚胎素是一组具有高生物活性的生长刺激因子、神经生长因子、活性多肽、活性多糖、多种氨基酸和丰富的其它营养物质的小分子混合物，它们具有促进生长和活化生理功能的精华成分，能激活人体组织细胞，活化组织器官功能，调节人体各种免疫力，提高人体抵抗疾病的能力，并可延缓衰老，其中所含的生长刺激因子可以增加皮肤含水量、促进上 皮细胞的新陈代谢，经过一定时间的应用，可延缓真皮层衰老、萎缩，使皮肤真皮层饱满，并可增加含水量，使表皮光滑滋润。在鸡受精卵孵化的短短过程中，发生了巨大的变化，在此变化过程中伴随产生大量的生长刺激因子、神经生长因子、活性多糖、活性多肽、多种氨基酸和丰富的其他营养物质，具有极高的营养价值和美容药用价值。在现有技术中，人们提常规提取具有较高活性的鸡胚胎素的方法产量不是很高，本专利技术中选用孵育7 9天的鸡受精卵，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化I 3天，然后将此鸡胚作为材料提取鸡胚胎素，其产量大大增加。这是因为植物血凝素能够诱导产生免疫干扰素，白细胞介素等细胞因子，提高了某些活性蛋白的含量。三.
技术实现思路
本专利技术的目的是在现有的理论技术基础上有所改进，选用和常规孵化不同的方式生产高含量的鸡胚胎素。本专利技术的技术方案是，包括精选受精卵、孵化和植物血凝素尿囊腔接种，其特征是，包括下列具体步骤a :精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化7 9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化I 3天，孵化后去除蛋壳、胚体和蛋黄，将剩余物质放入冰柜中，在(-20°C的温度条件下，冰冻I 10小时，然后对鸡胚成分进行粉碎。b :将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入4 6倍鸡胚成分体积预冷至O 4°C的无菌生理盐水,在50 80转/分的搅拌速度下搅拌6 10分钟。c :将打成浆的鸡胚成分进行4 6次反复冻融，冰冻温度为-20 _30°C，每次冰冻时间为I 4小时，室温条件下融化。d :将反复冻融的鸡胚成分经20目絹布过滤。过滤后再加入4 6倍体积预冷的生理盐水经3 μ m过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液。e :在相对湿度小于30%的环境中，将所得到的鸡胚胎素置于密闭容器中进行避光保存，以备用。所述的鸡胚胎素制备方法，其中常规孵化方法中的孵化参数是①孵化温度36 38°C ;②孵化湿度相对湿度为40 60% ;③通风换气保持孵蛋箱空气中的氧含量在21%以上；④翻蛋每I 2小时翻蛋I次； 孵化至7 11天，取出孵化蛋后弃去蛋壳、鸡胚胎、蛋黄。所述常规孵化7 9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化I 3天的方法是，将孵化7 9天的鸡胚用稀释至浓度O. I 100 μ g/ml的植物血凝素接种于尿囊腔中，每只鸡胚O. 2ml，再常规孵化I 3天。所述鸡胚成分粉碎的方法是将去除蛋壳、鸡胚胎、蛋黄后的鸡胚成分，主要成分包括尿囊液、羊水、尿囊液绒毛尿囊膜血管网在内的物质，置于低温冰柜中-20 -30°C冰冻，冰冻I 10小时后用粉碎机将其粉碎至50 90目。所述的反复冻融是将打浆后的鸡胚成分置于低温冰柜中，将样品冷冻至-20 -30°C后，冰冻I 4小时，然后置于室温条件下自然融化至冰水共存时，再置于低温冰柜中，将样品冷冻至-20 -30°C，冰冻I 4小时，如此反复冻融3 5次。 所述的过滤方法是将反复冻融后的鸡胚成分经过20目絹布过滤，然后再经过3μπι过滤器过滤。本专利技术的积极有益效果是I.本专利技术在简单快速制备鸡胚胎素的基础上进行了改进，在常规孵化鸡受精卵7 9天后将植物血凝素接种于尿囊腔中，因为植物血凝素能够诱导产生免疫干扰素，白细胞介素等细胞因子，使得某些活性蛋白的含量得到了提高。2.本专利技术鸡胚胎素的制备方法，保持了鸡胚胎中的各种生物活性物质。所生产的鸡胚胎素不但营养机体，还能促进机体组织的代谢，对机体的免疫起到调节作用。3.本专利技术鸡胚胎素的制备方法所获得的鸡胚胎素是一组具有高生物活性的生长刺激因子、神经生长因子、活性多糖、活性多肽、多种氨基酸和丰富的其他营养物质的小分子混合物，它们具有促生长和活化生理功能的精华成分，能激活人体组织细胞，活化组织器官功能，调节人体各种免疫力，提高人体抵抗疾病的能力，并可延缓衰老的作用。所获得的高生物活性鸡胚胎素可以被广泛用于制备高活性生物药品、功能性食品和化妆品等行业。四.具体实施例方式实施例I :精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化9天，所选鸡受精卵为产后3 7天内，夕卜形规则，无损伤。常规孵化方法中的孵化参数是①孵化温度37°C、孵化湿度60%左右③通风换气保持孵蛋箱空气中的氧含量在21%以上；④翻蛋每2小时翻蛋I次，孵化至第9天时用稀释至浓度O. I μ g/ml的植物血凝素接种于尿囊腔中，每只鸡胚O. 2ml，再常规孵化2天。此时，将孵化蛋取出弃去蛋壳、鸡胚胎、蛋黄。将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入4倍鸡胚成分体积预冷至4°C的无菌生理盐水，在80转/分的搅拌速度下搅拌10分钟，制成浆。将打成浆的鸡胚成分进行6次反复冻融，冰冻温度为_25°C，每次冰冻时间为4小时，室温条件下融化。反复冻融后20目絹布过滤。过滤后加入6倍体积预冷的生理盐水经3 μ m过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液。实施例2 精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化8天。常规孵化方法中的孵化参数是①孵化温度36°C、孵化湿度55%左右③通风换气保持孵蛋箱空气中的氧含量在21%以上；④翻蛋每I小时翻蛋I次，孵化至第8天时用稀释至浓度9 μ g/ml的植物血凝素接种于尿囊腔中，每只鸡胚O. 2ml，再常规孵化3天。此时，将孵化蛋取出弃去蛋壳、鸡胚胎、蛋黄。将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入5倍鸡胚成分体积预冷至4°C的无菌生理盐水，在60转/分的搅拌速度下搅拌10分钟，制成浆。将打成浆的鸡胚成分进行5次反复冻融，冰冻温度为_20°C，每次冰冻时间为3小时，室温条件下融化。反复冻融后20目絹布过滤。过滤后加入5倍体积预冷的生理盐水经3 μ m过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液。在相对湿度小于30%的环境中，将所得到的鸡胚胎素置于密闭容器中进行避光保存，以备用。鸡胚胎素活性测定I.鸡胚胎素含量测定实验如下将40只鸡受精卵随机分为两组，每组20只，常规 孵化至第9天时第一组用稀释至浓度O. I μ g/ml的植物血凝素接种于尿囊腔中，每只鸡胚O.2ml，再继续孵化2天。第二组不做任何处理继续孵化2天。详细结果参加表I:表I :植物血凝素对活性蛋白含量的影响本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸡胚活性成分的制备方法，包括精选受精卵、孵化和植物血凝素尿囊腔接种，其特征是：包括下列具体步骤：a.精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化7～9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化1～3天，孵化后去除蛋壳、胚体和蛋黄，将剩余物质放入冰柜中，在≤？20℃的温度条件下，冰冻1～10小时，然后对鸡胚成分进行粉碎；b.将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入4～6倍鸡胚成分体积预冷至0～4℃的无菌生理盐水，在50～80转/分的搅拌速度下搅拌6～10分钟；c.将打成浆的鸡胚成分进行4～6次反复冻融，冰冻温度为？20～？30℃，每次冰冻时间为1～4小时，室温条件下融化；d.将反复冻融的鸡胚成分经20目绢布过滤，过滤后再加入4～6倍体积预冷的生理盐水经3μm过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液；e.在相对湿度小于30％的环境中，将所得到的鸡胚胎素置于密闭容器中进行避光保存，以备用。

【技术特征摘要】
1.一种鸡胚活性成分的制备方法，包括精选受精卵、孵化和植物血凝素尿囊腔接种，其特征是包括下列具体步骤 a.精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化7 9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化I 3天，孵化后去除蛋壳、胚体和蛋黄，将剩余物质放入冰柜中，在< _20°C的温度条件下，冰冻I 10小时，然后对鸡胚成分进行粉碎； b.将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入4 6倍鸡胚成分体积预冷至O 4°C的无菌生理盐水,在50 80转/分的搅拌速度下搅拌6 10分钟； c.将打成浆的鸡胚成分进行4 6次反复冻融，冰冻温度为-20 -30°C，每次冰冻时间为I 4小时，室温条件下融化； d.将反复冻融的鸡胚成分经20目絹布过滤，过滤后再加入4 6倍体积预冷的生理盐水经3 μ m过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液； e.在相对湿度小于30%的环境中，将所得到的鸡胚胎素置于密闭容器中进行避光保存，以备用。2.根据权利要求书I所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是所述常规孵化方法中的孵化参数是 ①孵化温度36 38°C ;②孵化湿度相对湿度为40 60% ;③通风换气保持孵蛋箱空气中的氧含量在21%以...

【专利技术属性】
技术研发人员：李婷，
申请(专利权)人：天津泽世德生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：