一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法技术

本发明专利技术主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后，在含有0.5mg/L?2，4-D的MS条件下，100％的愈伤组织都产生了球形体细胞胚，且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内，反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基，空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚，且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗，继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1，v∶v))的营养杯中，温室训化成活率较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用小型生物反应器大量培养体细胞胚，简单快速无性繁殖三七再生植株的方法。本专利技术属于农业生物

技术介绍
三七(Panax notoginseng (Burk. ) F. H. Chen)又名田七、金不换、三七参等，为五加科人参属植物，三七为我国传统名贵中药材，主要以块根入药。三七性温，味甘、苦，具有止血镇痛、活血化瘀、滋补强壮和消除疲劳增强体力之功效，传统上常用于治疗咳血、吐血、月·经过多、皮下出血及跌打和刀枪损伤等症，具有多方面的药理作用和保健功能，开发前景广阔。由于三七同为人参属植物，而它的有效活性物质又高于或多于人参，因此又被现代中药药物学家称为“参中之王”。三七从播种至收获，要经三年以上时间(王淑琴等，《中国三七》，1993)，种子又有休眠，需要经过3-6个月的层积处理期才能发芽。因此，利用现代生物技术一诱导体细胞胚发生途径对其进行快速繁殖和种质保存一直是人们研究的问题。刘瑞驹等于1991年首次报道了三七组培苗的再生，他们以幼苗为材料，将茎、叶柄和叶分别进行离体培养，最后均从胚性愈伤组织中分化出胚状体，进而发育成完整植株(刘瑞驹，植物生理学通讯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤：1)利用无菌生生小苗的子叶、胚根、下胚轴等为外植体，通过常规培养方法获得不定根后，将其切成1cm的根段，接种到添加有1.0mg/L？2，4？D、30g/L蔗糖和3.0g/L？gelrite的MS固体培养基中进行暗培养诱导获得胚性愈伤组织，并在同样的条件下继代增殖；2)将胚性愈伤组织接种到含有0.5mg/L？2，4？D、30g/L蔗糖和3.0g/L？gelrite的MS固体培养基中进行暗培养，100％的愈伤组织都产生了球形体细胞胚，且产生的体细胞胚数量最多；将10.0g(大约1.65×104个)球形胚转入3L生物反应器...

【技术特征摘要】
1. 一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤 1)利用无菌生生小苗的子叶、胚根、下胚轴等为外植体，通过常规培养方法获得不定根后，将其切成Icm的根段，接种到添加有I. Omg/L 2，4_D、30g/L蔗糖和3. Og/L gelrite的MS固体培养基中进行暗培养诱导获得胚性愈伤组织，并在同样的条件下继代增殖； 2)将胚性愈伤组织接种 到含有O.5mg/L 2，4-D、30g/L蔗糖和3. Og/L gelrite的MS固体培养基中进行暗培养，100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚，且产生的体细胞胚数量最多；将10. Og(大约I. 65X IO4个)球形胚转入3L生物反应器内培养，该反应器内装有I.5L不加有任何植物生长调节剂的1...

【专利技术属性】
技术研发人员：由香玲，詹亚光，李玉花，谭啸，代金玲，陶雷，尹静，
申请(专利权)人：东北林业大学，由香玲，
类型：发明
国别省市：