一种人甲状腺球蛋白抗体（TGAb）的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法技术

?本发明专利技术涉及一种人甲状腺球蛋白抗体（TGAb）的磁微粒化学发光免疫检测方法，属于免疫检测分析技术领域。异硫氰酸荧光素（FITC）标记的TG抗原和碱性磷酸酶（AP）标记的人IgG抗体结合，形成抗原-抗体-酶标二抗的夹心免疫复合物，类似“三明治”结构。随后加入连有抗FITC抗体的磁性微粒，通过抗FITC抗体与FITC的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁颗粒上，在外加磁场中直接沉淀，不需离心即可将免疫反应形成的复合物与未结合的其它物质分离。本发明专利技术试剂盒将化学发光与磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，与现有技术相比，本发明专利技术试剂盒具有更高的灵敏度、线性范围宽、快速等诸多优点，并且大大降低了产品成本，在临床检验等方面具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫检测分析
，涉及检测血清中人甲状腺球蛋白抗体(TGAb)含量的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其测试方法
技术介绍
甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)是甲状腺滤泡柱状细胞内的一种糖蛋白，分子量为660KD，在甲状腺激素的合成、储存中有重要作用。在体内，甲状腺球 蛋白以胶质形式包含着T3和T4，储存在滤泡腔内，在酶的作用下，T3和T4游离到细胞浆内进入血液循环。 同时少量的TG也释放入血，正常人也能检测到TG，浓度为3-40ug/l。但当甲状腺因病理原因受损，大量的TG释放进入血液中，TG作为自身抗原，诱发产生抗TG抗体(TGAb)。TGAb作为甲状腺球蛋白的自身抗体，在自身免疫性甲状腺疾病(如有桥本甲状腺炎、Graves病)中有较高阳性率如在甲状腺炎出现频率约80%，Graves病TGAB的阳性率约为 60%( Rosenbaum D and Davies TF., 1992; Nordyke RA et al. , 1993; Jean Ruf etal. , 1994)，在其他甲状腺疾病及健康人群血清中亦可检出，但滴度较低。所以临床上，甲状腺球蛋白抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人甲状腺球蛋白抗体TGAb的磁微粒化学发光免疫检测方法，其特征在于：将羊抗FITC抗体与直径为0.1？5微米的磁微粒连接组成固相试剂，经捕捉反应体系中的FITC标记抗原、人甲状腺球蛋白抗体以及二抗酶标记试剂后形成固相？抗原？抗体？酶标二抗夹心复合物；所述的二抗酶标抗体中使用的酶是碱性磷酸酶AP；所述的二抗酶标试剂的偶联方法是将N？琥珀酰胺3？（2？吡啶二巯基）丙酸活化的抗体与Traunt’s试剂活化的碱性磷酸酶以1:0.5？2的比例混合，并用凝胶层析柱分离纯化；所使用的底物溶液为环二氧乙烷类衍生物。

【技术特征摘要】
1.一种人甲状腺球蛋白抗体TGAb的磁微粒化学发光免疫检测方法，其特征在于将羊抗FITC抗体与直径为O. 1-5微米的磁微粒连接组成固相试剂，经捕捉反应体系中的FITC标记抗原、人甲状腺球蛋白抗体以及二抗酶标记试剂后形成固相-抗原-抗体-酶标二抗夹心复合物；所述的二抗酶标抗体中使用的酶是碱性磷酸酶AP ;所述的二抗酶标试剂的偶联方法是将N-琥珀酰胺3- (2-吡啶二巯基)丙酸活化的抗体与Traunt’ s试剂活化的碱性磷酸酶以1:0. 5-2的比例混合，并用凝胶层析柱分离纯化；所使用的底物溶液为环二氧乙烷类衍生物。2.如权利要求I所述的TGAb磁微粒化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括磁微粒试剂；TGAb校准品；TGAb质控品；TGAb试剂A ；TGAb试剂B ;清洗浓缩液；发光底物溶液；样本稀释液； 所述的磁微粒试剂为连接羊抗FITC抗体的磁微粒溶液； 所述的校准品及质控品为含有一定量TGAb的BSA缓冲液； 所述的试剂A为含有一定量FITC标记的TG抗原溶液； 所述的试剂B即二抗酶标试剂，是碱性磷酸酶AP标记的人IgG抗体的混合物；...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪丹，丁建华，
申请(专利权)人：江阴泽成生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：